Metabolic Characterization of Polarized M1 and M2 Bone Marrow-derived Macrophages Using Real-time Extracellular Flux Analysis | Protocol (Translated to French)\nAlors que les macrophages jouent un rôle central dans pratiquement toutes les maladies, les mécanismes moléculaires qui régulent leur phénotype ne sont pas encore entièrement démêlé. Les macrophages présentent une forte hétérogénéité et en réponse à la micro-environnement 1 adoptent différents phénotypes. LPS (+ IFN-y) induite par les macrophages activés classique M1 ou M (LPS) favorisent l'inflammation et protègent l'hôte contre différents types de menaces microbiennes 2. D'autres utilisent IFNy seul ou en combinaison avec le TNF comme stimuli pour provoquer une polarisation M1. IL-4 et / ou IL-13 induit l'activation des macrophages et ces alternatif M2 ou M (IL-4) sont des cellules suppresseurs et les contrôleurs de réponses immunitaires en cours 3 puissants. Macrophages polarisées affichent un règlement distinct du métabolisme cellulaire avec les macrophages M1 LPS-activés subir un commutateur métabolique à l'amélioration de la glycolyse 4-6. Oxydation Inversement, amélioré l'acide gras (FAO) et oxidativ mitochondriale phosphorylation (OXPHOS) fournit de l'énergie durable dans les macrophages M2 IL-4-induites 7-9. Ainsi, une modification du métabolisme est non seulement une caractéristique de sous-ensembles macrophages polarisés, il est également une condition préalable pour la polarisation appropriée et la réglementation inflammatoire. Surtout, l'inhibition de la glycolyse ou OXPHOS / FAO a été démontré à porter atteinte à l'activation M1 ou M2, respectivement 8,10. En tant que tel, l'identification des changements métaboliques dans les macrophages pourraient être appliquées comme un outil pour évaluer leur état de polarisation et le potentiel inflammatoire.\nUn essai qui mesure conforme métabolisme des macrophages pourrait donc être utilisée pour prédire si un médicament, gène abattre ou d'un autre traitement affecte la polarisation et de la fonction des macrophages. Dans cette vidéo, un analyseur de flux extracellulaire est utilisé pour caractériser les profils de bioénergétiques, les macrophages M1 et M2 naïfs.\nCe manuscrit détaille un protocole optimisé qui permet la mesurede tous les paramètres pertinents de la glycolyse (de la glycolyse, la glycolyse maximale et de réserve de la glycolyse) et les caractéristiques de la fonction mitochondriale (de la respiration totale, la respiration mitochondriale basale, la production d'ATP, fuite de protons, respiration maximale et la capacité respiratoire de secours) en un seul essai. L'utilisation de ce dispositif expérimental, bioénergétique peuvent être comparées entre le contrôle et «altéré» (par exemple gène abattre, la surexpression transgénique ou traitement pharmacologique) cellules.\n1. Les macrophages en culture et de polarisation dérivées de moelle osseuse\nJour 0: fémur et le tibia Isoler os de 6-10 semaine souris âgées d'intérêt (C57BL / 6 dans cet essai).\nRetirer le tissu musculaire à partir des os et placez-les dans un os 9 cm boîte de Pétri remplie de PBS glacé.\nTransférer les os dans un plat de 9 cm de Pétri remplie avec 70% d'éthanol et secouez doucement la plaque pendant 30 sec.\nTransférer les os à une nouvelle boîte de Pétri de 9 cm rempli de glace-froid PBS stérile.\nCouper le fémur et le tibia aux deux extrémités avec des ciseaux stériles.\nRincer les os avec 10 ml glacé PBS stérile en utilisant une seringue de 10 ml et d'une aiguille G 25. Recueillir la moelle osseuse dans un tube de 50 ml.\nTransférer les cellules de la moelle osseuse à un nouveau tube de 50 ml en utilisant une aiguille 23 G.\nRépétez cette étape avec une aiguille 25 G. Remarque: Ces étapes sont nécessaires pour éliminer les amas de cellules et résidus osseux.\nCentrifugeuse à 300 g pendant 5 min à 4 ° C.\nJeter le supernatant et remettre en suspension les cellules dans un milieu de 40 ml de cellules de culture (RPMI-1640 plus 2 mM de L-glutamine, 10% de FCS, de la pénicilline (100 U / ml), streptomycine (100 ug / ml) et 15% filtré L-929 cellules ( ATCC, CCL-1) moyen Climatisé contenant M-CSF (ou encore 10 ml de M-CSF ng / recombinant à la place de la L-929 milieu conditionné de cellules).\nRemarque: La génération de L-929 milieu conditionné de cellules a été détaillé précédemment dans ce journal en 2013. 11\nCulture des cellules provenant d'une souris à deux 15 cm des boîtes de Pétri (ne pas utiliser des plaques de culture traitée cellulaires depuis macrophages ne se détache pas de cette plastique) dans 20 ml de milieu de culture par plaque dans un 37 ° C, 5% de CO 2 incubateur.\nAjouter 10 ml de milieu de culture cellulaire frais au jour 3, sans avoir à retirer les 20 ml de milieu de culture cellulaire âgée.\nRemplacer l'ancien milieu de chaque plaque avec 20 ml fraîche milieu de culture le jour 6. Faire cela, les cellules non-adhérentes seront également supprimés.\nDétacher les cellules en les incubant 5 mdans à 37 ° C dans 10 ml de solution saline de citrate (135 mM de chlorure de potassium ainsi que le citrate de sodium 15 mM dans H 2 O, à l'autoclave) et on lave avec 10 ml de PBS. Comptez macrophages osseuses matures dérivées de la moelle (BMDM) le jour 8 en utilisant un compteur de cellules.\nVérifiez la formation de maturité (CD11b + F4 / 80 +) BMDM par inspection visuelle ou par cytométrie de flux. Bloc 10 5 cellules avec 1/100 anti-CD16 / CD32 dans du PBS pendant 20 min dans 100 pi de PBS, incuber avec anti-CD11b 1/200-FITC 1/200, plus anti-F4 / 80-APC-Cy7 à la température ambiante, lavage et analyser par cytométrie de flux.\nRemarque: les macrophages dérivés de la moelle osseuse de souris La culture a été publiée en détail plus tôt dans ce journal par Ying et al 11..\nSeed 50.000 cellules (nombre de cellules optimales doivent être optimisés) par puits dans une microplaque de culture cellulaire dans un milieu de culture de 100 ul. Ne pas ensemencer les cellules dans des puits de correction de fond (A1, A12, H1, H12) et de mettre le milieu seulement (pas de cellules) dans ces puits. Astuce: Maintenez la pipette à un angle uncombat à mi-chemin du côté des puits pour la couche cellulaire la plus homogène.\nPermettre aux cellules de se déposer à la température ambiante dans une hotte de culture cellulaire pendant 1 heure. Cela permettra de promouvoir encore la distribution de cellules et de réduire les effets de bord. Surveiller le respect à l'aide d'un microscope et de la culture dans un 37 ° C, 5% de CO 2 incubateur.\nTrois heures après l'étalement, stimuler les cellules pendant 24 heures avec 10 ng / ml de LPS, ou 20 ng / ml de souris recombinant IL-4 pour générer macrophages M1 ou M2, respectivement. Inclure non traités macrophages naïfs (M0) comme témoin. Évaluer approprié M1 et M2 des macrophages polarisation en mesurant induite par le LPS sécrétion d'IL-6, IL-12, TNF (ELISA) et d'IL-4 induit arginase-1 l'activité et / ou MMR (CD206) et MGL (CD301) l'expression de surface (cytométrie de flux) comme décrit précédemment 3,11.\nRemarque: À ce stade, les cellules peuvent être (pré) a traité des composés pharmacologiques avec des intérêts ou des macrophages peut être stimulée avec d'autres facteurs. Depuis, la variation entre les puits distincts pourrait être sous-marinstantial, il est conseillé d'utiliser au moins 4 et, idéalement, 6 puits par condition.\n2. Préparation de la Composition extracellulaire Flux\nHydrater la cartouche du capteur un jour avant l'exécution de l'essai:\nPlacer la cartouche du capteur à l'envers côté de la plaque de secteur.\nRemplir chaque puits de la plaque d'utilité avec 200 ul de solution d'étalonnage et d'abaisser la cartouche de capteur sur la plaque d'utilité submergeant les capteurs dans la solution d'étalonnage.\nVérifiez le niveau de la solution de calibration est assez élevée pour maintenir les capteurs immergés et les placer dans un non-CO 2 37 ° C incubateur O / N.\nPréparer milieu d'essai le jour de l'essai comme suit:\nChaud moyen de 50 ml de base XF à 37 ° C.\nAjouter 500 pl 200 mM de L-glutamine pour obtenir une concentration finale 2 mM.\nAjuster le pH à 7,4 en utilisant du NaOH 1 N et stériliser avec un filtre de 0,2 uM et maintenir le milieu d'essai à 37 ° C.\nRetirez délicatement le milieu de culture cellulaire à partir des macrophages polarisés et le stocker à -20 ° C pour une utilisation ultérieure (par exemple ELISA pour examiner la polarisation des macrophages bon). Laver les cellules avec un milieu de dosage de 100 pi, ajouter 180 milieu d'essai par puits et de vérifier sous le microscope que les cellules ne sont pas emportés. Placer la plaque de culture de cellules dans un incubateur à 37 ° C sans CO 2 pendant 1 heure avant la série de tests.\nPréparez 10 x composé d'injection mélanges A jusqu'à D comme décrit dans le tableau 1, chaud à 37 ° C, ajuster le pH à 7,4 et stériliser par filtration.\nAjouter tous les composés dans ces mélanges à 10 fois la concentration finale dans les puits de culture cellulaire et d'optimiser ces concentrations pour chaque type de cellule.\nChargez la cartouche du capteur en utilisant les guides de chargement prévues avec des volumes indiqués (tableau 1) de la préparés 10x mélanges de composés d'injection dans les ports A, B, C et D, respectively.\nMélange / Injection Composés Volume ajouté pour obtenir 10x mélange (ul) Volume milieu de dosage (ml) Volume injecté pendant l'exécution (ul) La concentration finale dans l'essai\nUN 2,5 M (45%) glucose 300 2.7 20 25 mM\nB 5 mM oligomycine A (OM) 9 3.0 22 1,5 pM\nC MM FCCP 5 9 2.7 25 1,5 pM\nSolution 100 mM de pyruvate de sodium 300 1 mM\nré 5 mM antimycine A (AA) 15 3.0 28 2,5 pM\nMM roténone 5 (Rot) 7.5 1,25 uM\nTableau 1. mélanges d'injection.\n3. Caractérisation de la bioénergétique polarisée M1 et M2 BMDM l'aide d'un analyseur de Flux extracellulaire\nCréer un modèle de test avec l'assistant de dosage avec 2 minutes et 3 fois MIX minutes de mesurer et (au moins) 3 mix et de taux mesures boucles avant chacun des 4 injections (tableau 1) et après la dernière injection.