これらをオートクレーブ滅菌する。ブドウ糖を分けずに他の成分と混ぜた状態でオートクレーブすると、おそらくブドウ糖のカラメル化により培地が褐色になる。バクテリアが紛れ込んだ場合に備え、その増殖を防ぐために培地に抗生物質を加えることが多い。一度バクテリアを食わせた細胞を単独培養に戻すときには必須。μg/mL)などが用いられる。滅菌済フィルタを通して、滅菌したエッペンドルフチューブに小分けする(塩酸塩でない場合はエタノールに溶かす)。