入力中の回答があります。ページを離れますか?※ページを離れると、回答が消えてしまいますページを離れるA回答を続ける入力中のお礼があります。RNAを組織から抽出し、RNase-free水に溶解し、-80度で保存しています。今後、このRNAを使って実験をしようと思っているのですが、、、RNAがどれくらい温度に対して安定なのか心配しています。いうのも、今後、実験のたびにRNAを冷凍庫から取り出し、必要な分量を分抽した後、再び冷凍庫へ返すといったことを繰り返すからです。RNAにお詳しい方がいらっしゃいましたら、(1)RNAの熱安定性について(2)一般的なRNAの保存法とその注意点(3)冷凍→分抽→冷凍の繰り返し作業についての意見およびより良い方法、の3点について教えていただけないでしょうか?よろしくお願いします。通報するこの質問への回答は締め切られました。16:57ボイルするとか、オートクレーブするとかめちゃくちゃな加熱でなければ、RNAが特に熱に弱いということはないと思います。RNaseのコンタミや過剰の水酸化物イオン、水素イオンがある場合(つまり適当なバッファリングをしていない場合)、温度が高いと加水分解を促進してしまうでしょう。水溶液をディープフリーザで凍結保存している限り安定なはずですが、凍結融解を繰り返すのは確実に分解が進みますから(いろいろな要因があるでしょうが、一つには氷の結晶が生じるときに高分子に剪断力がかかる)1回分から数回分の使用量で小分けにしましょう。むかしは、RNA水溶液に対して3倍量のEtOHを加えて-20°C、あるいは-80°Cで保存するのが一番安心だといわれていました。このRNAのアルコール溶液を必要量とって、塩を加えEtOH沈殿してサンプルとしました。現在のトレンドは、RNAを脱イオンしたフォルムアミドに溶解して-20°Cで保存する方法です。フォルムアミドでRNAが安定化され、凍結しないのでハンドリングが容易、多くの目的ではフォルムアミド溶液そのままで使用できます。必要な場合はEtOH沈殿で溶媒交換します。RNAを化学的に分解する際には、pHを9にして60°Cで数分~数十分加熱する処理を行います。通常の溶解状態では、熱安定性は気にする必要はありません。RNAaseやバクテリアのコンタミが最も恐ろしいので、とにかく分注して保存します。冷凍保存しますが、凍結融解の際に物理的な切断が起こり得ますので、これを避けるため50%EtOH溶液として-30°C程度で保存、あるいEtOH沈殿の状態で-80°Cで保存します。お持ちのRNAの量によりますが、-30°Cと-80°Cに数本ずつストックされると良いと思います。日常的には-30°Cのストックを使用します。それが尽きたら-80°Cのストックを50%EtOH溶液に調製し直して同様に使用します。通報するこのQ&Aに関連する人気のQ&A「rnaとは」に関するQ&A:葉酸サプリでおすすめがあれば教えてください。お探しのQ&Aが見つからない時は、教えて!gooで質問しましょう!全カテゴリから検索このカテゴリから検索Q質問する(無料)このQ&Aを見た人はこんなQ&Aも見ています出産前後の痔にはご注意!一体なぜ妊娠・出産には痔がつきまとうのだろうか?その理由を見ていこう。生物学6RNA抽出について生物学7RNAの電気泳動について生物学8RNAの単離について(フェノール抽出)化学9エクセルで計算すると2.43E-19などと表示される。生物学14DNAとRNAのどのような性質に違いから水溶性になるのか,脂溶性になるのかがわかりません.生物学15プラスミドDNAを抽出する時のスピンカラム法の原理を教えてください。痔にはご注意!一体なぜ妊娠・出産には痔がつきまとうのだろうか?その理由を見ていこう。生物学6RNA抽出について生物学7RNAの電気泳動について生物学8RNAの単離について(フェノール抽出)化学9エクセルで計算すると2.43E-19などと表示される。生物学14DNAとRNAのどのような性質に違いから水溶性になるのか,脂溶性になるのかがわかりません.生物学15プラスミドDNAを抽出する時のスピンカラム法の原理を教えてください。RT-PCRをするためにRNA抽出をしています。回答数ランキングです。このQ&Aと関連する良く見られている質問QRNAの電気泳動についてRNAの電気泳動について初歩的な質問で申し訳ありません。チェックを行っています。実験が成功しているか判断する・・・というところまで調べたのですが、28Sと18Sはおおよそ何bp付近にバンドが現れるものなのでしょうか。bp付近に現れています。bpの上あたりにも薄くバンドが現れています。同じような質問がすでにあったら申し訳ありません。行き詰ってしまっています。Aベストアンサーそもそも、RNAは一本鎖ですので、DNAマーカーのどの分子量のバンドと同じか?と言われると実際に比較してみないとわからないです。RNAの分子量は、RNAの電気泳動をホルムアミドやホルマリンを加えた変性条件でする場合と普通のDNAを泳動する場合と同じ条件でする場合とでも異なります。質問者さんの文脈から察するに、おそらく、抽出したRNAがちゃんとしたものか?(分解していないか?等)ということを実験前に確認したいということと思われるので、そのことについてアドバイス致します。http://www.funakoshi.co.jp/shiyaku/entry/856.php?mode=printこちらのサイトの泳動像をご覧下さい。RNAを泳動した場合、ほとんど2本しかバンドとして確認することができません。そのメインに見える2本がきちんとバンドとして確認されれば(ほぼ2対1になるのはおっしゃる通り)、そのRNAはちゃんと精製できていると判断していいと思います。そもそも、RNAは一本鎖ですので、DNAマーカーのどの分子量のバンドと同じか?と言われると実際に比較してみないとわからないです。RNAの分子量は、RNAの電気泳動をホルムアミドやホルマリンを加えた変性条件でする場合と普通のDNAを泳動する場合と同じ条件でする場合とでも異なります。質問者さんの文脈から察するに、おそらく、抽出したRNAがちゃんとしたものか?(分解していないか?等)ということを実験前に確認したいということと思われるので、そのことについてアドバイス致します。基本的な事で本当にすいません。「cDNAは安定なので多少室温においていても全然大丈夫」いずれも構造上は一本鎖なので安定性は同じように思えるのですが、この違いは何なのでしょう??同じRNAからコピーして作られたものだからほとんど同じような構造しているはずですよね?ちなみに同じ様な質問になってしまうのかもしれませんが、RNaseでcDNAは分解されず、DNaseで分解されるのもなぜなのか???です。