\nNote: Ces concentrations sont valables pour les macrophages dérivés de la moelle osseuse et de cellules RAW264.7 macrophages lignes, mais doivent être optimisées pour chaque type de cellule. Ajout de pyruvate dans le mélange FCCP est nécessaire pour alimenter la respiration maximale.\nDémarrez la course en appuyant sur le bas de début et de suivre les instructions de l'appareil. Première charge la voitureplaque cartouche avec les sondes hydratés pour permettre la calibration par l'appareil et la charge prochaine de la plaque de cellule.\nAprès l'essai, jeter soigneusement tout milieu de test et mémoriser la culture cellulaire analysé microplaque à -20 ° C pendant avenir normalisation de cellules en utilisant le kit de dosage de la prolifération des cellules comme décrit en détail par le fournisseur.\nEn bref, préparer un tampon de lyse cellulaire par dilution 1x composant B 20 fois dans de l'eau distillée et diluer le composé A 400 fois dans le tampon de lyse cellulaire 1x. Ajouter 200 pi par puits, incuber 5 min à température ambiante et mesurer la fluorescence avec ~ 180 nm excitation et ~ 520 nm des maxima d'émission.\nRemarque: Lorsque vous travaillez avec des cellules non adhérentes ou si une mauvaise observance est un sujet de préoccupation, le kit de prolifération cellulaire directe peut être utilisé comme une alternative puisque ce protocole ne nécessite pas de se défaire de toute milieu de dosage. Pourtant, ce protocole directe est légèrement moins sensible par rapport au protocole utilisé dans ce laboratoire.\nAprès la mesure de la fluorescence, de normaliserle nombre de cellules dans chaque puits comme un rapport dans lequel la numération cellulaire moyenne de tous les puits de macrophages naïfs est fixé à 1.\nRemarque: la quantification des protéines (par exemple en utilisant un dosage BCA) pourrait être utilisé comme une alternative à normaliser comptages de cellules. Cependant, dans nos mains ce dosage était moins sensible par rapport à la trousse de dosage de la prolifération cellulaire.\nAprès avoir terminé l'essai et la cellule de flux quantification extracellulaire, les données peuvent être normalisées par le nombre de cellules et analysés. Cela donne habituellement ECAR OCR parcelles et comme représenté sur la figure 1A et la figure 1B.\nAprès l'injection de glucose (A), l'augmentation de la ECAR représente le taux de glycolyse. L'augmentation supplémentaire ECAR après inhibition de l'ATP synthase avec oligomycine (B) fournit des informations sur la réserve et de la capacité (figure 1A) de la glycolyse. Lorsque l'on analyse les valeurs ROC, oligomycine injection (B) permet le calcul de la consommation d'oxygène utilisé pour la synthèse d'ATP mitochondrial. FCCP (C) découple respiration mitochondriale et les mesures correspondantes OCR fournissent des données sur le maximale et la capacité respiratoire de secours. Enfin, l'injection de la roténone (Rot) et antimycine A (AA) bloquent mitochondrial complexes I et III et l'OCR résiduelle représente les inconvénients non-mitochondriales oxygèneumption (figure 1B).\nFigure 1: paramètres métaboliques issus d'un test de flux XF extracellulaire. (A) À la suite des paramètres de la glycolyse cellulaire sont calculés à partir des valeurs ECAR (en mph / min): la glycolyse, la capacité maximale de la glycolyse et réserve de la glycolyse. Mesures (B) OCR (en pmoles / min) sont utilisés pour calculer les prochaines paramètres fondamentaux de la fonction mitochondriale: respiration basale, la production d'ATP, fuite de protons, respiration maximale et la capacité respiratoire de secours. Gluc = glucose; OM = oligomycine A; FCCP = carbonyle cyanure 4- (trifluorométhoxy) phénylhydrazone; AA = antimycine A; Rot = roténone S'il vous plaît cliquez ici pour voir une version plus grande de cette figure.\nAprès la course, l'ECAR et OCR mesures 1 till 15 pour chaque puits peut être exporté vers Excel et les paramètres de la glycolyse suivantes peut être calculée à partir des mesures de ECAR comme suit:\nAcidification non-glycolytique = avg. ECAR (1,2,3)\nGlycolyse = avg. ECAR (4,5,6) - avg. ECAR (1,2,3)\nLa capacité maximale de la glycolyse = avg. ECAR (7,8,9) - avg. ECAR (1,2,3)\nRéserve glycolytique = avg. ECAR (7,8,9) - avg. ECAR (4,5,6)\nDe les taux de ROC, les prochaines caractéristiques métaboliques peuvent être déterminées:\nLa respiration mitochondriale non = avg. OCR (13,14,15)\nRespiration basale = avg. OCR (4,5,6) - avg. OCR (13,14,15)\nLa production d'ATP = avg. OCR (4,5,6) - avg. OCR (7,8,9)\nFuite de protons =avg. OCR (7,8,9) - avg. OCR (13,14,15)\nRespiration maximale = avg. OCR (10,11,12) - avg. OCR (13,14,15)\nLa capacité respiratoire de secours (SRC) = avg. OCR (10,11,12) - avg. OCR (4,5,6)\nFigure 2:. Caractéristiques métaboliques de naïve (M0), LPS (M1) et IL-4- (M2) des macrophages polarisés Pour chaque mesure, la moyenne et l'écart type de la moyenne (SEM) de 8 puits individuels est présenté. (A) les taux d'acidification extracellulaire (ECAR, en MPH / min) et (b) les taux de consommation d'oxygène (OCR, en pmoles / min) sont mesurées pour différentielle polarisée (M1 et M2) et les macrophages naïfs (M0). Toutes les mesures ont été normalisées pour le nombre de cellules (telle que mesurée avec CyQUANT) et la numération cellulaire moyenne des macrophages naïfs a été fixée à 1. Dansinjection A = glucose; B = oligomycine; C = FCCP; D = A + antimycine roténone. S'il vous plaît cliquez ici pour voir une version plus grande de cette figure.\nComme le montre la Figure 2A, l'activation des macrophages par le LPS induit une augmentation du métabolisme glycolytique. Les différences entre les macrophages LPS et IL-4-traitées sont encore plus évident quand on regarde les taux de consommation d'oxygène (OCR) dans la figure 2B. En effet, alors que le métabolisme oxydatif maximale est fortement réprimée dans M (LPS), la IL-4 induit la respiration basale et maximale en particulier dans les macrophages M2. Il faut noter que l'augmentation de la glycolyse est assez unique à M (LPS) et de macrophages est pas nécessairement une caractéristique des macrophages M1 puisque M (IFN-y) macrophages ne présentent pas d'améliorer la glycolyse.\nDans l'ensemble, cette analyse démontre flux extracellulaire that IL-4 induit les macrophages M2 sont caractérisés par un métabolisme oxydatif améliorée et surtout une capacité respiratoire de secours haute (SRC), tandis que l'affichage LPS-macrophages activés amélioré le métabolisme glycolytique et ne possèdent aucune capacité respiratoire de secours.\nLe but de notre laboratoire est de comprendre comment la polarisation et la fonction des macrophages peuvent être influencés dans le but ultime d'améliorer le résultat de l'athérosclérose et d'autres états inflammatoires 12. Pour évaluer macrophages polarisation, on mesure habituellement le LPS (+ IFNy) induites et d'IL-4 induit l'expression du gène de M1 et des gènes marqueurs M2 (qPCR), détermine l'IL-6, IL-12, TNF et NO sécrétion (par ELISA et réaction de Griess) examine et IL-4 induite par CD71, CD206, CD273 et CD301 expression de surface (par cytométrie de flux) et activité arginase 3,13. En outre, des dosages d'apoptose (par l'annexine-V / PI coloration), des tests de phagocytose (avec des billes fluorescentes de latex et / ou pHrodo E. coli) et des dosages de formation de cellules spumeuses (par Dil-oxLDL absorption, LipidTOX neutre coloration des lipides) peuvent être effectuées à évaluer la fonctionnalité des macrophages 14. En outre, l'analyse de flux extracellulaire peut être effectuée pour mesurer la bioénergétique profils de mac polariséerophages comme une nouvelle solution de rechange et de lecture fonctionnelle.\nCe manuscrit montre que la polarisation des macrophages induit reprogrammation métabolique avec des macrophages induite par LPS de commutation à l'augmentation de la glycolyse comme leur source d'énergie. Inversement, les macrophages M2 IL-4 induit la phosphorylation oxydative mitochondriale utilisent comme source principale de l'ATP. Surtout, métabolique reprogrammation non seulement fournit de l'énergie pour les besoins particuliers de M1 et M2 macrophages polarisées. En effet, des changements métaboliques effet sur les concentrations de metabolites qui sont des régulateurs directs du phénotype de macrophage 10,15,16. Par conséquent, le métabolisme des macrophages est non seulement une caractéristique (comme montré ici dans la figure 2), mais aussi un pilote d'états de polarisation macrophages distinctes et ces nouvelles connaissances soutenu la croissance rapide de la zone de recherche de immunometabolism cours des deux dernières années.\nCependant, les mesures robustes de profils métaboliques dans macrophages resté difficile et avaient leurs limites. Dans cette étude, un analyseur de flux extracellulaire est appliquée pour mesurer robuste glycolyse, Réserve de la glycolyse, la capacité glycolytique maximale, l'acidification non-glycolytique, basale et la respiration maximale, la production d'ATP, la capacité respiratoire de secours, fuite de protons et de la respiration non mitochondrial en temps réel dans une quantité minimale de macrophages.\nPar conséquent, nous avons modifié et amélioré les protocoles du fabricant comme suit. Le test de stress Mito standard (# 103015 à 100) suggère en utilisant le milieu avec du glucose et du pyruvate et un protocole avec 3 injections (OM, FCCP, AA / rot). Nous optons pour démarrer le test avec / milieu sans pyruvate-glucose, ajouter le glucose comme une première injection dans l'orifice A (comme dans la glycolyse Stress Test # 103020 à 100) et ajouter pyruvate avec le découplant FCCP au port C. De cette façon, , tous les paramètres de la glycolyse en question proviennent de mesures ECAR 1-9 et tous les renseignements pertinents au sujet mitochondrial fonction à partir de mesures OCR 4-15.