27得到的复制型(RF)M13-PC86,以构建用于表达人bFGF突变蛋白的质粒pTB796(图50)。(EIA),具体步骤如下列(a)至(j)所述。bFGF突变蛋白C86。Laboratories,USA)溶液。两周以后,腹腔内接种10μg溶于生理盐水的人bFGF溶液。(下文简称IH培养基)。Milstein,C,Nature256:495,1975)进行细胞融合。IH培养基中含45%聚乙二醇6000(下文称PEG6000)的溶液。将PEG6000溶液预加热到37°C并逐步加入。5分钟以后,以0.5ml/分的速率加入37°C预热的IH培养基至10ml。600rpm离心15分钟,去掉上清液。IH培养基中,此悬浮液以每孔2ml移入24孔微量滴定板(Linbro)各孔中。bFGF)并于室温下保温2小时。