L'usage du tabac entraîne de nombreux problèmes de santé, dont le cancer, les maladies cardiaques, l'emphysème, et d'AVC. La dépendance à la cigarette est un trouble neuropsychiatrique répandue qui découle des actions biophysiques et cellulaires de la nicotine sur les récepteurs nicotiniques de l'acétylcholine (nAChR) dans le système nerveux central. Comprendre les sous-types de nAChR différentes qui existent dans les zones cérébrales concernées dépendance à la nicotine est une priorité majeure.\nLes expériences qui recourent à des techniques d'électrophysiologie comme patch clamp de cellules entières ou de deux électrodes de potentiel imposé enregistrements sont utiles pour la caractérisation pharmacologique de nAChR d'intérêt. NAChR cellules exprimant mammifères, tels que les cellules de culture tissulaire ou ovocytes de Xenopus laevis, sont physiquement isolés et sont donc faciles à étudier en utilisant les outils de la pharmacologie moderne. Beaucoup de progrès ont été réalisés en utilisant ces techniques, en particulier lorsque le récepteur cible était déjà connu unee ectopique expression a été facilement atteint. Souvent, cependant, il est nécessaire d'étudier nAChR dans leur environnement naturel: dans les neurones dans des tranches de cerveau aiguë récoltés à partir des souris de laboratoire ou des rats. Par exemple, des souris exprimant "hypersensible" sous-unités nAChR tels que les souris L9'A α4 α6 1 et les souris L9 2'S, permettre une identification sans ambiguïté de neurones sur la base de leur expression fonctionnelle de la sous-unité de nAChR spécifique. Bien que la cellule entière enregistrements de patch-clamp de neurones dans des tranches de cerveau est fait de façon routinière par l'électrophysiologiste qualifiée, il est difficile d'appliquer localement des médicaments tels que l'acétylcholine ou la nicotine à la cellule enregistrée dans une tranche de cerveau. La dilution de la drogue dans l'superfusat (demande de bain) n'est pas rapidement réversible et tube en U systèmes ne sont pas facilement adapté pour fonctionner avec des tranches de cerveau.\nDans cet article, nous décrivons une méthode pour appliquer rapidement nAChR activant les médicaments pour les neurones enregistrés chez les adultes mOuse tranches de cerveau. Standard de cellules entières enregistrements sont faits à partir de neurones en tranches, et une seconde micropipette remplie d'un médicament d'intérêt est manoeuvré en position près de la cellule enregistrée. Une injection d'air sous pression ou de l'azote inerte à l'intérieur de la pipette remplie de médicament entraîne une petite quantité de solution de médicament devant être éjectée à partir de la pipette sur la cellule enregistrée. En utilisant cette méthode, nAChR médiées par les courants peuvent être résolus avec une précision milliseconde. Temps d'application de drogue peut facilement être modifiée, et la pipette remplie de médicament peut être retiré et remplacé par une nouvelle pipette, permettant courbes concentration-réponse doit être créé pour un seul neurone. Bien que décrite dans le contexte de nAChR neurobiologie, cette technique devrait être utile pour étudier de nombreux types de canaux ioniques ligand-dépendants ou des récepteurs de neurones à partir de tranches de cerveau.\n1. Préparation des solutions pour la préparation de tranches de cerveau et d'électrophysiologie\nSolutions pour la préparation de coupes de cerveau ont été décrites précédemment 3, 4. Préparer la N-méthyl D-glucamine (NMDG)-en fonction de coupe et de récupération de la composition suivante (en mM): 93 N-méthyl D-glucamine, 2,5 KCl, 1,2 NaH 2 PO 4, 30 NaHCO 3, HEPES 20, 25 glucose, 5 Na + ascorbate, 2 thiourée, 3 Na + pyruvate, 10 MgSO 4 • 7H 2 O, 0,5 CaCl 2 • 2H 2 O. Ajuster à 300-310 mOsm avec NMDG. Ajuster le pH à 7.3 à 7.4 avec HCl 10 N.\nDissoudre MgSO 4 • 7H 2 O et CaCl 2 • 2H 2 O dans de l'eau millipore pour faire 2 solutions mères de chaque M.\nPeser d'autres composants dans l'ordre indiqué et ajouter une fiole jaugée partiellement rempli d'eau Millipore en remuant pour dissoudre. Une fois que tout est ajouté, remplissezfiole jaugée avec de l'eau Millipore.\nMesurer le pH et l'ajuster avec 10 HCl.\nMesurer l'osmolarité et ajuster avec NMDG si nécessaire.\nPréparer HEPES maintien du liquide céphalorachidien artificiel (ACSF) ayant la composition suivante (en mM): NaCl 92, KCl 2,5, 1,2 NaH 2 PO 4, 30 NaHCO 3, 20, 25 HEPES, 5 glucose Na + ascorbate, 2, 3 Na thiourée pyruvate +, 2 MgSO 4 • 7H 2 O, 2 CaCl 2 • 2H 2 O. Ajuster à 300-310 mOsm avec du saccharose. Ajuster le pH à 7.3 à 7.4 avec HCl 1 N ou NaOH.\nPeser les composants dans l'ordre indiqué et ajouter une fiole jaugée partiellement rempli d'eau Millipore en remuant pour dissoudre. Une fois que tout est ajoutée, remplir fiole jaugée avec de l'eau Millipore.\nMesurer le pH et ajuster avec NaOH ou HCl, si nécessaire.\nMesurer et ajuster l'osmolarité de saccharose, si nécessaire.\nPréparer la solution étalon de aCSF enregistrement de la composition suivante (en mM): 124 NaCl, KCl 2,5, 1,2 NaH 2 PO 4, 24 NaHCO 3, 12,5 glucose, 2 MgSO 4 • 7H 2 O, 2 CaCl 2 • 2H 2 O. Ajuster à 300-310 mOsm avec du saccharose. Ajuster le pH à 7.3 à 7.4 avec HCl 1 N ou NaOH.\n2. Préparation des tranches de cerveau aiguë\nCoupe de tranches de cerveau et de récupération sont effectuées comme décrit précédemment 3, 4. Plats bulle de cristal rempli de deux NMDG solution de récupération de l'oxygène à 95% / 5% de CO 2 de gaz (carbogène), un plat sur la glace, l'autre à 33 ° C.\nUne bulle de cristal plat rempli d'HEPES maintien aCSF avec carbogène à température ambiante.\nAnesthésier la souris adulte (âgée de 2 à 12 mois) avec du pentobarbital Na + (200 mg / kg, ip). Passez à la procédure lorsque l'animal n'a pas de réponse à un orteil-pincement.\nSi nécessaire, couper la queue d'un échantillon de tissu pour plus tard génotypagetion de l'animal.\nOuvrez la cage thoracique, exposer le cœur, et serrer l'aorte descendante. Lacérer l'oreillette droite.\nTranscardiaque perfuser animal avec 5-10 ml de 0-4 ° C NMDG-récupération de la solution.\nDécapiter, détacher le cerveau et le placer dans 4 ° C NMDG-récupération de la solution pendant 1 min.\nSur une plaque de métal refroidi à la glace, couper le cerveau dans l'orientation désirée (coronale, parasagittale, horizontal, etc) pour y inclure la zone d'intérêt.\nFixez le bloc de cerveau avec de la colle à la surface de la platine à sec d'une trancheuse vibrant (DSK-Zero 1; Dosaka), immerger le bloc du cerveau chez 4 ° C NMDG-récupération de la solution, et en continu la solution à bulles avec carbogène.\nCouper les tranches de la zone du cerveau d'intérêt. L'épaisseur des tranches est de 200-400 um, en fonction de la zone du cerveau spécifique d'intérêt, âge de l'animal, et expérience à réaliser.\nImmédiatement après la coupe, incuber les tranches souhaitées dans carbogenated, 33 ° C NMDG recouvrement des solutipendant exactement 12 min, puis transfert à carbogenated, HEPES température ambiante détenant solution pour une période initiale de 60 min. Après cette incubation 60 min, les tranches peuvent être utilisées pour l'enregistrement. Tranches sont maintenus en solution HEPES maintien tout au long de la journée jusqu'à ce qu'ils soient utilisés pour l'enregistrement.\n3. Enregistrement de patch-clamp de neurones dans des tranches de cerveau\nTirez une micropipette de raccordement standard avec un programmable Flaming-Brown extracteur (Sutter P-97 ou équivalent extracteur vertical). Pipettes qui sont optimales pour la formation de joint giga-ohms ont généralement une résistance de 4-6 MQ\nTransfert d'une tranche de la chambre d'enregistrement (RC-27L, Instruments Warner) sur la platine d'un microscope droit (Nikon PN-1). Continue superfuse (1,5 - 2,0 ml / min), la tranche avec carbogenated, enregistrement standard aCSF chauffée et maintenue à 32 ° C. En variante, des tranches peut être maintenu à la température ambiante.