C23,其中,70位和88位的Cys已由Ser所取代。第1滤膜保留5分钟,第2滤膜保留15分钟。4×Denhardt氏溶液(聚乙烯吡咯烷酮、Ficoll和牛血清白蛋白,1X=0.02%)、0.1%SDS、50mM磷酸钠缓冲液(pH7.0)和100μg/ml变性的鲑鱼精子DNA。与105cpm/ml的寡核苷酸引物于42°C下杂交24小时。50°C洗涤30分钟,该洗涤缓冲液含有0.1%SDS和数量减少了的SSC。而有3-10个突变的M13-P23空斑与探针杂交。mutations.选取一个突变的M13-P23空斑,接种于JM105培养基上。ssDNA.其结果是,分别证实了TGC(Cys-26)密码子已变为TCT(Ser)密码子;且TGT(Cys-93)密码子已变为TCT(Ser)密码子。8得到的复制型(RF)M13-P123,以构建用于人表达bFGF突变蛋白的质粒pTB764(图14)。