この方法は費用がかかります。30aを合成標的遺伝子とT4リガーゼにより一晩連結し、10μLの連結生成物を100μLのRosetta(DE3)コンピテント細胞に添加し、そして上に置いた。氷で30分、42°Cで60秒間熱ショックを与える。予熱した0.45mLのLB培地を加え、37°Cで1時間、220°Cでインキュベートした。mLのカナマイシンを含むLBプレートに200μLの細菌液を添加し、12°Cで12〜16時間一晩培養して組み換え株大腸菌Rossetaを得た。エンレダクターゼ遺伝子を含む組換え大腸菌の単一コロニーを、一晩の活性化のためにアンピシリン耐性を含む液体LB培地に接種した。600値を0.6〜0.8に調整し、誘導剤を添加して一晩培養を続けた。細胞を遠心分離により集めた。細胞をリン酸緩衝液に懸濁し、細胞懸濁液を氷浴中に置き、超音波により破砕し、そして最後に遠心分離して組換えオレフィンレダクターゼを得る。フラノンをpH6.0〜9.0の水相緩衝液に加える。不純物を珪藻土で濾別し、濾液を酢酸エチルで抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、最後に減圧蒸留し、再結晶してブリバラセタム中間体を得る。63095−51−2。ブリバラセタム中間体1。ブリバラセタムは部分発症発作の治療に使用されるレベチラセタムのラセタム誘導体です。ブリバラセタムはレベチラセタム2よりも20倍高い親和性でSV2Aに結合する。それはUCBによって製造された商標名ブリビアクトで入手可能である。Ltd.著作権を有します。