\nNotez qu'il est essentiel d'injecter pyruvate avec FCCP pour alimenter la respiration maximale sur le découplage. Avant d'utiliser ce protocole combiné, il faut également vérifier que le 2-désoxy-D-glucose (2-DG) abaisse le taux de ECAR après l'essai aux valeurs de base (1-3) et que les taux d'ECAR enregistrées 4-6 sont en effet en raison de la glycolyse. En outre, il faut comprendre que les concentrations de composé et le nombre de cellules utilisées dans ce manuscrit sont valables pour les macrophages dérivés de la moelle osseuse et de cellules RAW264.7 macrophages lignes et doivent être optimisées pour d'autres types de cellules. En outre, il faut noter que le M-CSF, qui est utilisé pour générer des macrophages dérivés de la moelle osseuse favorise un phénotype anti-inflammatoire semblable à M2. Les résultats présentés à partir de macrophages dérivés de la moelle osseuse peuvent donc pas entièrement comparable à des mesures avec les macrophages résidents de tissu primaire ou des lignées de cellules macrophages qui ne nécessitent pas de M-CSF pendant Culturi cellulaireng.\nPar rapport aux méthodes existantes, ce protocole exige des quantités minimes de macrophages et fournit rapidement la quasi-totalité des caractéristiques fondamentales métaboliques cellulaires. Il en résulte dans les cellules excédentaires suffisantes pour effectuer d'autres tests immunologiques et même les cellules utilisées pour la bioénergétique profilage pourrait encore être utilisés pour d'autres résolu après le dosage. En outre, le format de la plaque notamment 96 puits permet d'évaluer plusieurs conditions en temps réel dans le même temps. Cependant, la variation entre les puits individuels peut être considérable et donc l'utilisation d'au moins 4 puits par condition est souvent souhaitable. Prise en compte cette limitation, l'analyse des flux extracellulaire décrit permet toujours d'exécuter plus de 10 conditions expérimentales (n = 6) à la fois, ce qui est beaucoup plus que les techniques traditionnelles.\nDans l'ensemble, cet article propose une analyse fonctionnelle facile et reproductible qui permet de mesurer toute la glycolyse pertinente et param mitochondrialparamè- en sous-ensembles de macrophages polarisée. Cette technique peut servir une demande future pour évaluer la fonction des macrophages et d'évaluer l'effet des manipulations distinctes (par exemple gène abattre, de nouveaux produits pharmaceutiques, etc.) sur (métabolique) le phénotype de macrophage. En tant que tel, les données de flux extracellulaires peuvent être utilisés en conjonction avec d'autres analyses pour permettre la caractérisation approfondie de l'état d'activation des macrophages.\nAccès gratuit à cet article est sponsorisé par Seahorse Bioscience.


EPO - T 1301/04 () of 11.12.2008\nT 1301/04 () of 11.12.2008\nTexte de la décision en FR (PDF, 52.760K)\nComposition aqueuse de décoloration de fibres kératiniques prête à l'emploi comprenant l'association d'un solvant hydrosoluble et d'un polymère amphiphile non ionique ou anionique comportant au moins une chaîne grasse\nRequête principale : nouveauté (non) - divulgation implicite\nRequêtes subsidiaires 1 et 2: activité inventive (non) - espérance de réussite - pas de préjugé technique\nI. Trois oppositions ont été formées en vue d'obtenir l'entière révocation du brevet européen nº 1 031 343 basé sur la demande de brevet Nº 00400149.1 motifs pris d'insuffisance de description de l'invention, d'absence de nouveauté et d´activité inventive (Article 100(a) et (b) CBE) au vu, entre autres, des documents\n(1) US-A-4 507 278,\n(3) WO-A-97/24108 et\n(8) Brochure commerciale de la société "Rohm and Haas Company" concernant le produit "Aculyn 44 Cosmetic Grade" (1996).\nII. Les opposantes 1 et 3 (respectivement requérantes 1 et 2) ont introduit un recours contre la décision intermédiaire signifiée par voie postale le 3 septembre 2004, par laquelle la division d'opposition a décidé que le brevet amendé sur la base d´un jeu de 24 revendications soumis comme requête subsidiaire 1 lors de la procédure orale du 28 juillet 2004 satisfaisait aux conditions de la CBE. La revendication 1 selon cette requête (présente requête principale) s'énonce comme suit :\n"1. Composition aqueuse prête à l'emploi pour la décoloration de fibres kératiniques, en particulier de fibres kératiniques humaines, comprenant dans un milieu approprié pour la décoloration, au moins un agent alcalin, au moins un sel peroxygéné, du peroxyde d'hydrogène et au moins un solvant hydrosoluble, caractérisée par le fait qu'elle contient en outre au moins un polymère amphiphile non ionique comportant au moins une chaîne grasse, choisi parmi\n- les celluloses ou hydroxyalkylcelluloses modifiées par des groupements comportant au moins une chaîne grasse de type alkyle, arylalkyle ou alkylaryle contenant un groupe alkyle en C8-22, ou par des groupes alkylphénol polyalcoxylés ;\n- les hydroxypropylguars modifiés par des groupements comportant au moins une chaîne grasse en C8-22 ;\n- les polyuréthannes comportant au moins une chaîne grasse de type alkyle ou alcényle en C8-30 ;\n- les copolymères de vinylpyrrolidone et de monomères hydrophobes à chaîne grasse,\n- les copolymères de (méth)acrylates d'alkyle en C1-6 et de monomères amphiphiles comportant au moins une chaîne grasse,\n- les copolymères de (méth)acrylates hydrophiles et de monomères hydrophobes comportant au moins une chaîne grasse\net/ou au moins un polymère amphiphile anionique comportant au moins une chaîne grasse."\nSelon la Division d'Opposition, l'invention objet du brevet litigieux était suffisamment décrite pour qu'un homme du métier puisse l'exécuter. Les compositions selon la revendication 1 de la requête principale alors pendante n'étaient pas nouvelles au vu du document (1). L'objet des revendications de la requête subsidiaire 1 alors pendante était clair, nouveau et impliquait une activité inventive en considérant que le document (1) illustrait l'état de la technique le plus proche de l'invention.\nIII. L'intimée (propriétaire du brevet litigieux) a déposé avec la lettre datée du 30 septembre 2005 six jeux de revendications à titre de requêtes subsidiaires 1 à 6, ainsi qu'un rapport d'essais comparatifs. Par lettre datée du 10 novembre 2008 elle a déposé un rectificatif concernant ces essais ainsi qu'un rapport d'essais complémentaires. Lors de la procédure orale tenue devant la Chambre le 11 décembre 2008, l'intimée a remplacé l'ensemble des requêtes subsidiaires par de nouvelles requêtes subsidiaires 1 et 2.\nLa revendication 1 de la requête subsidiaire 1 diffère de la revendication 1 de la requête principale par l'addition de la caractéristique spécifiant que le sel peroxygéné "est choisi parmi les persulfates, percarbonates et perborates d'ammonium et de métaux alcalins".\nLa revendication 1 de la requête subsidiaire 2 diffère de la revendication de la requête subsidiaire 1 par la précision de la nature des polymères amphiphiles à savoir que la composition contient en outre "au moins un polymère amphiphile non ionique comportant au moins une chaine grasse, choisi parmi les polyuréthannes comportant au moins une chaîne grasse de type alkyle ou alcényle en C8-30 ou un polymère amphiphile anionique comportant au moins une chaîne grasse qui est un copolymère réticulé d'acide acrylique et d'acrylate en C10-30."\nIV. Selon les requérantes les compositions objets de la revendication 1 de la requête principale n'étaient pas nouvelles au vu de l'exemple 1 du document (3). La requérante 1 a considéré que le document (1) représentait l'état de la technique le plus proche de l'invention pour l'évaluation de l'activité inventive. Les exemples comparatifs présentés par l'intimée au soutien d'une amélioration du maintien de la viscosité n'étaient pas pertinents puisque ne mettant point en oeuvre de composition comparative comprenant tous les ingrédients requis par le document (1) et ne mesuraient pas le maintien de la viscosité mais plutôt d'autres effets tels que la stabilité et la formation de mousse. Ainsi le problème technique effectivement résolu par l'invention n'était que de proposer des alternatives aux compositions de décoloration divulguées par le document (1). La solution revendiquée ne se distinguait des compositions connues que par la nature du polymère amphiphile non ionique à chaîne grasse qui selon l'une des alternatives requises par la revendication 1 des requêtes subsidiaires était un polyuréthanne. Le document (8) enseignait cependant déjà que ce type de polymère pouvait être incorporé dans des compositions de décoloration des cheveux en offrant des avantages en termes de viscosité et de stabilité des compositions. La solution revendiquée était donc évidente au vu de l'enseignement du document (1) combiné à celui du document (8). La requérante 2, tout en partageant cette ligne d'argumentation, a soutenu que le document (3) représentait l'état de la technique le plus proche puisque bien que n'adressant pas explicitement le même but que l'invention objet du brevet litigieux, à savoir le maintien de la viscosité, il avait déjà résolu ce problème en proposant des compositions comprenant le même polymère amphiphile non-ionique que celui requis par les revendications litigieuses. L'objet des revendications des requêtes subsidiaires 1 et 2 n'impliquait donc pas d'activité inventive.