\nLocalisez et centre de la zone du cerveau d'intérêt en utilisantun objectif 10X air (Nikon Plan Fluor 10X; NA 0,3; WD: 16 mm).\nVisualisez les neurones individuels en utilisant un 40X proche infrarouge (IR) Objectif immersion dans l'eau (APO Nikon 40XW; NA: 0,80; Roues motrices: 3,5 mm) relié à contraste d'interférence différentiel IR (DIC) et un système optique à haute vitesse proche infrarouge dispositif couplé chargé caméra vidéo (CCD) (Hamamatsu C-7500). Sous IR-DIC observation, les neurones sains présentent une surface lisse, la membrane plasmique gris clair.\nRemplir une micropipette avec une solution d'enregistrement intracellulaire approprié. Pour la plupart des applications, nous utilisons la solution suivante (en mM): 135 gluconate de potassium, 5 EGTA, 0,5 CaCl2, MgCl2 2, 10 HEPES, 2 Mg-ATP, GTP et 0,1 (pH ajusté à 7,25 avec du Tris base, l'osmolarité ajustée à 290 mOsm avec du saccharose). Établir un enregistrement de cellule entière d'un neurone visualisées.\n4. Application locale de médicaments à neurones de tranches\nTirez une micropipette de raccordement standard de serrage comme décrit ci-dessus. Utilisationun extracteur pipette comme une Sutter P-97 qui produit deux «sœurs» identiques conseils de la même pièce de verre est avantageuse lorsque plusieurs solutions médicamenteuses doivent être utilisés sur la même cellule. Tailles de buses qui ont une résistance d'environ 5 MW s'ils ont été remplis avec la solution intracellulaire décrit ci-dessus sont optimales.\nRemblai de la micropipette avec une solution de médicament dilué dans carbogenated, aCSF enregistrement standard. Pointer le bout vers le bas et secouez la micropipette remplie de médicaments pour éliminer les bulles d'air piégées dans la colonne de solution.\nMonter la micropipette remplie de médicament dans un support de pipette reliée à un tube de système d'éjection de pression approprié, tel qu'un Picospritzer III (General Valve Co.). Le porte-pipette doit être monté sur un micromanipulateur avec la même résolution que les manipulateurs couramment utilisé pour l'enregistrement de patch-clamp (par exemple, Sutter MP-285). En outre, le manipulateur doit permettre un mouvement dans et hors diagonale de la tranche. Hommegressivement éjecter pression 3 à 4 fois dans la micropipette afin de faire monter la pression suffisant derrière la colonne de fluide.\nUtilisation des commandes micromanipulateur, abaisser la pipette médicament dans la tranche tout en visualisant la pointe sous IR-DIC optique. Idéalement, on devrait identifier visuellement et au centre d'un neurone à être enregistrés à partir, suivi par le positionnement de la pipette de drogue près de la cellule avant d'abaisser la micropipette enregistrement dans la tranche. Le positionnement de la pipette de médicaments peuvent provoquer un déplacement du tissu dans le voisinage de la cellule enregistrée qui pourrait perturber l'enregistrement si le médicament pipette est déplacée en position après l'établissement d'un joint d'étanchéité gigaohm.\nUtilisation de la vidéo IR, positionner la micropipette médicament à la surface supérieure de la tranche de tissu. Exécutez une pression d'éjection et le moniteur 1) au voisinage de la pointe pour le mouvement des débris liés à l'éjection, et 2) la pointe de la micropipette pour tous les signes que la buse est bouché ou bloqué. Si la pointe est bloqué / bouché, rétracter le pipette et le remplacer par un nouveau.\nApprocher la cellule enregistrée en diagonale à partir de la partie supérieure de la tranche de telle sorte que lorsqu'il est en position finale, l'extrémité de la pipette est remplie de médicament 1) dans le même plan focal (ou légèrement inférieur) que la cellule enregistrée et l'extrémité de l'électrode d'enregistrement , et 2) 10 à 40 um de la cellule enregistrée. Si la pointe de pipette remplie de médicament est enregistrée au-dessus de la cellule, la force de la pression d'éjection pourrait perturber le joint gigaohm.\nEnregistrer la réponse cellulaire désiré tout en maintenant la cellule en mode voltage imposé ou en mode pince de courant. Nous avons l'habitude d'enregistrer l'acétylcholine et / ou à la nicotine a suscité des courants cellulaires tout en maintenant les neurones en mode voltage imposé. Bien que la pression d'éjection peut être déclenchée manuellement lorsque vous utilisez un Picospritzer III, pour des résultats plus reproductibles, il est recommandé de déclencher l'éjection sous pression à l'aide du système d'acquisition (Axon Digidata 1440 et pClamp 10,3) avec une impulsion TTL numérique.\n5. ContrôleMicropipette la Drug-remplie avec un traducteur piézoélectrique\nSi possible, monter le support de pipette remplie de médicament à un traducteur piézo-électrique à une seule dimension (par exemple Piezojena PA-100 ou Burleigh PZM-150) qui est capable d'accepter une entrée de tension analogique (encore une fois, à partir du système d'acquisition), qui est ensuite monté sur le micromanipulateur de haute précision (Sutter MP-285). Un traducteur piézo-électrique est utile parce que le mouvement de la pipette remplie de drogue dans et hors de la tranche, y compris le calendrier et la vitesse d'entrée / sortie, peuvent être plus facilement contrôlées et reproduites par une expérience à l'. Lorsque l'on étudie les nAChR, les effets de fuite de désensibilisation nicotine de la pipette remplie de médicament, ils doivent toujours se produire, sont réduits au minimum lorsque la pipette est déplacée uniquement à proximité de la cellule avec un traducteur piézo-électrique pour le moment de l'éjection de pression.\nL'aide du potentiomètre à commande manuelle sur l'amplificateur de commande de tension piézo-électrique, composez la tensionà sa valeur maximale.\nÀ l'aide du micromanipulateur, la position de la pipette remplie de médicament dans la tranche où la pipette est éjectée de son contenu sur la cellule enregistrée, et rétracter par la pipette manuelle réduire la tension de zéro sur l'amplificateur de commande de tension piézo-électrique.\nEn utilisant un signal de sortie analogique à partir du système d'acquisition d'enregistrement, déplacer la pipette remplie de médicament dans la tranche sur une période de 250 ms 300 ms à partir de la pression d'éjection avant TTL impulsion se produit. Rétracter la pipette sur une période de 250 ms, à partir 50 ms après l'impulsion TTL extrémités.\nDans nos expériences, nous avons l'habitude d'enregistrer à partir de la dopamine (DA) de production de neurones de l'aire tegmentale ventrale (ATV) et la substantia nigra pars compacta (SNC). Dans voltage-clamp mode, application de pression de l'acétylcholine ou la nicotine à ces cellules entraîne habituellement de façon rapide, courant vers l'intérieur cation qui atteint pic entre 100-200 ms (figure 1A-B). Décroissance du courant est largement dictée par la diffusion du médicament à partir du site d'action, et si les enzymes dans la tranche sont présents à métaboliser le médicament dans une forme inactive. Par exemple, l'ACh est rapidement hydrolysé par acetylcholinesterases qui se trouvent sur la surface des cellules dans les zones du cerveau qui sont riches en neurones DA 5. Cela se traduit par une décroissance rapide du courant évoquée (figure 1A). En revanche, la nicotine n'est pas hydrolysé et de la nicotine évoqués courants ne se décomposent pas aussi rapidement que l'ACh évoquée courants (figure 1B), qui lui permet de fortement Activmangé et désensibiliser nAChR 6.