Axenic cultivation and gene identification of Pneumocystis jiroveci isolated from Pneumocystis pneumonia patients
目的 建立人源肺孢子虫(Pneumocystis.jiroveci,Pj)纯培养株.方法 从肺孢子虫肺炎(PCP)患者的支气管肺泡灌洗液(BALF)中分离Pj,用改良IMDM培养基做原代、传代和冻存复苏培养;以四胺银染色计数法观察虫体增殖情况;以线粒体rRNA大亚基特异引物扩增培养物中的目的基因,与基因库中的鼠源和人源肺孢子虫基因做序列比较.结果 用添加S-腺苷甲硫氨酸(SAM)等辅助剂的IMDM培养基从2例PCP患者的BALF中分离出2个Pj纯培养株.分离培养的Pj可进行冷冻保存和复苏培养.培养120 h的Pj包囊可增殖3.2倍.基因序列分析证实分离出的Pj株与鼠源性肺孢子虫的线粒体rRNA大亚基同源性为67.8%,与GenBank中Pj的同源性为93.2%.结论 用本法建立了2个Pj纯培养株。