\nV. Selon l'intimée, la composition selon l'exemple 1 du document (3) ne contenait pas simultanément un sel peroxygéné et du peroxyde d'hydrogène, le peroxyde d'hydrogène étant consommé par sa réaction avec le précurseur du sel peroxygéné. Ces deux composés devaient cependant être présents dans les compositions revendiquées. En outre, la revendication 1 litigieuse concernait une composition prête à l'emploi contrairement à la composition du document (3) qui n'était pas directement appliquée sur les cheveux. Les compositions objets des revendications de la requête principale étaient donc nouvelles. Le document (1) représentait l'état de la technique le plus proche de l'invention. Le problème technique que se proposait de résoudre l'invention était d'améliorer le maintien de la viscosité des compositions pendant la durée nécessaire à la décoloration des cheveux. Les essais comparatifs déposés par l'intimée démontraient de façon convaincante que la présence des polymères amphiphiles définis dans les revendications améliorait la stabilité des compositions et permettait ainsi de résoudre le problème à la base du brevet litigieux. Le document (8) envisageait bien l'utilisation d'un polymère amphiphile non-ionique également prévu par la revendication 1 des requêtes subsidiaires 1 et 2 mais dans des compositions contenant uniquement le peroxyde d'hydrogène, sans le sel peroxygéné obligatoirement présent dans les compositions revendiquées. Or, la présence simultanée de ces deux composés entrainait une réaction forte altérant la viscosité. Il n'était pas prévisible pour l'homme du métier que la stabilité et donc la viscosité de la composition puisse être maintenues dans ces conditions durant le temps nécessaire à la décoloration par l'utilisation du polymère décrit dans le document (8). En outre, l'homme du métier ne pouvait être sûr que le polymère décrit dans le document (8) résoudrait avec succès le problème à la base du brevet litigieux. Les compositions revendiquées impliquaient donc une activité inventive.\nVI. La partie de droit à la procédure (opposante 2) n'a par écrit, ni soumis d'argument, ni formulé de requête.\nVII. Les requérantes ont demandé l'annulation de la décision contestée et la révocation du brevet.\nVIII. L'intimée a demandé au principal que le recours soit rejeté, ou subsidiairement le maintien du brevet sur le fondement de l'une de ses requêtes auxiliaires 1 ou 2 déposées lors de la procédure orale devant la Chambre.\nIX. La Chambre a rendu sa décision à la fin de la procédure orale qui s'est tenue en l'absence de la partie de droit qui avait indiqué dans sa lettre du 10 décembre 2008 qu'elle n'y participerait pas.\nLa revendication 1 selon la requête principale résulte de la combinaison des revendications 1 et 2 de la demande telle que déposée et restreint la protection conférée par le brevet tel que délivré (Article 123(2) et (3) CBE). Ceci n'a pas été contesté.\n3.1 Les requérantes ont argué d'un défaut de nouveauté en se fondant sur l'exemple I du document (3). La composition exemplifiée contient du peroxyde d'hydrogène (peroxygen bleach), un agent épaississant (thickener), à savoir Aculyn 44 dont il n'est pas contesté qu'il est composé d'un polymère amphiphile non-ionique à chaine grasse de la famille des polyuréthannes comportant au moins une chaîne grasse de type alkyle ou alcényle en C8-30 (voir document (8)), ce composé se trouvant associé au propylène glycol qui est un solvant hydrosoluble (tableau page 46, composition I en combinaison avec la description des composés à la page 45). Cette composition I est décrite à divers pH alcalins, à savoir à pH 8, 9 et 10 (tableau II, page 48) et doit donc à cet effet, comme l'a reconnu l'intimée, obligatoirement contenir un agent alcalin augmentant la valeur du pH . La composition contient également un précurseur d'acide peroxygéné, à savoir, le nonanoylbenzène sulfonate de sodium (peroxyacid precursor 1). Or, ce composé est transformé in situ par le peroxyde d'hydrogène présent au sein de la composition en un acide peroxygéné (schémas réactionnels à la page 6, composé II et la page 7, première équation ; page 5, dernier paragraphe), cet acide se trouvant en milieu alcalin nécessairement sous forme de sel peroxygéné. Par conséquent, l'exemple 1 du document (3) divulgue de façon non équivoque une composition comprenant tous les composants requis par la revendication 1 litigieuse, dont l'objet n'est donc pas nouveau.\n3.2 L'intimée tout en ne contestant pas le mécanisme de formation in situ du sel peroxygéné a cependant fait valoir que la composition selon l'exemple I du document (3) ne pouvait pas contenir simultanément un sel peroxygéné et du peroxyde d'hydrogène comme requis par la revendication 1 en litige puisque le peroxyde d'hydrogène était consommé lors de sa réaction avec le précurseur d'acide peroxygéné. Cependant, le peroxyde d'hydrogène (4,5 % en poids de substance active) est présent dans la composition en excès stoechiométrique important par rapport au précurseur d'acide peroxygéné (5% en poids de substance active) au vu de la différence importante de poids moléculaire du peroxyde d'hydrogène et de l'acide peroxygéné (tableau page 46 en combinaison avec la page 45, deuxième paragraphe). Ainsi, même si la totalité du précurseur d'acide peroxygéné est transformé en sel d'acide peroxygéné par l'action du peroxyde d'hydrogène, il restera néanmoins à coté du sel ainsi formé également du peroxyde d'hydrogène dans la composition. Cet argument de l'intimée doit donc être rejeté.\nEn outre, selon l'intimée la revendication 1 litigieuse concernait une composition prête à l'emploi contrairement à la composition selon l'exemple 1 du document (3) qui n'était pas directement appliquée sur les cheveux et de ce fait n'était pas "prête à l'emploi". Cependant, la revendication 1 en litige concerne une composition en tant que telle, cette dernière étant définie par ses seules caractéristiques techniques, à savoir par les constituants qu'elle comprend. Le document (3) divulgue dans son exemple I, une composition présentant toutes les caractéristiques techniques de la revendication en litige et, par tant, anticipe l'objet revendiqué. Ainsi, la qualification d' être "prête à l'emploi" donnée dans la revendication 1 litigieuse à la composition décrite par le document (3), ne joue pas de rôle dans l'évaluation de la nouveauté de la composition per se. Cette ligne d'argumentation de l'intimée doit donc également être rejetée.\n3.3 Les compositions selon la revendication 1 de la requête principale ne sont donc pas nouvelles (Article 54 CBE). Cette requête doit donc être rejetée.\nLa revendication 1 de la requête subsidiaire 1 a été amendée par l'addition de la caractéristique spécifiant que le sel peroxygéné "est choisi parmi les persulfates, percarbonates et perborates d'ammonium et de métaux alcalins". Cette modification se fonde sur la revendication 15 de la demande telle que déposée et restreint la protection conférée par le brevet tel que délivré (Article 123(2) et (3) CBE). Ceci n'a pas été contesté.\nLa Chambre est arrivée à la conclusion que par les restrictions entreprises dans la revendication 1 selon requête subsidiaire 1, les compositions revendiquées se distinguent de celles divulguées par les documents de l'art antérieur opposé par les parties et sont donc nouvelles (Article 54 CBE). Les requérantes n'ont formulé aucune objection à cet égard. Dans ces circonstances, il n'est pas nécessaire d'entrer plus en avant dans les détails de l'évaluation de la nouveauté.\n6.1 Le brevet litigieux concerne des compositions pour la décoloration de fibres kératiniques, en particulier des cheveux, et s'attache au problème du maintien de la viscosité des compositions pendant la durée nécessaire à l'obtention de la décoloration souhaitée (paragraphes  et ). Le document (1) concerne également des compositions de décoloration des cheveux et concerne comme le brevet litigieux le problème de la viscosité de la composition (colonne 1, lignes 9 et 10, colonne 2, lignes 49 à 51). La Chambre considère en accord en cela avec la Division d'Opposition, la requérante 1 et l'intimée que ce document représente l'état de la technique le plus proche de l'invention.\nLe document (1) divulgue des compositions de décoloration comprenant du peroxyde d'hydrogène (revendication 1, composé (a) ; colonne 4, ligne 58), un sel peroxygéné choisi parmi les persulfates, percarbonates et perborates d'ammonium et de métaux alcalins (revendication 1, composé (e) ; colonne 4, lignes 51 à 54), un agent alcalinisant (revendication 1, composé (d) ; colonne 3,lignes 24 à 26), un solvant hydrosoluble tel que l'éthanol, le butanol, l'éthylène glycol ou le butylène glycol (colonne 6, lignes 40, 41, 43 et 44) et un agent épaississant hydrosoluble qui peut être, inter alia, un polymère amphiphile non-ionique comportant une chaîne grasse, tel qu'un alcool à chaîne grasse polyoxyalkylé (revendication 1, composé (b)iii ; colonne 5, lignes 20 et 21).\nLa requérante 2 a considéré que le document (3) constituait l'état de la technique le plus proche de l'invention puisqu'il concernait également des compositions de décoloration structurellement proches de celles revendiquées et, bien que ne mentionnant pas explicitement le problème de la viscosité, s'y confrontait néanmoins implicitement puisque le document (3) divulguait des compositions comprenant à cet effet un polymère amphiphile non-ionique également envisagé par le brevet litigieux. Comme cependant le document (3) ne fait aucune allusion explicite au problème de la viscosité et ne propose que l'addition optionnelle d'agent épaississant (page 34, début du deuxième paragraphe), ce document ne peut être plus proche de l'invention, au niveau du but assigné, que le document (1) qui s'attache principalement au problème de la viscosité et divulgue à cet effet des compositions contenant obligatoirement un agent épaississant. En outre, et ceci n'a pas été contesté, les compositions décrites dans le document (3) ne sont pas structurellement plus proches des compositions revendiquées que celles divulguées par le document (1). Par conséquent, le document (3) ne peut représenter un état de la technique plus proche de l'invention que le document (1).\n6.2 Selon l'intimée le problème technique à résoudre par l'invention était d'améliorer le maintien de la viscosité des compositions pendant la durée nécessaire à la décoloration des cheveux (brevet litigieux, paragraphe ).