\nSystèmes d'éjection de pression permettent à l'opérateur de faire varier le temps de l'impulsion de pression. Cette fonction est utile pour étudier nAChR à la surface des neurones dans des tranches de cerveau, car elle permet à l'enquêteur de déterminer si le courant maximal évoqué a été réalisé en réponse à une impulsion de drogue. Par exemple, les deux traces de la figure 2 montrent que 250 ms de la demande de drogues (gris trace) peut ou peut ne pas révéler définitif maximale évoquée actuelle, alors que 1000 ms d'application de drogue (trace noire) donne un maximum net courant plus stable certains désensibilisation État. Résoudre ces courants "de pointe" est crucial lors de la construction d'une précision courbe concentration-réponse, ou lorsque l'on étudie la désensibilisation nAChR.\nNeurones dopaminergiques dans le mésencéphale ventral souvent tirer des potentiels d'action spontanés lors de l'enregistrement dans les tranches cérébraux aigus 7, 8. souris α6 L9, qui exappuyer sur nAChR qui répondent parfaitement à 10 à 100-pliage concentrations inférieures de la nicotine ou ACh 2, 9-11, présentent locomotion augmenté en réponse à des injections de nicotine. Pour corréler l'activité neuronale (tir potentiel d'action) avec un comportement, il est utile d'appliquer la nicotine à α6 L9'S neurones DA enregistrés dans le courant de serrage mode. En règle générale, l'application locale de la nicotine (1 uM) à α6 L9'S neurones dopaminergiques se traduira par une accélération rapide et transitoire de mise à feu qui se désintègre retour à la normale en 30-40 secondes 2 (figure 3, panneau supérieur). Ces réponses à la nicotine sont facilement quantifiables (figure 3, panel du bas) avec le logiciel d'analyse approprié (par exemple pClamp; Molecular Devices Corp.)\nDes expériences dans des cellules en culture ou ovocytes de Xenopus avec nAChR ectopique exprimées profiter de l'avantage d'une série de concentrations de médicament peut être appliqué à chaque cellule a enregistré 12. Enneurones dans des tranches de cerveau, généralement une courbe concentration-réponse n'est pas possible, et les réponses à une seule concentration de la drogue sont souvent rapporté 1. Cependant, une pipette remplie de médicament tel que décrit dans le présent document peuvent être modifiés à maintes reprises pour permettre de multiples concentrations de médicament à appliquer à la même cellule de réception dans un cerveau tranche 2, 8, 13, 14. La figure 4 montre des données représentatives d'une seul neurone enregistré DA qui a été stimulé par trois concentrations d'ACh. L'expérience du chercheur, combiné avec un micromanipulateur très stable tenant la pipette remplie de drogue, sont des facteurs essentiels menant à la réussite dans ce type d'expérience. En cas de succès, cette approche fournit de précieuses informations sur les pharmacologique nAChR indigènes.\nNeurones dans des tranches de cerveau, y compris les types de cellules non caractérisés ou ceux présents dans les zones du cerveau avec une population hétérogène, sont souvent classées selon divers éléments de basectrophysiological mesures et / ou morphologique 15. Par exemple, l'expression de h courant I, le potentiel de membrane au repos, le taux de décharge spontanée, et la taille des cellules sont des mesures habituellement utilisées pour caractériser les neurones DA 2, 7, 8, 16, 17. Grâce à notre méthode, il est également possible de caractériser les neurones en fonction de leur réponse à la nicotine localement appliquée ou ACh 18, 19. Par exemple, le colliculus supérieur (CS) est une région du cerveau hétérogène et relativement non caractérisés avec une expression extrêmement élevé de nAChR divers, y compris ceux qui contiennent des sous-unités α6 20. Des tranches de cerveau de souris α6 L9'S, nous avons enregistré des neurones SC plusieurs nicotine appliquée (1 uM) à l'aide de pression d'éjection avec une pipette remplie de nicotine. Deux types de réponses distinctes ont été observées: 1) l'activation des courants postsynaptiques inhibiteurs (CPSI) (figure 5, les réponses de type I), et 2) les grands courants cations vers l'intérieur avec un peu inductisur des courants postsynaptiques excitateurs (EPSCs) (figure 5, les réponses de type II).\nL'utilisation d'un traducteur piézo-électrique présente l'avantage que la pipette remplie de médicament peut être maintenu dans une position stationnaire au moins 100 um loin de la cellule enregistrée jusqu'à ce qu'il soit rapidement déplacé à côté de la cellule de la pression d'éjection. Ceci est utile parce que le mouvement pipette peut être automatisé et est compatible à partir de cellule en cellule et sur au jour le jour. Il est également utile lorsque des concentrations élevées de nicotine (qui désensibiliser nAChR) sont appliquées à la cellule enregistrée, car elle minimise l'effet des fuites de nicotine de la pipette remplie de médicament devrait jamais se produire. Pour démontrer la cohérence des courants nAChR lorsque vous utilisez un traducteur piézo-électrique, nous avons enregistré des neurones DA VTA dans des tranches de cerveau de souris α6 L9'S. Figure 6 montre les réponses consécutives dans le même α6 L9'S neurone VTA DA en réponse à des concentrations de nicotine qui a fortement activer hypersensibles α6 * nAChR (1 uM: la figure 6A; 10 pM: Figure 6B). Si on les laisse en permanence sur la cellule de fuite nominal, ces concentrations de nicotine pourrait s'attendre à désensibiliser nAChR sur la surface de la cellule, et la seconde réponse serait atténué par rapport à la première réponse.\nFigure 1. NAChR réponses représentatives de neurones dopaminergiques. A. Un neurone DA dans une tranche de cerveau de souris WT était serré de tension, suivie par l'application locale de l'ACh (100 uM) par l'intermédiaire de pression d'éjection (250 ms) à l'aide d'un médicament rempli de seconde pipette. Barre d'échelle: 100 pA, B 3 sec.. Expérience a été réalisée comme décrit en A, sauf que la nicotine (100 uM) a été appliqué au neurone DA. Barre d'échelle: 60 pA, 3 sec.\nFigure 2. Résoudre les courants de pointe par temps de drogues application variable. Un neurone DA dans une tranche de cerveau de souris WT était serré de tension, suivie par l'application locale de l'ACh (100 uM). Deux réponses sont présentées pour la même cellule enregistrée, où ACh a été éjecté de la pipette remplie de drogue pour 250 ms (gris trace) ou 1000 ms (trace noire). Barre d'échelle: 50 pA.\nFigure 3. Etudier le potentiel d'action de tir après l'application locale de médicaments. Un neurone DA dans la tranche d'un L9 α6'S cerveau de souris a été enregistré en pince de courant (I = 0) le mode et les potentiels d'action spontanés ont été observés. Nicotine (1 uM) a été appliquée à l'aide de pression d'éjection (250 msec), et les variations de potentiel d'action de mise à feu et le taux potentiel membranaire de repos étaientobservée. En utilisant le logiciel pClamp (recherche de seuil), cadence de tir instantané a été dérivé et est indiquée dans le panneau inférieur.\nFigure 4. Applications multiples médicaments à la même cellule enregistrée. Un neurone DA dans la tranche d'un L9 α6'S cerveau de souris a été enregistré en mode voltage imposé. Une pipette remplie de médicament a été utilisé pour appliquer localement ACh (1 uM; 250 msec). Tout en continuant à enregistrer à partir de la cellule, la pipette remplie de médicament a été retiré de la tranche et remplacée par une autre pipette remplie avec 3 uM ACh. Une réponse à 3 uM ACh a été enregistré, et le processus a été répété à nouveau pour 10 M ACh. Barre d'échelle: 100 pA, 1,5 sec.