articulos citometria de flujo
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Diagnostico, clasificacion y tratamiento de la leucemia aguda de linaje ambiguo
Introduccion: Las leucemias agudas de linaje ambiguo constituyen un grupo heterogeneo de leucemias agudas que no muestran una evidencia clara de diferenciacion a lo largo del linaje celular. El diagnostico definitivo se realiza exclusivamente por las caracteristicas inmunofenotipicas, con el uso de la citometria de flujo multiparametrica. Objetivo: Actualizar los criterios diagnosticos, la clasificacion, el manejo clinico y terapeutico de las leucemias agudas de linaje ambiguo. Metodos: Se realizo una busqueda de informacion cientifica relacionada con el tema en libros de textos de Hematologia Clinica y en articulos publicados a traves de PUBMED en los ultimos 10 anos. Se hizo un analisis y resumen de la bibliografia revisada. Analisis y sintesis de la informacion: Las caracteristicas morfologicas de las celulas leucemicas procedentes de los pacientes con leucemias agudas de linaje ambiguo no muestran uniformidad. Pueden encontrarse de forma simultanea blastos de diferentes tamanos y estados de maduracion. Estos pueden presentar apariencia linfoide, mieloide, indiferenciada o mixta. Conclusion: Las leucemias agudas de linaje ambiguo constituyen un subgrupo de alto riesgo, con un pronostico desfavorable y una pobre supervivencia global de los enfermos. Su reporte oportuno es indispensable para aunar los criterios de la toma de decisiones terapeuticas en este grupo de pacientes.
Vianed Marsan Suarez Gabriela Diaz Dominguez Yenisey Triana Marrero
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Caso de linfoma No Hodgkin detectado por aglutinacion de linfocitos en sangre periferica
La agregacion de linfocitos en extendidos de sangre periferica es una curiosidad hematologica poco documentada, que se presenta particularmente como un fenomeno "In Vitro" Existen pocos argumentos solidos que expliquen este fenomeno cuya causa subyacente aun es desconocida. En algunos articulos medicos se ha descrito alguna asociacion de este fenomeno con linfomas de Celulas B de Zona Marginal, linfoma esplenico de celulas B y linfoma de celulas del manto, entre otras alteraciones hematologicas. En este articulo se presenta un caso de una mujer de 99 anos con fenomeno de agregacion de linfocitos en una muestra de sangre periferica obtenida con EDTA a la cual se le realizaron analisis de citometria de flujo, los cuales revelaron un diagnostico compatible con un Linfoma No Hodgkin de celulas B tipo MALT.
William Quiros Quiros Isela Acosta Gomez
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Hallazgo de satelitismo plaquetario alrededor de linfocitos en una neoplasia de celulas B
Resumen El satelitismo plaquetario es un fenomeno descrito en una gran cantidad de articulos medicos, pero casi exclusivamente asociado con la adherencia de plaquetas a neutrofilos, monocitos y basofilos. Aunque se han propuesto algunas explicaciones para este hecho, la causa subyacente aun es desconocida. Se presenta un caso de fenomeno de satelitismo plaquetario alrededor de celulas linfoides en una muestra de sangre periferica obtenida con EDTA. Se realizaron analisis de citometria de flujo, inmunohistoquimica y biopsia de medula osea los cuales revelaron un diagnostico compatible con linfoma de celulas del manto. El hallazgo de satelitismo de plaquetas en pacientes con linfoma es una observacion muy poco frecuente, pero ya ha sido reportada en linfomas de celulas del manto y en linfomas de celulas B de zona marginal.
William Quiros Quiros
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Efecto de la criopreservacion en la integridad acrosomal de espermatozoides viables de alpaca evaluada mediante citometria de flujo
El objetivo del presente estudio fue determinar el efecto de la criopreservacion sobre la integridad acrosomal en espermatozoides viables de alpaca. Se procesaron muestras de 46 testiculos de alpaca que presentaron una motilidad >30% y concentracion espermatica >50x106 espermatozoides/ml. Los espermatozoides recuperados de la cola del epididimo se separaron en dos alicuotas de 500 ul. La primera alicuota fue para la evaluacion inicial en fresco y la segunda alicuota se congelo en pajillas que fueron almacenadas en nitrogeno liquido hasta el dia de su evaluacion. Para la evaluacion de viabilidad e integridad acrosomal, 100 ul de cada muestra fueron incubadas con 2.5 ul de FITC PSA (100 ug/ml) y 0.5 ul de ioduro de propidio (PI, 2.4 mM) por 10 min a 38 degC. Inmediatamente despues, las muestras se evaluaron por citometria de flujo, adquiriendose diez mil eventos compatibles con espermatozoides por muestra. FITC PSA y PI fueron excitados con un laser de 488 nm, y la emision de fluorescencia fue detectada utilizando los canales Ch02 (505 560 nm) para FITC PSA y Ch05 (642 740nm) para PI. Se determino el porcentaje de espermatozoides con integridad acrosomal (FITC PSA negativos) de la poblacion de espermatozoides viables (PI negativos) Se utilizo la prueba de los rangos con signos de Wilcoxon para determinar como la criopreservacion afecta la integridad acrosomal en los espermatozoides viables. Se encontro que la integridad acrosomal de los espermatozoides viables frescos (98.25 5.41% fue similar a la de los espermatozoides viables pos descongelamiento (98.75 2.17% Se concluye que los espermatozoides viables de alpaca antes y despues del proceso de criopreservacion mantienen un elevado porcentaje de integridad acrosomal.