\n6.3 La solution proposée par le brevet litigieux au problème technique défini ci-dessus est la composition selon la revendication 1, cette composition étant caractérisée par la nature du polymère amphiphile comportant au moins une chaîne grasse qui, entre autres, est choisi parmi les polymères non ioniques du type polyuréthannes comportant au moins une chaîne grasse de type alkyle ou alcényle en C8-30.\n6.4 Afin de démontrer l'amélioration de stabilité alléguée l'intimée a déposé avec la lettre datée du 10 novembre 2008 des essais comparatifs dont l'exemple D2 illustrant l'invention met en jeu le composé de dénomination "Carbopol EDT 2020", à savoir un polymère amphiphile anionique (voir le brevet litigieux, page 3, lignes 58 en combinaison avec la ligne 51). Ces essais ne sont cependant pas pertinents puisqu'ils ne concernent pas les polymères non-ioniques caractérisant, entre autres, la solution revendiquée au problème technique défini ci-dessus. L'intimée s'est également fondée sur les essais comparatifs déposés avec les lettres du 26 juillet 2004 et du 30 septembre 2005. Ces essais impliquent bien des compositions selon l'invention comprenant un polymère non-ionique du type polyuréthanne comportant au moins une chaîne grasse de type alkyle ou alcényle en C8-30, à savoir pour les essais de 2004 le composé de dénomination "Serad FX 1100" et pour les essais de 2005, le composé de dénomination "Aculyn 44". Selon l'intimée ces essais démontrent de façon convaincante que les compositions revendiquées permettent effectivement d'améliorer le maintien de la viscosité des compositions pendant la durée nécessaire à la décoloration des cheveux. Les requérantes ont cependant contesté la pertinence des essais en avançant, entre autre, que les exemples comparatifs n'illustraient pas l'état de la technique le plus proche de l'invention au vu notamment de l'omission de composés qui selon l'état de la technique étaient essentiels et auraient ainsi du être obligatoirement présents au sein des compositions testées.\nDans le cas d'espèce il n'est cependant pas nécessaire de trancher la question litigieuse de savoir si l'amélioration alléguée à effectivement été démontrée par les essais déposés par l'intimée. En effet, les objections des requérantes dans l'analyse de l'évidence de la solution revendiquée l'emportent de toute manière quand même que le problème technique de l'amélioration de la viscosité soit, en faveur de l'intimée et en défaveur des requérantes, considéré comme effectivement résolu par les compositions revendiquées (voir le point 6.5 ci-dessous).\n6.5 Procédant de ce postulat, la seule question en suspens est de savoir si la solution proposée par le brevet litigieux pour résoudre le problème posé découlait de façon évidente de l´état de la technique disponible, en d'autres termes s'il était évident pour l'homme du métier se proposant d'améliorer le maintien de la viscosité des compositions pendant la durée nécessaire à la décoloration des cheveux, d'y incorporer au moins un polymère amphiphile non ionique du type polyuréthanne comportant au moins une chaîne grasse de type alkyle ou alcényle en C8-30.\n6.5.1 Le document (8) décrit le produit de dénomination "Aculyn 44" dont il n'est pas contesté qu'il s'agit d'un polymère amphiphile non ionique, notamment un polyuréthanne comportant une chaîne grasse de type alkyle en C10 et tombant donc sous la définition du polymère caractérisant, entre autres, la composition selon la revendication 1 en litige (tableau page 5, dernière ligne, "polycarbamyl" étant une autre dénomination de "polyuréthanne"). Selon le document (8) ce polymère est particulièrement recommandé pour la formulation de compositions à base de peroxyde destinées à la décoloration des cheveux (page 2, lignes 2 et 3, quatrième point du tableau) en offrant des avantages en termes d'épaississement et de stabilisation des formulations (page 1, lignes 1 à 6 en dessous du titre). En outre, le polymère est décrit comme étant compatible avec des formulations dont le pH peut varier de 1 à 12 et avec les milieux oxydants, tel que le peroxyde d'hydrogène qu'il épaissit et stabilise (tableau page 1, troisième et cinquième paragraphe ; page 4, deuxième paragraphe). L'homme du métier peut donc déduire de ce document qu'un polyuréthanne non ionique amphiphile à chaine grasse de type alkyle en C10 permet d'améliorer les propriétés rhéologiques des compositions de décoloration des cheveux en les stabilisant, cette stabilisation de la formulation assurant le maintien de la viscosité de la composition. Il était ainsi évident pour l'homme du métier partant des compositions décrites dans le document (1) et ayant comme objectif d'améliorer le maintien de la viscosité d'incorporer dans ces compositions un polymère amphiphile non-ionique, à savoir un polyuréthanne comportant au moins une chaîne grasse de type alkyle en C10, et aboutir ainsi aux compositions revendiquées.\nPar conséquent, l´enseignement du document (1) combiné à celui du document (8) conduit l´homme du métier de façon évidente à la solution revendiquée au problème technique défini ci-dessus.\n6.5.2 Selon l'intimée le document (8) ne mentionnait pas d'application du polymère "Aculyn 44" dans les compositions de décoloration comprenant en plus du peroxyde d'hydrogène, des sels peroxydés. Or la présence de ces sels engendrait une réaction forte avec le peroxyde d'hydrogène et donc des difficultés de stabilisation de la composition. L'homme du métier ne pouvait déduire du document (8) que le polymère "Aculyn 44" était susceptible de résoudre le problème du maintien de la viscosité dans des compositions, qui comme celles revendiquées, comprenaient obligatoirement de tels sels.\nCependant, le document (8) concerne de façon générale des compositions à base de peroxydes (tableau page 1, cinquième paragraphe, tableau page 2, quatrième paragraphe) et ne mentionne le peroxyde d'hydrogène qu'à titre d'exemple ("such as hydrogen peroxide", tableau page 1, cinquième paragraphe) sans pour autant restreindre l'utilisation du polymère "Aculyn 44" aux seules compositions à base de peroxyde d'hydrogène. Par conséquent, l'homme du métier n'aurait pas écarté l'enseignement du document (8) au seul motif qu'il ne mentionne pas, expressis verbis, de compositions comprenant des sels peroxygénés. En outre, ni le brevet litigieux dans la discussion de l'art antérieur, ni le document (1) représentant l'état de la technique le plus proche de l'invention, ne font allusion à un problème particulier de stabilisation qui serait lié à la présence de sels peroxygénés, alors même que leur association au peroxyde d'hydrogène était connue. Ainsi, le problème particulier lié à la présence des sels mentionné par l'intimée n'est pas un enseignement de l'art antérieur mais plutôt une connaissance acquise ultérieurement par la propriétaire du brevet et de ce fait ne peut donc pas constituer un enseignement qui aurait pu dissuader l'homme du métier à suivre l'enseignement du document (8) pour résoudre le problème technique à la base de l'invention. Cette ligne d'argumentation de l'intimée doit donc être écartée.\nEnfin, selon l'intimée une activité inventive devrait être reconnue puisque l'homme du métier ne pouvait être sûr que le polymère décrit dans le document (8) résoudrait avec succès le problème technique à la base du brevet litigieux.\nLa Chambre ne peut cependant suivre cette argumentation qui sous-entend que l'homme du métier n'applique l'enseignement de l'art antérieur que s'il est certain que cette démarche le conduira nécessairement à la solution au problème technique alors que, selon la jurisprudence constante des Chambres de recours, il y a évidence dès lors que l'homme du métier peut raisonnablement escompter une réussite, ce qui n'écarte pas un éventuel échec (T 149/93, point 5.2 ; non publiée dans JO OEB). Dans le cas d'espèce, où l'enseignement du document (8) propose de façon claire et directe un polymère décrit avec les avantages que recherche l'homme du métier pour résoudre le problème technique, à savoir la stabilisation de la viscosité dans les compositions de décoloration des cheveux, l'homme du métier peut raisonnablement escompter une réussite en suivant cet enseignement, à savoir en incorporant ce polymère dans les compositions de décoloration. Par conséquent, cet argument de l'intimée doit également être écarté.\n6.6 En conclusion, les compositions selon la revendication 1 n'impliquent pas d'activité inventive (Article 56 CBE). La requête subsidiaire 1 doit donc être rejetée.\nPar rapport à la revendication 1 de la requête subsidiaire 1, la revendication 1 de la requête subsidiaire 2 a été restreinte en précisant la nature des polymères amphiphiles, à savoir qu'ils sont choisis parmi "au moins un polymère amphiphile non ionique comportant au moins une chaîne grasse, choisi parmi les polyuréthannes comportant au moins une chaîne grasse de type alkyle ou alcényle en C8-30 ou un polymère amphiphile anionique comportant au moins une chaîne grasse qui est un copolymère réticulé d'acide acrylique et d'acrylate en C10-30". Cette modification se fonde sur les revendications 2 et 10 de la demande telle que déposée et restreint la protection conférée par le brevet tel que délivré (Article 123(2) et (3) CBE). Ceci n'a pas été contesté.\nLa revendication 1 selon la requête subsidiaire 2 comprend le même mode de réalisation de l'invention que la revendication 1 de la requête subsidiaire 1, à savoir celui selon lequel le polymère amphiphile est "au moins un polymère amphiphile non ionique comportant au moins une chaine grasse, choisi parmi les polyuréthannes comportant au moins une chaîne grasse de type alkyle ou alcényle en C8-30".\nPar conséquent, les conclusions négatives quant à l'activité inventive en relation avec les compositions selon la revendication 1 selon la requête principale s'appliquent, mutatis mutandis, à l'objet de la revendication 1 selon la requête subsidiaire 2 (voir le point 6 ci-dessus).