\nFigure 5. Classification des neurones selon le type de réponse nAChR.Un groupe de colliculus supérieur (CS) des neurones dans une tranche α6 L9'S cerveau de souris étaient serrées tension, suivie par l'application locale de la nicotine (1 uM) par l'intermédiaire de pression d'éjection. Neurones de type I expose CISP a augmenté suite à l'application de nicotine. Type de neurones II expose grands courants entrants et EPSCs accrus en réponse à la demande de nicotine. Barre d'échelle: 20 pA, 3 sec.\nFigure 6. Traducteur piézoélectrique offre la cohérence et la protège contre les fuites de drogue. A. Un VTA DA neurone dans une tranche de cerveau de souris a L9 α6 a été enregistré en mode voltage imposé lors de l'application de 1 uM de nicotine. La pipette remplie de nicotine a été manoeuvré en position finale avant l'éjection de pression et rétractée après l'éjection à l'aide d'un traducteur piézo-électrique. Une deuxième réponse a été enregistré 2 min après la first de démontrer qu'aucun désensibilisation nAChR avait eu lieu. Barre d'échelle: 100 pA, 8 sec B.. réponses nAChR dans α6 L9'S neurones DA AVV ont été enregistrées comme dans A, mais 10 uM de nicotine a été appliquée. Barre d'échelle: 100 pA, 8 sec.\nLa méthode présentée dans cet article est généralement utile pour étudier ligand-gated fonction des canaux ioniques dans les préparations de tranches de cerveau. Cependant, il ya un certain nombre de facteurs qui vont affecter de manière significative la qualité et la reproductibilité des données expérimentales qui résultent de l'utilisation de cette méthode. Par exemple, les courants évoqués sont très sensibles au diamètre de la pointe de la pipette remplie de médicament. Petits conseils provoquera des problèmes avec l'éjection de la solution médicamenteuse, et des conseils importants avec une faible résistance seront plus susceptibles de perturber le sceau gigaohm entre la cellule enregistrée et l'électrode d'enregistrement. Une autre limitation de la méthode présentée est que les cellules à moins de 10 um de la cellule enregistrés peuvent être exposés à des médicaments de la pipette remplie de médicaments, ce qui peut augmenter leur activité et pourrait potentiellement affecter la cellule enregistrée.\nLors de l'application de médicaments dans une cellule plusieurs fois avec la pipette même médicament, il est crucial que la pipette être retourné àprécisément la même position dans la tranche pour chaque application. Même de petites variations (par exemple 1-2 um) dans le placement de l'une des réponses à l'autre se traduit souvent par des différences importantes dans la réponse maximale observée. Un traducteur piézo-électrique programmable (tel que décrit ci-dessus) ou micromanipulateur robotique est avantageux pour le positionnement de la pipette de drogue. Un autre facteur clé est la profondeur de la cellule enregistrée dans la tranche. Médicament sera souvent diffuser hors de la cellule sur la surface de la tranche plus rapidement, alors que le produit pharmaceutique peuvent être "piégé" dans la tranche lorsque éjectée sur une cellule qui se trouve au fond de la tranche. C'est souvent un facteur clé lors de l'application de nicotine, ce qui désensibilise facilement nAChR lorsque les temps d'exposition sont plus longues que 100 à 200 ms. De même, la pression (en psi) qui est éjecté dans la pipette remplie de drogue et la quantité de temps que la pression est appliquée (figure 2) sont des considérations importantes pour l'interprétation actuelle nAChR data. Nous utilisons régulièrement 10-12 psi de pression, et nous constatons que 250 ms suffisamment de temps pour régler les courants de pointe nAChR sans causer de désensibilisation des récepteurs vaste.\nUn des principaux avantages de la méthode que nous décrivons est la capacité d'échange de drogue remplis de conseils pipettes de sorte que les concentrations de plusieurs médicaments peuvent être appliquées à un même neurone. Les principales considérations où les pipettes à échanger sont: 1) la variation dans l'emplacement pointe de la pipette d'une concentration à l'autre, et 2) la variabilité de diamètre pointe de la pipette. Pointe de pipette emplacement peut généralement être suffisamment contrôlée avec une caméra vidéo haute résolution proche infrarouge et d'un micromanipulateur précis. La variabilité de diamètre embout de pipette peut être contrôlé à l'aide de pipettes "soeurs" chaque fois que possible, et en utilisant un extracteur pipette qui tire micropipettes avec un haut degré de précision et de cohérence.\nDans l'ensemble, la méthode de la pipette remplie de drogue décrite dans cet article est une approche très utile lorsque studying nAChR indigènes exprimé dans les neurones présents dans des tranches de cerveau de courte durée. En plus d'être utile pour étudier la neurobiologie de la dépendance à la nicotine et nicotinique cholinergique la biologie, cette méthode est facilement applicable à d'autres canaux ioniques ligand-dépendants. 5-HT 3, récepteurs GABA A et les récepteurs glycine sont plusieurs des autres "cys-loop" récepteurs qui peuvent être étudiés en utilisant ces techniques 21.\nCe travail a été soutenu par les Instituts Nationaux de Santé (NIH) DA030396 subvention. Merci aux membres du laboratoire Drenan de discussion utile et critique du manuscrit. Un merci spécial à Mi Ran Kim pour l'assistance technique et Jonathan Thomas Ting pour obtenir des conseils en ce qui concerne les tranches de cerveau de souris adultes.


J'ai trouvé un certain nombre de produits qui sont utiles pour de beaux cheveux et non une sorte de produit capillaire miracle.\nIl existe de nombreux produits de beauté. Il existe des produits pour la perte de cheveux, la croissance des cheveux et les soins capillaires en général, etc. Dans cet article, je vais énumérer certains des produits capillaires les plus efficaces que j'ai trouvés sur le marché. Le top 5 des produits capillaires pour de beaux cheveux 1. Persil et eau de rose - L'un des produits les plus connus, le produit fait un bon travail en gardant le cuir chevelu propre et hydraté. Les avantages du produit comprennent la prévention de la formation de pellicules, la prévention de la chute des cheveux et le soulagement du cuir chevelu sec. 2. Jus de citron - L'un des produits populaires sur le marché, il est idéal pour nettoyer et revitaliser les cheveux. En plus d'aider les cheveux, il contient également de la vitamine C, qui peut aider les cheveux à devenir plus épais et plus sains. 3. Huile de rose - Une autre marque populaire et bien connue qui aide à garder le cuir chevelu en bonne forme. C'est l'ingrédient naturel qui rend l'huile de rose si efficace. En plus de réduire l'inflammation, il aide le cuir chevelu à retenir l'humidité.\nPour une croissance plus poussée des cheveux, FreshDepil très probablement la solution. Ceux-ci se ...\nDe plus en plus d'amateurs parlent de ce remède et de leurs expériences en rapport avec l'a...\nChaque fois qu'il s'agit de Forso A+ la croissance des cheveux, Forso A+ inévitablement lié...\nLa situation semble Vivese Senso Duo Oil : l’ Vivese Senso Duo Oil merveilles. Au moins, si vous vo...\nPlus de croissance de cheveux est obtenue avec Stop Grow apparemment le plus facile. Celles-ci sont...\nBliss Hair indéniablement efficace pour améliorer exceptionnellement bien la croissance des cheveux...\nLes faits ressemblent évidemment à ceci: Princess Hair grave. Au moins la thèse revient, on voit le...\nDepilage est actuellement considéré comme une véritable Depilage secrète, mais sa réputation ne ces...\nDe plus en plus de gens parlent de Provillus For Women et de leurs succès dans l'utilisation de...


