(产生了限制性酶HaeII的识别顺序)(参见图2)。(产生了限制性酶AluI的识别顺序)(见图2)。(产生了限制性酶HinfI的识别顺序)(见图2)。第1滤膜保持5分钟,第2滤膜保持15分钟。用10ml/滤膜pH为7.0的DNA杂交缓冲液(5×SSC)使重迭的滤膜55°C下预杂交4小时,该杂交缓冲液含有4×Denhardt氏溶液(聚乙烯吡咯烷酮、Ficoll和牛血清白蛋白,1X=0.02%)、0.1%SDS、50mM磷酸钠缓冲液(pH7.0)和100μg/ml变性的鲑鱼精子DNA。杂交于42°C下进行24小时,使用105cpm/ml的寡核苷酸引物。50°C洗涤30分钟,该缓冲液含有0.1%SDS和渐减量的SSC。所用SSC的最小浓度为0.1×SSC。而有3—10个突变的M13-PO空斑与探针杂交。probe.选取一个突变的M13-PO空斑,接种于M105培养基上。analysis.其结果是,分别证实了TGC(Cys-26)密码子已变成了TCT(Ser)密码子;TGT(Cys-70)密码子变成了AGC(Ser)密码子;TGT(Cys-88)密码子变为TCT(Ser)密码子;以及TGT(Cys-93)密码子变为TCT(Ser)密码子。pTB739:上述实例1得到的复制型(RF)M13-P1用限制性酶EcoRI和PstI切割,得到长约0.5Kb的含有人bFGF突变蛋白编码区的DNA片段。pTB739(图7)。M9培养基中,其中含有1%葡萄糖、0.4%酪蛋白氨基酸和8μg/ml四环素,当Klett值达到大约200时,向其中加入浓度为25μg/ml的3β-吲哚丙烯酸,然后再培养4小时。Tris-HCl(pH7.6)的10%蔗糖溶液中。),将混合物于0°C下放置45分钟,然后超声处理30秒钟。BALB/c3T3细胞,然后培养。第二天,换成含有0.5%小牛血清的DMEM培养基。20小时后,每孔中加入2μl3H-Tdr(5Ci/mmole,0.5mCi/mlRC(Amersham)。