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26/02/2008 à 16h01\nLévi Bellfield, reconnu coupable du meurtre d'une étudiante française à Londres en 2004, a été condamné à perpétuité. Les parents de la victime sont soulagés.\nLes parents d'Amélie Delagrange se disent réconfortés. Mardi 26 février, l'homme jugé pour le meurtre de leur fille à Londres a été condamné à la prison à vie. L'ancien videur de boîte de nuit, Lévi Bellfield a été reconnu coupable du meurtre de l’étudiante française, dans la banlieue sud-ouest de Londres en août 2004. De retour d'une soirée avec des amis, elle avait été frappée à la tête avec un objet contondant alors qu'elle traversait un parc.\nLe procès, débuté en octobre dernier, aura duré 4 mois. Une période longue et difficile pour Dominique Delagrange, la mère d'Amélie. Bien que convaincue de la culpabilité de l’homme et satisfaite par le verdict, elle regrette au fond d'elle que celui-ci n'ait pas avoué son crime.


Habitants quittant la ville après les bombardements d'avril 1915\nCompte tenu du rôle vital joué par le port de Dunkerque, tant sur le plan militaire que sur celui du ravitaillement, sa destruction est un objectif constant de l’état-major allemand. La première attaque aérienne allemande a lieu le 15 octobre 1914.\nElle inaugure une longue série qui ne s’achève que le 4 novembre 1918. Entre ces deux dates la ville est régulièrement l’objet d’agressions ennemies avec des périodes de tension plus vives notamment à partir d’août 1917 lors de la bataille des Flandres, ou au printemps 1918, avec la dernière offensive allemande.\nLe 28 avril 1915, après une accalmie de trois mois, une immense détonation ébranle toute la ville. Deux autres explosions aussi violentes suivent à dix minutes d’intervalle. Comme la sirène reste muette et que les canons de la DCA ne tirent pas, la population croit qu’il s’agit de mines sous-marines que l’on fait sauter sur la plage ou d’expériences faites par les aviateurs alliés.\nDans l’après-midi, trois nouvelles explosions retentissent, les habitants pensent que Dunkerque vient d’être bombardée par un croiseur allemand passant au large. Cependant, des aviateurs envoyés en reconnaissance reviennent sans avoir rien vu. Du front, des observateurs signalent, dès les premières détonations, d’épais nuages de fumée. Les recoupements situent la pièce à 40 kilomètres de Dunkerque près de Predikboom.\nDès le 30 avril, une escadrille réussit à prendre un cliché de la pièce. Une épreuve photographique est envoyée au général Foch à Cassel. Ce bombardement a un retentissement mondial égalé par celui de Paris avec les "Berthas" tirant à 120 kilomètres. Après ces bombardements à longue portée, de nombreux Dunkerquois quittent la ville pour se réfugier à Paris.\nRuine d’une banque de Dunkerque\nLes attaques peuvent survenir aussi bien par mer, par terre ou par les airs.\nLa ville subit ainsi plus de 175 raids aériens durant la guerre, bombes ordinaires ou incendiaires tombent sur Dunkerque qui est même victime du passage meurtrier d’un zeppelin qui lâche 9 bombes le 2 avril 1916.\nLes destroyers ennemis envoient depuis le large des torpilles de taille impressionnante (jusque 300 kilos).\nVirage du Zeppelin au dessus de Dunkerque\nUn Zeppelin de l'époque\nEmplacements des pièces allemandes de Leugenboom et Prédickboom (1cm = 3,5 km)\nEn septembre 1916, les Allemands décident de reprendre le bombardement du camp retranché de Dunkerque avec une batterie tirant à longue portée. Ainsi, ils travaillent à l’aménagement d’une nouvelle pièce à l’ouest de la route d’Ostende à Thourout, près de Leugenboom, à une quarantaine de kilomètres de Dunkerque.\nLa construction de cette imposante pièce d’artillerie s’achève en mai 1917. Cette nouvelle batterie va, à intervalles irréguliers, bombarder le camp retranché de Dunkerque du 27 juin 1917 au 15 octobre 1918. Son emplacement est masqué à la vue des alliés par un bois, rendant son repérage particulièrement difficile.\nLa brèche dans le casino de Malo-Les-bains par le premier obus lancé par la pièce de Leugenboom le 27 juin 1917\nVisite du président de la République à l’hôpital\nLe dimanche 21 mai 1916 à 17 heures, le président de la République Raymond Poincaré, est venu à l’hôpital apporter son soutien aux victimes des bombardements des jours précédents.\nLe chef de l’État, accompagné du général Duparge est accueilli à Dunkerque par les généraux Hely d’Oysel et Coutanceau, le vice-amiral Ronarc’h et messieurs Terquem, maire de la ville, et Monteuuis, vice-président de la Commission Administrative des hôpitaux.\nCe dernier a fait part au président de l’exposition quotidienne de la ville aux raids des aviateurs allemands et du danger constant pour l’hôpital et ses nombreux malades.\nPavillon de la maternité de l'hôpital\nLe 10 septembre 1917, vers 21 heures, des aviateurs allemands lancent plusieurs torpilles sur le pavillon de la maternité de l’hôpital de Dunkerque, qui est presque complètement détruit.\nSix cadavres sont retirés des décombres, quatre femmes accouchées ou sur le point de l’être, un nouveau né et la sœur infirmière. La commission administrative de l’hôpital demande qu’une protestation soit adressée au président du Comité International de la Croix Rouge, pour qu’il puisse la transmettre au gouvernement de Berlin. En novembre 1918, le bilan est lourd : 575 morts dont 262 civils et 1 101 blessés dont 345 civils.\nPièce du Leugenboom


#Velodrome | OM actualité par Le Phocéen\nOM-Bordeaux à guichets fermés !\nOM : Cardoze révèle l'affluence prévue pour la réception de Bordeaux\nOM : la convention du Vélodrome reconduite pour un an\nVélodrome : "On veut que l'acheteur soit l'OM"\nOM : Le Vélodrome se transforme en vaccinodrome lundi\nBielsa : "Le Vélodrome, il faut le vivre..."\nPayan : "Mon acquéreur, c'est l'OM"\nOM : vente du Vélodrome, pourquoi maintenant?\nOM : le classement de la pelouse du Vélodrome en L1\nOM : le spectre du Stade Vélodrome\nOM : combien de spectateurs pour OM - St-Etienne ?\nOM : des places pour les 3 premiers matchs au Vélodrome mises en vente\nLes supporters de retour pour OM-Montpellier\nOM : vers une augmentation du loyer du Vélodrome ?\nVente OM : le Vélodrome pas inclus dans les plans de Boudjellal ?\nPour Griezmann, le Vélodrome, c'est le top !\nLa magie du Vélodrome n'opère plus


Meuble tv Prestige 302 laque bicolore Noir / blanc\nVous avez toujours rêvé d’un meuble tv adapté à vos envies de décoration ? Ce modèle Prestige 302 laqué bicolore en noir et blanc vous offre l’élégance recherchée pour accueillir vos convives dans un cadre convivial et design.\nUn meuble tv design bicolore\nLe noir et le blanc sont sans doute les seules couleurs capables de s’adapter à toutes les décorations. Ce meuble tv Prestige 302 laqué bicolore saura se distinguer parmi votre mobilier avec sa conception en panneaux de particules de catégorie E1, et son cadre en MDF de 30mm. D’ailleurs, ce bois écologique est très apprécié pour sa grande solidité et ses qualités décoratives. Ce modèle dispose également de 2 tiroirs avec des bordures brillantes. L'aménagement intérieur est composé d'une niche. À la livraison, ce meuble se présente en plusieurs pièces accompagnées d’une notice pour faciliter l’assemblage.\nLes meubles fabriqués en Italie sont reconnus pour leur grande qualité. Ce meuble tv Prestige 302 laqué bicolore ne déroge pas à la règle et ajoutera de la valeur à votre décoration. Grâce à sa conception solide et sa finition haut de gamme en noir et blanc, il vous offre toutes les garanties de durabilité.\nMeuble tv 4 portes Roma laqué bicolore\nCommode Carol béton laquée\nMeuble tv Joyce\nMeuble tv Greta laqué gris/béton