MUSÉE DE PONT-AVEN - 7 jours\nEn 1886, Gauguin effectue son premier séjour à Pont-Aven, au même moment Claude Monet maître et précurseur du mouvement impressionniste séjourne à Belle-Ile-en-Mer. Plus tard, l’impressionnisme rencontre l’adhésion de certains artistes venus peindre ou s’installer en Bretagne. 80 œuvres à découvrir au Musée de Pont-Aven, du 29 juin 2019 au 5 janvier 2020.\nMaxime Maufra, La crique, côte sauvage, 1903\nL’impressionnisme mais aussi la Bretagne ont joué un rôle essentiel dans le cheminement de Paul Gauguin et des peintres qui l’ont cotoyé à Pont-Aven : Henry Moret, Maxime Maufra, Ferdinand Loyen du Puigaudeau, Gustave Loiseau, peintres de la lumière et de la couleur !\nC’est le propos de la nouvelle exposition du Musée de Pont-Aven, conçue par Estelle Guille des Buttes, conservatrice en chef du Musée de Pont-Aven avec le concours de Jacqueline Duroc, auteur du catalogue et le partenariat du musée d’Orsay : 80 œuvres issues du Musée d’Orsay, du Musée de Reims, du Musée d’Art moderne du Havre, du Musée d’Arts de Nantes, des Musées des Beaux-Arts de Rennes et de Quimper, du Petit Palais de Genève, du Museo Thyssen Bornemiza de Madrid et de quelques belles collections particulières.\nClaude Monet, Pluie à Belle-Ile, 1886, Musée de Morlaix\nHenry Moret, Goulphar à Belle-île, 1895, Paris, Musée d’Orsay\nGustave Loiseau , la rue de concarneau à Pont-Aven, 1926 , huile sur toile , Musée de Pont-Aven\nPaul Gauguin participe à la dernière exposition impressionniste en 1886. Celle-ci marque la dispersion du groupe. C’est Pissarro qui dès 1874 l’a incité à peindre en plein air pour apprivoiser la lumière de l’instant et la restituer sur la toile, avec force couleurs ! La confrontation des toiles de Pissarro et de Gauguin souligne la parenté de leur vision. 1886 est aussi l’année où Gauguin séjourne pour la première fois à Pont-Aven. Ses expérimentations entre 1886 et 1889, aboutissent au cloisonnisme et au synthétisme : des couleurs posées en aplats cernées d’un trait sombre. Bref, une nouvelle manière de peindre qui s’écarte de l’impressionnisme. Les influences visibles et parfois passagères de ce courant dans le groupe de Pont-Aven perdurent jusqu’au départ définitif de Gauguin à Tahiti en 1895.\nPont-Aven après Gauguin : impressions bretonnes\nLa seconde partie de l’exposition met l’accent sur les artistes qui sont restés fidèles à l’impressionnisme et qui mettent leurs pas dans ceux de Monet en Bretagne. En 1886, l’année où Gauguin découvre Pont-Aven, Monet est à Belle-Ile. Il y peint 39 toiles montrant les caprices du temps à partir d’un, même lieu ( comme les aiguilles de Port Coton), au fil des heures de la journée, au gré des averses de pluie et des tempêtes. Déjà se dessine l’idée de la série.\nAprès le départ de Gauguin, les peintres du groupe de Pont-Aven regagnent leur ateliers parisiens ou leur pays natal. Mais d’autres prolongent leur séjour en Bretagne et s’y installent. Ces impressionnistes de Pont-Aven ont pour nom Henry Moret (1856-1913), Maxime Maufra (1861-1918), Ferdinand Loyen du Puigaudeau (1864-1930), Gustave Loiseau (1865-1935).\nHenry Moret s’installe à Doëllan. Sa palette flamboyante illumine les bords de mer. Sa toile de « Goulphar à Belle-Île » (1895) est saisissante par la beauté du point de vue, l’éclat et la luminosité des couleurs : bleu et vert émeraude pour la mer, roses et mauves pour les rochers, pointes d’orangé et de jaune pour les herbes sauvages. Le tout servi par une touche pleine de vivacité et de mouvement !\nÉtabli à Kerhostin, Maxime Maufra adopte une touche large et généreuse, une gamme de couleurs tout en nuances pour recréer la côte sauvage à Quiberon, suggérer les vagues et les remous, le ruissellement de l’écume sur les rochers. À Pont-Aven, Gustave Loiseau s’attache à faire vibrer les couleurs. Sa touche est plus resserrée. Quant à Ferdinand du Puigaudeau il excelle dans les scènes nocturnes déclinées dans toutes les teintes du crépuscule.\nCes quatre artistes ont su adapter leur palette à la lumière bretonne, entre ciel, terre et mer, veillant à être au plus près de leur motif pour mieux posséder leur sujet. A l’époque, leur talent ne passe pas inaperçu : Paul Durand-Ruel, le marchand de Monet, leur offre les cimaises de sa galerie et signe un contrat d‘exclusivité avec eux. Des artistes très appréciés des collectionneurs anglo-saxons du début du XXe siècle. Terre d’inspiration, la Bretagne est alors au cœur des grandes mutations artistiques du moment !\ndu 29 juin 2019 au 5 janvier 2020.\nEn octobre ouverture du mardi au dimanche de 10h à 18h\nNovembre et décembre, ouverture du mardi au dimanche de 14h à 17h30\n7Jours N°4984 – août 2019\nArticle précédent Valérie COTTEREAU, Présidente – Fondatrice d’Artefacto Article suivant TRANSITION DES AGRICULTURES EN BRETAGNE\nDans la même catégorie Art & Culture


L'histoire de la salle - Centre de yoga Lyon Jean Macé\nNaissance de la salle, il y a plus de 15 ans\nDepuis ma rencontre avec le yoga, au début des années 1990, celui-ci a pris une place de plus en plus importante dans ma vie, jusqu’à devenir en 2003 ma profession principale, en parallèle avec la naturopathie.\nEn 2005, j’ai ouvert ma salle de yoga au 13 rue Camille Roy : le yoga est intégré dans ma vie, il la nourrit, il est un support solide dans les moments difficiles. L’enseigner est un vrai bonheur.\nDepuis la rentrée 2016, cette salle est “habitée” par un groupe de professeurs et c’est pour moi une grande joie de la partager avec eux pour co-animer ce Centre de Yoga Lyon Jean Macé.\nCréatrice de la salle et gestionnaire jusqu’à l’été 2019\nLa transmission dans la continuité\nAprès quelques années à expérimenter la pratique du yoga, d’abord à titre personnel, puis en tant qu’enseignant, je souhaite désormais m’impliquer dans la transmission de ce qui m’a été enseigné. Je suis heureux de poursuivre, avec le soutien d’Odette et de toute l’équipe, la vocation de ce centre.\nAtelier "Trouver le lâcher-prise dans la pratique du yoga" par Adeline\nAtelier "Aller vers une action juste" par Adeline\nAteliers "Sophrologie et lâcher prise - partie 2" par Nadine\nAtelier-journée Yoga et initiation massage Tuina\nAtelier "Mémoire et yoga" par Adeline


Météo Tomelopitos Heure par Heure - Prévisions Meteo Aujourd'hui - M6 météo\nActuellement: Météo Tomelopitos\nMétéo Tomelopitos Ville (36840) , Mexique\nMétéo heure par heure aujourd'hui et demain à Tomelopitos\nQuel temps fait-il aujourd'hui et demain à Tomelopitos, Mexique ? Faudra-t-il prendre votre parapluie dans les prochaines heures ? Nos prévisions météo heure par heure détaillées pour Tomelopitos pour tout savoir jusqu'à 48 heures à l'avance.\nLa probabilité d'une chute de pluie ou de neige est donnée heure par heure ainsi que la force du vent et la température ressentie. Déployez les prévisions de demain pour Tomelopitos en cliquant sur la date.\nPrévisions météo Tomelopitos à 15 jours et ce week-end\nRecevez la météo de Tomelopitos par e-mail chaque matin !\nVilles à proximité de Tomelopitos


