Achievementsインフルエンザ粘膜免疫ワクチンは、ワクチン株のみならず抗原変異株や異なる亜型ウイルスに対しても交差感染防御効果を有する。この交差感染防御の主要因は、経鼻粘膜免疫によって誘導される分泌型IgA抗体であるとの報告があるが、どのようにして交差感染防御に働くかは分かっていない。本研究では、粘膜免疫によって誘導される抗体の機能をモノクローナル抗体を用いて解析し、交差感染防御メカニズムを明らかにする。これまでにIgAの抗ウイルスメカニズムを解明するため、ヘマグルチニン特異的な亜型間交差中和IgG抗体S139/1とそのクラススイッチIgA抗体を用いて、抗ウイルス活性を比較検討した。IgAはインフルエンザウイルスに対しIgGよりも高い結合および中和活性を有していること、また効率的に感染細胞からのウイルス粒子の放出を阻害することを見出した。このIgAとIgGのセットを用いて細胞内中和について検討した。細胞を作製して、細胞モデルを構築した。トランスウェルプレート膜上でpIgR発現MDCK細胞を培養し、インサート内にウイルスを感染させて培養後、底部にモノクローナル抗体を加え、上清中および細胞内のウイルスを経時的に測定した。その結果、IgAはIgGよりも上清中および細胞内両方のウイルスタイターを減少させた。したがって、IgAは細胞内中和においても有効に働くことが明らかになった。これらのIgAの強い抗ウイルス活性が亜型間交差防御に関与している可能性が示唆された。planned.Reason当初予定していた、経鼻免疫したマウスの鼻腔内細胞およびNALTからのモノクローナル抗体は作出できなかった。これは細胞数が少ないことが原因ではないかと考え、現在引き続き検討を続けている。細胞モデルの構築に成功した。この方法を用いて解析した結果、IgAは細胞内でウイルスタイターを減少させ、ウイルス粒子形成・放出においても強い阻害活性を有することを明らかにした。ついてIgAとIgGで比較検討する。調べるため、ウイルス粒子放出阻害活性および細胞内中和活性についてIgAとIgGを用いて解析する。Carryover国際学会での発表を計画していたが、日程の都合で参加できなかった。動物実験を計画していたが、次年度に予定していた実験を先に行ったので、動物実験は次年度に持ち越した。Budget動物を用いた感染防御試験を行うため、抗体調整用の試薬等の消耗品および実験用動物の購入に使用する。