The biological activity of anti-CIITA RNaseP(M1-3408-GS)
目的 通过抗CⅡTA RNaseP抑制HeLa细胞表面MHCⅡ分子的表达. 方法 M1-RNA是RNaseP的催化活性单位,从包含M1-RNA的pTK117质粒克隆抗CⅡTA RNaseP(M1-3408-GS),定向插入腺相关病毒载体psNAV(psNAV-M1-3408-GS); 以RT-PCR从Raji细胞株克隆靶基因模板,插入pGEM-7zf(+)载体(pGEM-3176).psNAV-M1-3408-GS和pGEM-3176分别进行体外转录和体外切割实验.通过纳米载体介导psNAV-M1-3408-GS质粒稳定转染HeLa细胞,应用流式细胞术检测其表面HLA-DR、DP、DQ抗原表达,RT-PCR检测其CⅡTA mRNA水平. 结果 M1-3408-GS与pGEM-3176体外切割产物电泳见预期切割条带.M1-3408-GS+HeLa细胞与对照组比较,其表面HLA-DR、DP、DQ抗原诱导型表达分别降低了79.21%、90.31%及48.30%;同时诱导型CⅡTA mRNA含量减少. 结论抗CⅡTA核糖核酸酶P(M1-3408-GS)有可能发展为新一代抑制自身免疫疾病的核酸药物。