Le gouvernement du Canada offre un report d'impôt aux producteurs de bétail du Manitoba dont les terres sont affectées par l'humidité excessive\n11 juil. 2011 12h14 HE\nOTTAWA, ONTARIO--(Marketwire - 11 juillet 2011) - Le gouvernement du Canada annonce aujourd'hui qu'il offrira des reports d'impôt aux producteurs de bétail des régions désignées du Manitoba dont les activités ont été ralenties par l'humidité excessive. Cette aide arrive au moment où les gouvernements ne ménagent pas leurs efforts pour analyser l'incidence de l'humidité excessive afin de déterminer quelles sont les autres mesures d'aide nécessaires.\n« Le printemps 2011 a été très difficile pour nos agriculteurs en raison des ravages causés par le débordement du lac Manitoba et du lac Shoal, a affirmé le ministre de l'Agriculture, M. Gerry Ritz. L'allégement fiscal offert par ce programme permettra aux propriétaires d'animaux d'élevage d'utiliser ces économies pour repeupler leurs troupeaux au printemps. »\nCe report d'impôt permettra aux éleveurs admissibles des zones désignées de reporter d'un an l'impôt à payer sur les ventes d'animaux reproducteurs. Les éleveurs auront ainsi la chance de repeupler leurs troupeaux reproducteurs au cours de l'année suivante. Les recettes des ventes reportées figureront parmi les revenus de l'année d'imposition suivante, où il se peut qu'elles soient au moins effacées en partie par le coût d'une nouvelle acquisition d'animaux reproducteurs. Dans le cas d'années consécutives de désignation, les producteurs pourront reporter les revenus tirés de leurs ventes à la première année où la zone qu'ils occupent ne sera plus désignée.\nPour qu'un producteur puisse reporter son revenu, il faut que son troupeau reproducteur ait été réduit d'au moins 15 p. 100. Si c'est le cas, il peut reporter 30 p. 100 du revenu tiré des ventes nettes. Dans les cas où le troupeau a été réduit de plus de 30 p. 100, le producteur peut reporter 90 p. 100 du revenu tiré des ventes nettes.\nLes éleveurs admissibles pourront demander ce report lorsqu'ils rempliront leur déclaration de revenus 2011. Ils sont invités à communiquer avec l'Agence du revenu du Canada à l'adresse http://www.cra-arc.gc.ca/cntct/phn-fra.html pour connaître les détails des dispositions de l'impôt sur le revenu.\nEn plus des reports d'impôt, les actuels programmes fédéraux-provinciaux de gestion des risques de l'entreprise, comme Agri-protection (assurance-récolte), Agri-stabilité et Agri-investissement, viennent en aide aux agriculteurs en cas d'inondation.\nPour en savoir davantage sur l'ampleur des ravages causés par l'humidité excessive ou les programmes d'aide aux agriculteurs, ou pour obtenir la liste complète des régions désignées par le Programme de report d'impôt 2011, on peut consulter le site Guetter la sécheresse d'AAC à l'adresse http://www4.agr.gc.ca/AAFC-AAC/display-afficher.do?id=1256658312655&lang=fra.\nRégions visées par le report d'impôt 2011 pour les producteurs de bétail\nIl s'agit d'une désignation initiale; nous procéderons à d'autres analyses pour déterminer si d'autres régions seront ajoutées plus tard dans la saison.\nRM 115 COLDWELL\nRM 118 DAUPHIN\nRM 125 ERIKSDALE\nRM 130 GLENELLA\nRM 140 LAKEVIEW\nRM 143 LAWRENCE\nRM 147 MCCREARY\nRM 154 MOSSEY RIVER\nRM 158 OCHRE RIVER\nRM 163 PORTAGE LA PRAIRIE\nRM 178 ST. LAURENT\nRM 179 STE. ROSE\nRM 185 SIGLUNES\nRM 200 WESTBOURNE\nRM 206 WOODLANDS\nRM 601 ALONSA\nRM 606 GRAHAMDALE\nDIVISION N°18, TERRITOIRE NON ORGANISÉ, PARTIE EST\nDIVISION N° 18, TERRITOIRE NON ORGANISÉ, PARTIE OUEST\nDIVISION N°19, TERRITOIRE NON ORGANISÉ


Communiqué de The Business Shop du 05 décembre 2016\nnovembre 17, 2018, 11:32:34 pm\nAuteur Sujet: Communiqué de The Business Shop du 05 décembre 2016 (Lu 1072 fois)\n« le: décembre 05, 2016, 08:47:10 pm »\nVoilà des nouvelles après une période de silence assez longue !\nDu blabla évidemment, le soucis premier est bien que The Business Shop était un Ponzi.\nInutile de cherche ailleurs !\nIls reviennent sur la diffusion de de leur fausse banque.\nIls font la comédie en disant qu'il ne fallait pas diffuser le lien.\nIls devaient savoir que tout le monde allait souhaiter voir ce qu'il y avait dedans !\nEt évidemment, les analystes ont fait leur œuvre pour décoder cette fausse banque.\nNous savons et nous comprenons que vous voulez et exigez plus d'informations, des dates tangibles, etc.\nCependant, selon les conseils de notre service juridique, nous ne communiquerons rien tant que nous n'aurons pas concrètement publié. C'est pour le bien de nos membres et de la Société.\nDans notre dernier communiqué, nous avons demandé de NE PAS publier le lien de banque, peu importe si certains d'entre vous l'ont fait.\nQuand nous demandons quelque chose, c'est parce qu'il ya une raison légitime et nous ne le faisons pas sur un coup de tête!\nBeaucoup diront: "mais je ne l'ai pas fait".\nPourquoi devrions-nous tous faire face aux conséquences des actions déraisonnables de quelques-uns?\nPeu importe combien de personnes l'ont fait. Il ne prend qu'une personne. Le simple fait de ne pas avoir suivi cette règle a entraîné des complications. Nous cherchons à aller de l'avant et non à reculer et à consacrer du temps à des activités sans valeur ajoutée.\nNous sommes conscients de vos commentaires positifs et négatifs. Les discussions sur les réseaux sociaux sont intenses et dramatiques. Notre équipe travaille 24 heures sur 24 pour achever le premier grand pilier vers une nouvelle phase et ne se reposera pas tant qu'elle ne sera pas terminée.\nNous demandons donc à notre équipe une approche d'attention totalement engagée et centrée sur cet objectif et ils ne peuvent pas être distraits pour gérer l'opinion personnelle de chacun.\nNous remercions ceux qui continuent à croire en nous et à nous soutenir dans ces temps difficiles et qui deviennent automatiquement des cibles pour ceux qui ont déjà jeté dans la serviette.\nIl est difficile de convaincre chacun d'aller de l'avant avec courage.\nCette fois, il vaut la peine d'être optimiste.\nDevrions-nous laisser l'incertitude nous prendre un jour de plus?\nNous avons tous des problèmes, vous qui lisez, vous gardez l'espoir que tout fonctionnera de nouveau. C'est pourquoi vous lisez cette version.\nSi nous sommes tous sur le même chemin, pourquoi ne pas renforcer ce qui a déjà été construit?\nNous vous invitons à construire ensemble une attitude forte envers l'unité et laisser le temps combler l'écart.\nSoyez assuré que tous les efforts visent à obtenir que tous ceux qui sont impliqués dans ce processus atteignent des résultats positifs.\nPersonne ne peut nier que, malgré l'adversité et parfois de longs silences pour protéger les intérêts communs, nous sommes toujours ici ..\nLa meilleure attitude est d'attendre avec conviction et sérénité, cela semble difficile, mais une fois que tout cela est derrière nous, nous allons raconter toute une histoire différente.


