CS1234,其中,人bFGF中26、70、80和93位的Cys都已由Ser所取代。第1滤膜保留5分钟,第2滤膜保留15分钟。4×Denhardt氏溶液(聚乙烯吡咯烷酮、Ficoll和牛血清白蛋白,1×=0.02%)、0.1%SDS、50mM磷酸钠缓冲液(pH7.0)和100μg/ml变性的鲑鱼精子DNA。50°C洗涤30分钟,该洗涤缓冲液含有0.1%SDS和数量减少了的SSC。所用SSC的最小浓度为0.1×SSC。而有3—10个突变的M13-P1空斑与探针杂交。mutations.选取一个突变的M13-P1空斑接种于JM105培养基上。ssDNA.其结果是,分别证实TGT(Cys-88)密码子已变为TCT(Ser)密码子;TGT(Cys-93)密码子已变为TCT(Ser)密码子。使第1滤膜保留5分钟,第2滤膜保留15分钟。4×Denhardt氏溶液(聚乙烯吡咯烷酮、Ficoll和牛血清白蛋白,1×=0.02%)、0.1%SDS、50mM磷酸钠缓冲液(pH7.0)和100μg/ml变性的鲑鱼精子DNA。50°C洗涤30分钟,该洗涤缓冲液含有0.1%SDS和数量减少了的SSC。所用SSC的最小浓度为0.1×SSC。而有3—10个突变的M13-P14空斑与探针杂交。probe.选取一个突变的M13-P14空斑,接种于JM105培养基上。ssDNA.其结果是,分别证实了TGT(Cys-70)密码子已变为TCTCT(Ser)密码子;TGT(Cys-93)密码子已变为TCT(Ser)密码子。使第1滤膜保留5分钟,第2滤膜保留15分钟。4×Denhardt氏溶液(聚乙烯吡咯烷酮、Ficoll和牛血清白蛋白、1×=0.02%)、0.1%SDS、50mM磷酸钠缓冲液(pH7.0)和100μg/ml变性的鲑鱼精子DNA。与105cpm/ml的寡核苷酸引物42°C下杂交24小时。50°C洗涤30分钟,该洗涤缓冲液含有0.1%SDS和数量减少了的SSC。所用SSC的最小浓度为0.1×SSC。而有3—10个突变的M13-P3空斑与探针杂交。mutations.选取一个突变的M13-P3空斑,接种于JM105培养基上。ssDNA.结果证实了TGT(Cys-93)密码子已变为TCT(Ser)密码子。6得到的复制型(RF)M13-P12,以构建用于表达人bFGF突变蛋白的质粒bTB776(图18)。