maman | Mieux dialoguer\nPosted on 16 juin 2014 by Anne Libbrecht Gourdet\nS’excuser a mauvaise réputation . On croit que s’excuser, c’est s’abaisser. Je pense que c’est exactement le contraire: il es honorable de s’excuser.\nQue ce soit en famille, avec des enfants ou avec des adultes, c’est un geste de réconciliation, une parole qui réamorce le dialogue, remet en route la relation, provoque la paix.\nDes parents s’interrogent si, ce faisant, ils ne vont pas perdre de leur autorité. Je ne le pense pas. Si des enfants entendent un papa ou une maman s’excuser , ils se rendent compte que les parents ne sont pas parfaits, qu’on peut donc devenir adulte sans être parfaits. Du coup, ils oseront aussi s’excuser ou avouer leurs fautes.\nDans un petit immeuble, une dame vient se plaindre qu’on a craché sur elle! La maman de 2 enfants qui habitent au 2e étage raconte cela à ses enfants. Alors le gamin de 10 ans annonce: « Ben, c’est moi. C’est si amusant de voir quand cela arrive en bas! »\nUn jour, je demande à mes enfants quelles sont les phrases les plus importantes que nous avions prononcées dans leur enfance. Notre plus jeune fils raconte ce qui l’a le plus frappé. Nous mangions dans le jardin un jour de beau temps et je demande à mon mari de bien vouloir aller chercher le dessert. Il revient : « J’ai oublié ce que tu m’as demandé d’apporter! » Ainsi son papa n’était pas l’homme parfait et il assumait!…\nAvec les enfants plus petits, c’est un peu compliqué de s’excuser car ils risquent de ne pas comprendre. Mais un geste peut les remplacer.\nCe qu’il faut pour s’excuser:\n– de la lucidité pour prendre conscience que j’ai blessé quelqu’un\n– de l’humilité pour accepter que j’ai fait une bêtise\n– du courage : comment serai-je reçu? comment va-t-on me considérer?\nJe crois que c’est aussi très libérant pour la personne qui s’est énervée de s’excuser. Je vous confie que mes relations ont évolué positivement depuis que j’ose reconnaître mes erreurs.\nIl peut être très utile d’accompagner ces excuses d’un message-JE expliquant pourquoi on a explosé: le dégât ou le sentiment négatif que l’autre a provoqué. Ainsi les choses s’éclaircissent et l’autre peut mieux comprendre l’effet de ses actes. C’est une prévention qui permet que les mêmes difficultés ne se reproduisent plus.\nFiled under Des styles d'éducation, être parent and tagged autorité, enfants, famille, maman, papa, parents, paroles, personnes, relation, relations, s'excuser |\tLeave a comment


Rénovation d'appartement ou maison Les Lilas | Travaux.com\nAccueil > Annuaire Artisan > Seine-Saint-Denis > Les lilas > Rénovation Intérieur Extérieur > Rénovation appartement, maison\nEntrepreneurs en Rénovation d'appartement ou maison à Les lilas, Seine-Saint-Denis\nEntrepreneurs en rénovation d'appartement ou maison vérifiés à Les lilas\n167 Rue Edouard Tremblay 94400 Vitry Sur Seine\nEntrepreneurs en rénovation d'appartement ou maison non vérifiés à Les lilas, 93\n65 Rue Noisy Le Sec 93260 Les lilas\n53 Avenue Pasteur 93260 Les lilas\nNabet Decor Renovation\n75 Rue De Paris 93260 Les lilas\n105 Rue De Romainville 93260 Les lilas\n36 Ru Du Coq Français 93260 Les lilas\nInformations complémentaires importantes : Il s'agit des travaux suivants. Démonter la salle de bain 4 m2 environ , douche, lavabo existants . Refaire la plomberie puisque on crée une douche italienne à la place de l'actuel lavabo et on installe un nouveau lavabo à la place de la douche. Démonter le WC et le remplacer avec un nouveau WC. Pour les deux locaux on refait les carrelage murs et sols. Parquet: il faut passer la ponceuse et vitrifier environ 30m2 de parquet bois collé. Porte d' intérieur : il faut remplacer 3 portes avec des portes dites fin de chantier. Aussi remplacer les portes d'une armoire murale deux volets. Peintures de murs plafonds: plafond , 36 m2, reprendre deux couches de blanc. Les mûrs , 40 m2 environ , à poncer et application de deux ou trois couches à ce peinture acrylique ou équivalent. Pour le moment considérer la fourniture exécutée par nos soins. Il est important de procéder à une visite des mieux pour une meilleure estimation.\nInformations complémentaires importantes : Bonjour, Il s\_'agit d\_'un studio au 2e étage dans un immeuble proche Bastille à Paris, de 14 m2. Il se compose d\_'une seule pièce, avec un point d\_'eau et ballon. Deux fenêtres qui font face à la porte en entrant, sur rue. Jusqu\_'ici il n\_'y avait pas de douche, et les WC communs sur le palier. L\_'idée est donc de complètement rénover cette pièce et la rendre confortable, et donc parvenir à créer un coin douche + WC. Sachant qu\_'a priori le seul endroit possible serait à l\_'opposé du point d\_'eau, ce qui obligerait à faire courir la tuyauterie de l\_'autre côté de la pièce où il n\_'y a rien. L\_'idée est aussi d\_'aménager un coin cuisine rationnel et, bien sûr des rangements les plus optimisés possibles et un couchage. Vous remerciant par avance, Bien cordialement,\nInformations complémentaires importantes : Il s'agit de refaire entièrement le système électrique de l'appartement (pose de prises électriques, tableau...) et d'installer un système de chauffage central au gaz de ville avec chauffe eau dans un appartement de 65 m². Il y a seulement l'arrivée de gaz dans la cuisine.Quelques lattes de planchers à refaire également.\nInformations complémentaires importantes : appartement a rénové dans le but de louer il faut crée une salle de bain , une cuisine . Il faut changer 4 fenêtres . casser une cloison non porteuse .Et électricité a refaire. Pour le parquet il suffit juste de le vitrifier . Les pièces sont aussi a repeindre en Blancs\nInformations complémentaires importantes : Nous souhaiterions refaire les peintures de toutes les pièces d un nouvel appartement que nous louons.\nInformations complémentaires importantes : Installation Electrique a refaire Plomberie a revoir Installer parquets dans les 2 chambres, couloirs, salon\nInformations complémentaires importantes : Travaux pris en charge par l'assureur. Une partie des travaux à réaliser sont pris en charge par la copropriété, notamment l'isolation des murs. Il s agit ici de faire les travaux d'embellissement de la cuisine et la salle de bain, peinture, plomberie (pose évier, douche, wc...).\nInformations complémentaires importantes : appartement a renover mur papier peints ou peinture ,plafonds .plancher a reabiliter ou couvrir\nInformations complémentaires importantes : Il y a deux salles de bains\nLes sols sont-ils à rénover ? : Oui (Plancher chauffant + pose parquet)\nLes plafonds sont-ils à rénover ? : Oui (enlever un faux-plafond au 1er étage)\nLes murs sont-ils à rénover ? : Oui (papier et plafond)\nLes plafonds sont-ils à rénover ? : Oui (faux plafond a retirer et repeindre)\nLes sols sont-ils à rénover ? : Oui (poser dalle bois au sol car plancher en mauvais état + linot par dessus sur les 19 m2 du studio)\nInformations complémentaires importantes : bonjour je souhaite un devis pour rénover la salle de bains dans sa totalité.disponible en journée


Même l'imam met la main à la pâte - 20 minutes\nMême l'imam met la main à la pâte\nActualisé 15 juillet 2008, 20:28\nDes retards additionnels dans la réalisation du nouveau centre islamique à Lausanne repoussent son ouverture.\nIls espéraient accueillir les fidèles dans la nouvelle mosquée, plus spacieuse, Sous-Gare, au printemps, puis en juillet. Mais des problèmes de financement ont ralenti l'avancée des travaux. L'imam Mouwafac el-Rifai était cependant optimiste durant la visite inédite du chantier, mardi.\nD'ailleurs, il n'hésite pas à venir en personne y donner un coup de main, parmi les bénévoles de la communauté musulmane. «Nous en sommes à la finition. Nous allons recevoir un superbe bois en tek travaillé d'Indonésie pour l'emplacement où prêche l'imam et pour les barrières au premier étage. Mais les dons sont vraiment bienvenus.»\nS'il espère encore que les fidèles puissent venir prier le vendredi dans le nouveau Centre islamique lausannois (CIL) à la fin de ce mois, le président de la communauté table, lui, sur la mi-août. Quant au porte-parole du CIL, Tewfiq el-Maliki, il confirme que des portes ouvertes pour les habitants du quartier se tiendront à la fin août. «Un autre vernissage aura lieu en septembre, durant le ramadan, où les autorités politiques locales seront cordialement invitées.»\nInviteront-ils des membres de l'UDC? «Tous sont les bienvenus pour faire connaissance.» L'occasion peut-être d'aborder le thème des minarets en Suisse? «C'est un faux problème», répondent-ils. D'ailleurs, un minaret à Lausanne pourrait être envisagé si le peuple l'accepte.»