Maria Dolores Perez-Rosales B Rafael Roman A Alexei Santiani
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Aplicaciones de la citometria de flujo en el estudio de los sindromes linfoproliferativos cronicos
Introduccion: la citometria de flujo (CMF) es una tecnicade avanzada, objetiva y altamente sensible que permite el analisis y la cuantificacionsimultanea de multiples parametros celulares, muy utilizada en el estudio de las hemopatias malignas. En los ultimos anos, ha demostrado ser de gran utilidad en la identificacion y la caracterizacion inmunofenotipicade los sindromes linfoproliferativos cronicos (SLPC) que constituyen un grupo heterogeneo de enfermedades caracterizadas por la expansion monoclonal de celulas linfoides de aspecto maduro. Objetivos: exponer los aspectos generales a considerar de la tecnica de CMF aplicada al estudio de los SLPC y la clasificacion inmunofenotipica de estas entidades. Metodos: se realizo una revision bibliografica acerca del tema utilizando motores de busqueda como SciELO y Pubmed. Conclusiones: la CMF permite el analisis, la interpretacion y la clasificacion inmunofenotipicadel SLPCy es una herramienta util en las que se apoya el diagnostico y el seguimiento de estos pacientes.
Yenisey Triana Marrero Vianed Marsan Suarez
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Preseleccion del sexo mediante citometria de flujo en la especie canina: situacion actual
espanolLa preseleccion del sexo de la descendencia basada en la separacion de espermatozoides X e Y mediante citometria de flujo es una biotecnologia emergente en la especie canina. El desarrollo y la optimizacion de su eficiencia contribuirian a la mejora de los programas de cria, en combinacion con otras tecnicas utilizadas ya actualmente de forma rutinaria en esta especie, como son la conservacion de semen y la inseminacion artificial. A continuacion, se revisan diversos aspectos en los que se basa esta biotecnologia, asi como su situacion actual y limitaciones en la especie canina. EnglishSex pre selection of offspring based on the separation of X and Y sperm cells by flow cytometry is an emerging biotechnology in the canine species. The development and optimization of this biotechnology efficiency, combined with other biotechnologies already used in this species, such as seminal cryopreservation and artificial insemination, would contribute to the improvement of breeding programs. We review various aspects on which this biotechnology is based, as well as the current situation and limitations in the canine species.
Clementina Rodenas Inmaculada Parrilla Riera Xiomara Lucas Arjona
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Determinacion del tamano del genoma de Gmelina arborea Roxb. utilizando citometria de flujo
La melina es una especie forestal con una alta calidad maderable y de importancia economica para diferentes paises tropicales como Colombia. No obstante, existe poca informacion acerca de su genetica, lo cual es pertinente en programas de mejoramiento. Con el fin de determinar el tamano del genoma de Gmelina arborea (valor C) se obtuvieron suspensiones nucleares a partir de hojas, las cuales se analizaron mediante citometria de flujo. Para la obtencion de suspensiones acuosas de nucleos, se evaluaron cuatro buffers de extraccion, de los cuales, el buffer LB01 produjo poblaciones nucleares intactas y con mayor homogeneidad. Se analizaron tres especies vegetales como posibles estandares para la determinacion del valor C; utilizando tomate como estandar referente, se obtuvo un valor C para melina de 467 Mpb. Este es el primer reporte relacionado con la estimacion del valor C en melina, por lo que se genera asi informacion importante para incrementar el conocimiento relacionado con esta especie.
