分化のモニタリング多能性幹細胞から肝細胞への分化状態モニタリング多能性幹細胞から肝細胞への分化状態モニタリングカタログの見方ヒトiPS細胞などの多能性幹細胞から分化・誘導過程を経て作製した肝細胞は、細胞移植治療や医薬品の毒性評価などへの利用が期待されており、均一で高機能の肝細胞を効率的に大量製造できる分化誘導方法の研究が大きな注目を集めている。タカラバイオでは、こうしたiPS細胞など多能性幹細胞を用いた肝細胞分化誘導法の研究に有用な分化モニタリングツールを用意している。肝細胞への分化は、図1に示すような多段階の分化過程を経て行われることが知られている。したがって、これら各分化段階に特徴的に発現するマーカー遺伝子の発現レベルをリアルタイムRT-PCRで解析することにより、肝分化のおおよその状態をモニタリングすることが可能となる。PH017)には、これら各分化段階で発現することが知られている代表的な遺伝子マーカーの発現レベルをリアルタイムRT-PCRにより解析するために必要なプライマーが搭載されている。これら遺伝子マーカーと併せてハウスキーピング遺伝子検出用プライマーも搭載されているため、相対定量法により、多能性幹細胞から肝細胞への分化・誘導過程を1枚のArrayで簡単にモニタリングすることが可能である。Differentiationを用いて解析した。Greenシリーズ」に名称変更いたします。製品コードや試薬の性能に変更はありません。これまで通りご使用ください。iPS細胞では、成人肝臓組織に対してPluripotent/ESマーカーが高発現であるのに対し、Hepaticマーカーの多くが低発現状態にあることが確認された(A)。Enzyme、Transporterなどの一部のHepaticマーカーが低発現状態にあることが確認された(B)。αフェトプロテイン(AFP)およびアルブミン(ALB)はそれぞれ代表的な初期肝細胞マーカー、初期~成熟肝細胞分化マーカとして知られており、肝分化の進行とともに細胞外に分泌される。従って、分化過程において培地中に分泌されたこれら分化マーカータンパク量を測定することで、分化細胞を維持したまま肝分化の状態をモニタリングすることが可能である。ALP量を測定でき、細胞分化初期の低レベル量の分泌も培養上清からダイレクトに検出することが可能である。未分化細胞の肝分化過程で上清中に分泌されたヒトAFPとヒトALB量を測定した。ml中に産生されたAFP、ALBの総量(ng)を表す。7246)は、リアルタイムPCRを利用してヒトのミトコンドリアDNA(mtDNA)コピー数を核DNA(nDNA)を基準として相対的に測定するためのプライマーセットである。iPS細胞等の多能性幹細胞から肝細胞方向への分化・誘導過程で増加することが報告されているmtDNAコピー数のモニタリングにも有用である。iPS細胞2株および肝臓組織より調製したゲノムDNA(mtDNA含)を鋳型とし、mtDNAコピー数の検出を行った。肝細胞が大部分を占める肝臓組織において、明らかに高いmtDNAコピー数の増加を確認することができた。M226)この製品を見た人は、こんな製品も見ています。弊社の取扱い製品はすべて研究用として販売しております。ヒト、動物への医療、臨床診断用には使用しないようご注意ください。して使用しないでください。ための改変、商用製品の製造に使用することは禁止されています。タカラバイオ製品に関連するライセンス・パテントについては、ライセンスマークをクリックして内容をご確認ください。他メーカーの製品に関するライセンス・パテントについては、各メーカーのウェブサイトまたはメーカー発行のカタログ等でご確認ください。ウェブサイトに掲載している会社名および商品名などは、各社の商号、または登録済みもしくは未登録の商標であり、これらは各所有者に帰属します。