Gilets jaunes: Comment la Manif pour tous tente d'infiltrer le mouvement | Le Huffington Post\n05/01/2019 15:35 CET | Actualisé 10/01/2019 06:45 CET\nGilets jaunes: Comment la Manif pour tous tente d'infiltrer le mouvement\nLa fin du mariage pour tous arrive en tête d'une plateforme de revendications. Pourtant, le sujet n'a jamais figuré parmi les priorités des gilets jaunes.\nLa Manif pour tous tente-t-elle de s'infiltrer chez les gilets jaunes? (photo d'illustration à Paris, octobre 2016)\nPOLITIQUE - C'est un résultat aussi surprenant que polémique. La consultation en ligne lancée le 15 décembre par le Conseil économique, social et environnemental (Cese) en prélude au grand débat national post-gilets jaunes a livré ses premiers enseignements. Chacun a pu "donner son avis" et voter pour une "contribution" sur cette plateforme mise en place pour permettre au plus grand nombre de s'exprimer.\nEt à la clôture de cet exercice démocratique, c'est la proposition de l'abrogation de la "loi Taubira" qui a recueilli le plus de voix, avec près de 5900 soutiens sur un total de 260.879 votes exprimés, tous sujets confondus.\nUn résultat pas forcément en adéquation avec les préoccupations exprimées par les gilets jaunes depuis le début de la fronde il y a près de deux mois. Si les revendications du mouvement se sont progressivement élargies, passant de la baisse des taxes sur le carburant à la revalorisation du Smic sans oublier le référendum d'initiative populaire (RIC), il est presque toujours exclusivement question de pouvoir d'achat et de démocratie.\nL'offensive des anti-mariage pour tous\nCette incohérence entre les vœux réels des Français mobilisés sous les vestes jaunes et la volonté de revenir sur le mariage entre personnes de même sexe s'explique par la mobilisation visiblement massive d'un collectif très proche de la Manif pour tous. Baptisé "On ne lâche rien", du slogan des opposants à la Loi Taubira, il a été à la pointe de cette lutte aux côtés du mouvement de Frigide Barjot puis Ludovine de La Rochère. Et comme vous pouvez le voir ci-dessous, ce sont des militants du collectif "ONLR" qui sont à l'origine de la "contribution" arrivée en tête de la plateforme du Conseil économique, social et environnemental.\nCapture d'écran CESE\nLe collectif "ONLR" à l'origine de la "contribution" arrivée en tête\n"Au vu des retombées de cette loi et des avancées nouvelles que le gouvernement entend y donner (PMA, GPA et DPI) en dépit des oppositions très majoritaires exprimées lors des États-Généraux de la Bioéthique, cette consultation inédite des citoyens par le CESE doit permettre d'engager un véritable débat sur l'abrogation de la loi Taubira", avance le collectif dans le texte qui présente la proposition. En 18 lignes, il n'est pas une seule fois fait mention des "gilets jaunes" ou du mouvement social pour le pouvoir d'achat.\nPour justifier sa proposition, l'organisme anti-mariage pour tous s'appuie sur une pétition transmise au Conseil économique, social et environnemental en 2013 et restée sans réponse. Alors pour profiter un maximum de ce système mis en place pour un tout autre but, le collectif a incité ses sympathisants à voter pour la proposition en question en relayant l'information sur son site internet avec le titre "Abrogation de la Loi Taubira: un nouveau vote au CESE. Votez avant le 4 janvier!" et un lien menant à la plateforme. Aucune référence aux gilets jaunes ou au mouvement n'apparaît en revanche sur les autres articles ou visuels du site.\nUn opportunisme provoquant la colère des internautes -gilets jaunes ou non- qui ont réagi avec plus ou moins de virulence sur le site du Conseil économique, social et environnemental. "Et on se demande pourquoi nombre de gilets jaunes pensent que cette consultation ne sera pas prise au sérieux par le CESE ou le Gouvernement. Merci LMPT, vous avez réussi à détruire de l'intérieur le premier mouvement populaire d'opposition contre Macron. Contents?" s'insurge par exemple l'un d'entre eux. Devant les réactions le CESE a expliqué en fin de journée samedi 5 janvier avoir "conscience que des collectifs en ont profité pour porter leurs revendications. Nous en tiendrons compte".\nCertains d'entre vous réagissent à la consultation menée suite au mouvement des #GiletsJaunes. Lors d'une consultation, tous les citoyens sont libres de s'exprimer. Des collectifs en ont profité pour porter leurs revendications. Nous en avons conscience & nous en tiendrons compte\n— CESE (@lecese) January 5, 2019\nRapprochement sur les ronds-points\nIl faut dire que les préoccupations autour de la famille ou des évolutions bioéthiques n'ont jamais fait partie des premières revendications du mouvement des gilets jaunes. Les très rares qui prônent l'abrogation du mariage pour tous, sur les pages Facebook dédiées à la mobilisation par exemple, sont rapidement rappelés à l'ordre par l'écrasante majorité des contestataires qui estime que ce débat n'est pas et ne doit pas être à l'ordre du jour.\nLa PMA? "Ce n'est ni le sujet ni la préoccupation des gilets jaunes. Spontanément, ils n'en parlent pas", concède même Ludovine de La Rochère, la présidente de la Manif pour tous (LMPT) à La Croix.Le quotidien explique que du 3 au 22 décembre, des membres de ce mouvement anti-mariage pour tous se sont rendus sur plusieurs ronds-points en France pour prendre contact avec les gilets jaunes. 128 au total.\n"Dans les réponses qu'ils nous donnent, presque la moitié des gilets jaunes évoque spontanément leurs familles (...) Soit parce qu'ils sont inquiets pour l'avenir de leurs enfants, soit parce qu'ils le sont pour leurs parents âgés, soit parce qu'ils évoquent le sort de leurs frères et sœurs", explique la cheffe de LMPT.\nEt si Ludovine de La Rochère jure qu'elle "ne cherche aucune alliance ni aucune récupération", cette tournée des ronds-points témoigne toutefois d'une volonté de dialogue et d'une tentative de rapprochement entre les deux mouvements sociaux, notamment au sujet de la politique familiale.\nEt même si l'abrogation du mariage pour tous ne figure pas parmi les priorités des gilets jaunes, rien n'empêche certains militants d'être partisans de la cause. La dernière figure qui monte sur les réseaux sociaux au sein du mouvement, Marguerite, une artiste reprenant et détournant un titre de Michel Fugain avait également participé en 2013 à un clip des "Veilleurs", une association luttant elle aussi contre le mariage pour les couples de même sexe.\nMarguerite, auteure du tube de l'hiver des gilets jaunes "Les gentils et les méchants" apparaissait dans un autre clip en 2014, cette fois contre le mariage pour tous: "Veilleur je suis là" https://t.co/idqHdIWj7U via @ConstantMorningpic.twitter.com/IIvvxRkMDO\n— Vincent Glad (@vincentglad) January 5, 2019\nToutefois la chanson "les gentils, les méchants", qui connaît un vif succès sur les réseaux sociaux ne comporte aucune parole tendancieuse et la Loi Taubira n'y est pas évoquée.\nAlors que la grande majorité des gilets jaunes a déjà indiqué qu'elle ne comptait pas participer au grand débat mis en place par le gouvernement, la crainte existe pour ces Français en colère, de voir des militants extérieurs au mouvement imposer leurs thèmes et leurs revendications par opportunisme. De quoi pousser les plus modérés à faire entendre leur voix lors des discussions locales? Premières réponses à la mi-janvier pour le lancement de l'opération.\nPLUS: Gilets jaunes La manif pour tous mariage pour tous POLITIQUE


Nos Produits – depuis 1980\nVous trouverez chez Centrale Literie tous types de couchages en toutes dimensions et sur mesure. Que vous recherchiez un cadre de lit particulier, des lits-coffres, des lits jumeaux, des lits pliants, banquettes clic-clac ou BZ… Nous avons une large gamme de lits et un grand choix de modèles à vous proposer.\n► Articles de literie : Oreillers, traversins, jetés de lit, linge de lit, protège-matelas, couettes…\nVous souhaitez faire appel aux service de Centrale Literie ? Profitez d’un devis gratuit à domicile si vous habitez Paris ainsi qu’une livraison gratuite, sous 24h ouvrables, des articles en stock pour les habitants de Paris et de sa banlieue. Nous expédions également dans toute la France métropolitaine. Contactez-nous !


Découverte du fish and chips pour Rom aujourd'hui. Nous sommes allés dans le plus ancien petit port de pêche du Gippsland (1841), réputé pour ce plat, Port Albert.\nAprem tranquilou à longer la côte de Seaspray à Golden Beach. La plage nommée 90 Mile Beach, fait comme son nom l'indique 90 miles soit 144km de long oui oui, et il n'y a bien sûr personne dessus. Celà nous aura laissé le temps de faire nos abdos, et oui parce qu'on s'est remis un peu au sport, ça fait pas de mal et on fait ça tous les 2 jours, quel sérieux !\nEn fin de journée nous sommes allés marcher un peu dans la zone humide repéré en passant.\nLe soir nous nous sommes trouvés un super coin tranquile au bord de la rivière pour faire dodo. Il a suffit d'un petit détour pour voir un pont historique pivotant et le tour est joué.\nLe lendemain, après un rapide passage à Sales où nous avons squatter toute la matinée l'office de tourisme qui offre le wifi gratuit, (de temps en temps c'est cool de tomber là-dessus), nous avons pris la route pour Bairnsdale. Nous avons été voir l'église Sainte Marie dans laquelle il y a de très belles fresques.\nNous sommes allés à Paynesville jusqu'à eagle point pour voir un exemple de jettées naturelles, formées par l'accumulation des sédiments au fil du temps. Elles font 8km de long, sont habitées et sont un des rares exemples au monde après celles que l'on trouve vers le fleuve Mississippi. Sur notre chemin, rencontre avec un lézard à langue bleue.\nLe soir on s'est encore trouvés un super endroit au bord de la rivière avec nos voisins les pélicans. Ca valait bien un petit apéro ça !\nDécouverte de Lakes Entrance. Nous avons fait une chouette balade en sous bois mais dans le sable, juste en bordure de plage et au bout une surprise nous attendait. Nous y avons vu des otaries faire les dingues dans les vagues et des dophins. Un merveilleux spectacle que nous sommes restés un bon moment à admirer.\nPetit arrêt au Trestle Bridge sur la route. Il s'agit d'un pont construit pour le chemin de fer au XIXe siècle. Architecture atypique. On en a retrouvé un morceau plus loin le long de notre route.\nPuis on s'est posés dans notre Gh du soir au bord de la rivière, qui nous a servi de salle de bain. Merci mère nature !\nUne belle surprise nous a été faite le soir. Un black tailed possum est venu à notre rencontre au pied du van quand nous sommes sortis. Il était trop mignon. Ca fait un bel animal qui a de bonnes griffes. Curieux, il est venu poser ses pattes sur les genous de Rom. On est resté un bon moment à le regarder nous regarder lol !