Mary Luz Yaya Lancheros Wilson Fernando Vicuna Teran
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Asociacion entre parametros convencionales y computarizados de calidad seminal con la evaluacion por citometria de flujo de semen bovino congelado
El objetivo de este estudio fue evaluar la asociacion entre parametros convencionales y computarizados de calidad seminal con la evaluacion por citometria de flujo de semen bovino congelado. El semen de 10 eyaculados de cinco toros fue congelado. Se evaluo la movilidad total (MT) la movilidad progresiva (MP) la velocidad lineal (VSL) la velocidad curvilinea (VCL) y la velocidad media (VAP) del semen descongelado utilizando el sistema SCA(r) La morfologia normal (MN) la vitalidad del esperma (VE) y la integridad funcional de la membrana se evaluaron mediante la tincion con eosina nigrosina y la prueba hipoosmotica (HOST) El potencial de membrana mitocondrial (PsM) y la estabilidad de la membrana se evaluaron por citometria de flujo a traves de las sondas DiOC6(3)/PI y M 540/Yopro 1, respectivamente. Se calcularon coeficientes de correlacion de Pearson y se ajustaron modelos de regresion lineal multiple (p<0.05) Se hallaron correlaciones positivas entre DPsM Alto y DPsM Medio con diferentes parametros de calidad seminal (p<0.05) Asi mismo, se encontraron coeficientes de correlacion positivos entre la poblacion de espermatozoides no criocapacitados no apoptoticos (M Y y todos los parametros evaluados (p<0.05) La mayoria de los coeficientes de regresion para las poblaciones de espermatozoides con mayor DPsM y estabilidad de membrana, indicaron incrementos significativos en la calidad del semen congelado descongelado (p<0.05) Se concluye que la actividad mitocondrial y la estabilidad de membrana evaluadas por citometria de flujo, estan asociadas con la calidad espermatica estimada por metodos convencionales y computarizados, en el semen bovino criopreservado.
Elsa Varela Mauricio Rojas Giovanni Restrepo
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Utilidad de la citometria de flujo para la deteccion de Pseudomonas aeruginosa productoras de metalobetalactamasas
Con el objetivo de determinar la utilidad de la citometria de flujo para la deteccion de Pseudomonas aeruginosa productoras de metalobetalactamasas (MBL) se estudiaron aislamientos de P. aeruginosa genotipicamente caracterizados del cepario del laboratorio de Epidemiologia Molecular y Genetica de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos. Se analizaron 29 aislamientos (17 productoras de MBL y 12 no productoras de MBL) con el kit de viabilidad celular FACSCalibur (Becton Dickinson) Se utilizaron dos tratamientos, uno con meropenem y el otro con meropenem EDTA. Usando la razon de aumento de fluorescencia en las celulas no vivas, se demostro una diferencia significativa entre las productoras de MBL y las no MBL, considerando como punto de corte una razon >1,6. Se determino una sensibilidad de 94,1% y una especificidad del 100% La citometria de flujo constituye una alternativa para la deteccion de P. aeruginosa productora de MBL.
Ivan Alexander Salinas-Salcedo Jose Antonio Saldana-Jimenez Jose Manuel Guevara-Canales Edgar Gonzales-Escalante
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Diseno y optimizacion de un tubo policromatico de citometria de flujo para inmunofenotipo linfocitario periferico
Introduccion: La citometria de flujo permite la cuantificacion de las subpoblaciones de linfocitos con una elevada sensibilidad, especificidad y objetividad. Estas ventajas solo se logran con un proceso laborioso de diseno individualizado y controlado para cada experimento. Objetivo: Disenar un protocolo de un solo tubo policromatico de citometria flujo para inmunofenotipo linfocitario periferico. Metodos: Se realizo un estudio experimental in vitro con muestras de sangre periferica obtenidas de tres voluntarios sanos, en el Centro Nacional de Genetica Medica, en marzo de 2019. El tubo se compuso de seis marcadores de linaje para identificar linfocitos B, T, natural killer y natural killer T. Se desarrollo un protocolo de lisis de hematies sin lavado. Se emplearon anticuerpos monoclonales conjugados con fluorocromos. El punto optimo de concentracion correspondio al mayor indice de tincion y conservacion de los porcentajes de positividad de cada poblacion. Se realizo la construccion progresiva del tubo y se propuso una estrategia logica de secuencia de ventanas para el analisis de datos. Resultados: Los marcadores seleccionados permitieron realizar correctamente el inmunofenotipo linfocitario periferico. En los cinco puntos de titulacion se observaron buenas discriminaciones entre las senales positivas y negativas, excepto para el anti CD56 que presento una tendencia decreciente del indice de tincion. El volumen total de conjugados requeridos para la determinacion de los 6 antigenos fue de 3,75 mL por tubo. Conclusiones: Se obtuvo un tubo policromatico que permite el inmunofenotipo periferico de forma rapida y precisa por seis antigenos linfocitarios simultaneamente, con el empleo de pequenos volumenes de conjugado y sangre.
Yaima Zuniga Rosales Carlos Agustin Villegas Valverde Barbara Torres Rives Evelyn Hernandez Reyes