Demain, Dimanche soir séance ciel profond\nEspace virtuel club astronomie URANIA :: Urania31 :: Le coin du club :: Sorties d'observation Partagez |\nSujet: Demain, Dimanche soir séance ciel profond Sam 18 Nov 2017 - 21:03\nOu ça : http://urania.forumactif.fr/t878-coordonnees-saveres\nCette nuit et celle d'hier me sont passées sous le nez.\nDemain je suis disponible\nSi quelqu'un souhaite profiter du ciel à Savères vous pouvez me rejoindre.\nJe serais sur place au plus tard 20h.\nJe peux fournir une prise 220V, il suffit d'emmener une rallonge.\nSujet: Re: Demain, Dimanche soir séance ciel profond Dim 19 Nov 2017 - 9:39\nLe brouillard est comment à Savères ? Sur la région Toulousaine il s'est levé à peu près toutes ces dernières nuits\nSujet: Re: Demain, Dimanche soir séance ciel profond Dim 19 Nov 2017 - 13:46\nPlus que tu montes mieux c'est. Seysses 175m, Savères 255m, Lautignac plus de 300m. Parfois en revenant de Savères j'entre dans le brouillard de la vallée. Lautignac c'est c'est encore mieux que Savères. Depuis les hauteurs de Lautignac en voie toute la vallée dans la brume.\nEn tout cas l'humidité est terrible, le matos dégouline. Après, c'est le séchage qui est pénible.\nJe tente, je verrais. La 1° partie ça devrait aller, s'il se mets à geler, ça aide aussi.\nPS, Seysses ce matin était clair.\nDernière édition par Siegfried le Dim 19 Nov 2017 - 15:39, édité 1 fois\nSujet: Re: Demain, Dimanche soir séance ciel profond Dim 19 Nov 2017 - 16:38\nJe passe ce soir. On tente.\nJ'essayerais M33, une petite galaxie très peu connue et très peu photographiée ... en tous les cas par moi !\nSujet: Re: Demain, Dimanche soir séance ciel profond Dim 19 Nov 2017 - 16:58\nOk je suis entrain de partir\nSujet: Re: Demain, Dimanche soir séance ciel profond Dim 19 Nov 2017 - 20:28\nM33... cette nébuleuse mythique du côté du Triangle ? Elle a été plus que rarement observée, au point qu'on n'est pas vraiment certain de son existence à vrai dire\nSujet: Re: Demain, Dimanche soir séance ciel profond Lun 20 Nov 2017 - 8:51\nEn tous les cas, c'est dans la boite.\nJ'ai observé une petite tâchouille à peine perceptible qu'il faudra analyser pour savoir enfin si M33 n'est qu'un mythe ou une réalité.\nA voir le résultat. Car l'autoguidage m'a fait des choses vraiment bizarre sur le DEC. Ça fait plusieurs fois que j'ai des sauts en DEC assez important. Faut que je trouve d'où ça vient.\nA noter que je me suis pelé comme rarement Heureusement que Siegfried m'a préparé une infusion pour ne pas finir congelé.\nSujet: Re: Demain, Dimanche soir séance ciel profond Lun 20 Nov 2017 - 18:20\nOui il à fait une humidité terrible ça donne vraiment froid. J'ai commencé à isoler (isolation thermique ) le poste de contrôle.\nJe sens vraiment la différence, une nuit sans les dents qui claquent.\nLa partie de la nuit pendant laquelle Fred engrangeai des photons de M33 était gâte pour moi. Dommage pour NGC253, je pense cet année sera difficile de la reprendre. C'est la dernière version Indi sous Linux qui me fait des misères.\nLa 2° partie de la nuit j'ai basculé sous Windows pour un max de poses pour IC434.\nQuand ça marche, c'est vraiment génial.\nD'ailleurs j'ai testé avec NGC253 à 16° et c'est encore passé. Avant je n'arrivais pas à tirer des choses sympa en dessous de 18°.\nSujet: Re: Demain, Dimanche soir séance ciel profond Lun 20 Nov 2017 - 21:05\nMa M33 traitée vite fait ici :\nSujet: Re: Demain, Dimanche soir séance ciel profond Lun 20 Nov 2017 - 21:41\nIC434 ? Une nouvelle nébuleuse qu'on ne voit pas souvent ??\nNon j'arrête de dire des konneries, ne faites pas attention\nSiegfried, tu as fini M1 ? Je prévois toujours d'y coller le spectro, pour mesurer sa vitesse d’expansion.\nSujet: Re: Demain, Dimanche soir séance ciel profond


Re: Énigmes et Devinettes Publié le : Ven 14 Jan 2011 - 13:47\nJ'avoue, j'ai été mauvaise sur ce coup-là.\nOn dit aussi : √-1 = i, " la racine carrée de -1 est égale au nombre i ", non valable avec les nombres réels où une racine d'un nombre négatif est impossible.\nCeci dit, c'est du niveau de première, non ? Ou alors de terminale S... Désolée\n1er ) Vinou - 3 pt\n2nd ) Killy - 1 pt\n*) Edofanart - 1pt\n*) Edward Smith - 1pt\n*) Le_Hamster - 1pt\nDernière édition par Hamtaro le Sam 31 Aoû 2013 - 8:57, édité 1 fois\nRe: Énigmes et Devinettes Publié le : Ven 14 Jan 2011 - 16:14\nJe ne sais pas te dire de quel niveau scolaire c'est mais en tout cas c'est sûr qu'il faut un bagage particulier pour la comprendre (les blagues pseudo-matheuses du genre de "logarithme ne paie rien" etc y a pas besoin d'avoir fait maths sup pour les comprendre mais là il faut avoir vu les nombres imaginaires).\nLe forum étant basé sur les fanfictions on a sans doute plus de littéraires que de matheux par déduction (sans généraliser, hein) donc ce n'est pas très amusant de faire des devinettes "sectaires", quoi :/ Mais bon c'est pas grave, hein ^^ mais essayons de faire des énigmes à la portée de tout le monde, des faciles ou des difficiles, mais sans notions spécifiques que tout le monde n'a pas forcément histoire que tout les membres aient une chance ou au moins comprennent la solution\nJe relance avec une très classique, j'aime bien la p'tite fourberie de la réponse, personnellement xD (mais elle est facile ^^) :\nUn mec marche sur une route de campagne. On ne voit ni la lune, ni les étoiles. Le mec n'a ni lampe de poche, ni réflecteur et porte des vêtements sombres. Une voiture arrive à pleine vitesse derrière lui, phares éteints. Elle se dirige droit sur le type qui marche au beau milieu de la route.\nCe dernier ne fait rien pour attirer l'attention du conducteur et continue à marcher calmement. Le conducteur a pourtant réussi à voir le pauvre gars et s'arrêter à temps pour qu'il ne serve pas de nouveau revêtement de route...\nRhôôô mais comment ça s'fait, ça, pinaise ?\nRe: Énigmes et Devinettes Publié le : Ven 14 Jan 2011 - 16:42\nAlors oui, pensez un peu à ceux qui n'ont pas eu la chance de pouvoir pousser les études, c'est quand même plus sympa de laisser une chance à tous.