)で、最終的な培地の液量が100μl/wellになるように、96ウェルプレートで細胞を培養する*。培養時間や培養細胞濃度は、個々の実験条件や用いている細胞系による。ほとんどの実験では細胞濃度は0.1~5×104個/well、培養時間は24~96時間が適当である。wellあたり10μlずつ加える。)で0.5~4時間インキュベートする。)に対するサンプルの吸光度を測定する。よるが、420-480nmの間である(最大吸光は約440nm)(図1)。対照波長は600nm以上がよい。Systenは、10%FCSを含むRPMI1640(共にBioWittaker社)の細胞懸濁水に1:10で希釈した。WST-1を10μl加える。WST-1の吸光度)として用いる。WST-1を加えた場合でも、わずかな自発的の吸光度がある。このバックグランドの吸光度は、培地、インキュベーション時間、光への露出による。2時間後の典型的なバックグランドの吸光度は0.1~0.2の間である。WST-1添加後の至適インキュベーション時間は、個々の実験により異なる(例えば、用いている細胞の種類や濃度など)。WST-1を添加後、異なった時間(例えば、0.5、1、2、4時間)で繰り返し吸光度を測定することにより最適のインキュベーション時間を決める。WST-1存在下で細胞をより長い時間インキュベーションするとよい。96ウェルプレートで細胞培養を行う。WST-1を加えて、37°C、加湿、常圧下でインキュベーションする。対照波長600nm以上で、420-480nmでマイクロプレートリーダーを用いて吸光度を測定する。