\nVinou, je pense simplement que le conducteur à vu le mec parce qu'il fait jour\nRe: Énigmes et Devinettes Publié le : Ven 14 Jan 2011 - 16:55\nBen ce n'est même pas une question de ne pas avoir poussé d'études, la blague sur i² il faut avoir fait des études de maths ou un peu matheuses pour la piger donc même un mec avec bac +10 si il a fait une branche littéraire ou sciences po par exemple il ne la comprendra pas\nVouiiiii pour la réponse ! J'l'aime bien elle est fourbe xD\n2nd ) Edofanart - 2pt\n3ème ) Killy - 1 pt\n* ) Edward Smith - 1pt\nRe: Énigmes et Devinettes Publié le : Sam 15 Jan 2011 - 14:53\nu_u Les doigts dans le nez\nJe continue dans les simples, j'suis pas une matheuse moi...\nRe: Énigmes et Devinettes Publié le : Dim 16 Jan 2011 - 2:28\nHum... Un nom de famille?\nRe: Énigmes et Devinettes Publié le : Dim 16 Jan 2011 - 2:42\nJe dirai bien que oui, mais est-ce qu'une femme divorcée peut reprendre son nom de jeune fille ? Je veux dire, c'est obligatoire ou c'est un choix ?\nEt puis, son nom de jeune fille, c'est quand même un nom de famille, donc elle ne peut pas le perdre même si elle divorce...\nOu alors j'interprête mal la question.\nRe: Énigmes et Devinettes Publié le : Dim 16 Jan 2011 - 4:31\nYes Edward Smith ! C'est bien ça, le nom ^^\n* ) Edward Smith - 2pt\n@Le-Hamster, oui, une femme divorcer peut reprendre son nom de jeune fille, c'est un choix, pas une obligation. Et oui, une femme qui se marie peut aussi garder son nom de jeune fille, mais c'est plutôt rare.\nA toi, Mister Smith\nRe: Énigmes et Devinettes Publié le : Dim 16 Jan 2011 - 4:42\nJe voudrai vous parler du docteur Durand. Ce pauvre homme exerce sa profession depuis plus de quarante ans, et il a soigné, approximativement, cinq milles patients. Cependant, aucun d'entre eux ne l'a jamais remercié, ni même adressé la parole, malgré leur guérison. Mais pourquoi donc?\nRe: Énigmes et Devinettes Publié le : Dim 16 Jan 2011 - 4:43\nJe dirais que c'est parce qu'il est vétérinaire, mais les animaux remercient à leur façon....\nRe: Énigmes et Devinettes Publié le : Dim 16 Jan 2011 - 4:55\nPourtant c'est la bonne réponse, même si je comprends tout à fait ce que tu veux dire. Je ne suis aps à proprement parler l'auteur de cette énigme, mais c'est la première qui m'est venue à l'esprit, je suis navré...\n* ) Edofanart - 3pt\n2nd ) Edward Smith - 2pt\nRe: Énigmes et Devinettes Publié le : Dim 16 Jan 2011 - 5:06\nBah, moi non plus je ne suis pas l'auteur des devinettes ^^\nEt puis, on peut toujours trouver un truc à redire de toute façon x)\nRe: Énigmes et Devinettes Publié le : Dim 16 Jan 2011 - 5:24\nHello Edo ^^ Tu as survécue à ma tentative d'assassinat ?\nPour répondre à la devinette, je dirai qu'il s'agit d'une langue.\nRe: Énigmes et Devinettes Publié le : Dim 16 Jan 2011 - 5:29\nOui, je suis encore là !(c'est que je suis coriace moi ! è_é)\nBen... C'est pas drôle, vos trouvez tout de suite ! xD\n1er ) Vinou - 3 pts\n* ) Edofanart - 3pts\n2nd ) Edward Smith - 2pts\n*) Kin Yu - 1pt\nRe: Énigmes et Devinettes Publié le : Dim 16 Jan 2011 - 5:46\nChouette ! Allez, je ne suis pas méchante, je vais en trouver une facile...\nJe voyage dans le monde entier, mais je reste toujours dans mon coin.\nRe: Énigmes et Devinettes Publié le : Dim 16 Jan 2011 - 7:18\nOh ! Moi je sais ! C'est un timbre ^^\nRe: Énigmes et Devinettes Publié le : Dim 16 Jan 2011 - 10:51\nBravo Hamtaro, c'est ça ^^\n*) Le_Hamster - 2pts\nRe: Énigmes et Devinettes Publié le : Lun 17 Jan 2011 - 12:08\nAllez, une fastoche !\nRe: Énigmes et Devinettes Publié le : Lun 17 Jan 2011 - 12:53\nRien n'est mieux que Dieu, rien n'est pire que le diable. Les pauvres n'ont rien, les riches n'ont besoin de rien. Si on ne mange rien on meurt. Je choisis donc "Rien".\nRe: Énigmes et Devinettes Publié le : Mer 19 Jan 2011 - 1:51\nTu as raison, à toi !\n* ) Edward Smith - 3pts\n2nd ) Le_Hamster - 2pts\nRe: Énigmes et Devinettes Publié le : Lun 24 Jan 2011 - 9:03\nAfin de permettre à tous de s'amuser, le joueur qui doit relancer la partie aura une semaine pour le faire. Si ce n'est pas le cas, un modérateur lui enverra un rappel par MP et relancera le jeu ou passera la main à un autre membre, sans réponse du gagnant dans un délai de 48h.\nJe vais donc de ce pas relancer Edward Smith\nRe: Énigmes et Devinettes Publié le : Ven 28 Jan 2011 - 11:05\nPardonnez moi pour cette absence... Me voilà pour une nouvelle énigme:\nAttention, cette énigme pourrait figurer dans une blague Carambar.\nDes mineurs doivent se rendre à leur lieu de travail. Pour se faire, ils se voient obligés de passer à travers un champs, lui causant force dommages. L'agriculteur, un homme certes bon mais qui a tendance à ne pas vraiment aimé le saccage de son propre labeur, décide lassé de marqué par un panneau indicateur bien visible l'interdiction de couper à travers son champs, et les somme de faire un détour par la forêt située juste à côté. Précisons donc que l'homme ne fait de mal à personne avec ce procédé. Seulement voilà: le lendemain, des policiers frappent à sa porte et arrêtent le pauvre bougre. Quel est donc le motif de l'arrestation?\nRe: Énigmes et Devinettes Publié le : Ven 28 Jan 2011 - 11:30\nIl y a un ravin dans la forêt, et les mineurs sont tombés dedans et se sont tués sur le coup, donc l'agriculteur a commis un homicide involontaire en les obligeant à passer par-là et c'est pour ça que les policiers viennent l'arrêter.\nCeci étant dit... ça ne ressemble pas à un truc Carambar... donc j'ai certainement faux\nRe: Énigmes et Devinettes Publié le : Ven 28 Jan 2011 - 12:11\nLa forêt est une propriété privée ?\nOu alors le mec a un champs d'herbes illicites xD\nRe: Énigmes et Devinettes Publié le : Ven 28 Jan 2011 - 12:34\nMalheureusement vous n'avez pas la bonne réponse même si je ne peux que louer votre originalité. Je vous donne un indice: la réponse est un jeu de mots.


Le guide des établissements d’hébergement pour personnes âgées disponible gratuitement\nPar Pmoreau dans Entreprises le 18 février 2010\nBlueKanGo est une société qui propose une solution globale Web qui couvre tous les processus généraux des entreprises et administrations\nBlueKanGo met gratuitement à disposition le guide EHPAD (Etablissements d’Hébergement pour Personnes Agées) : des solutions simples et innovantes pour conduire une démarche Qualité et Gestion des risques\nLa société BlueKanGo, spécialiste de l’optimisation des processus Qualité, réglementaires et environnementaux, poursuit le renforcement de son offre dans le secteur de la santé, et plus particulièrement à destination des Etablissements d’Hébergement pour Personnes Agées Dépendantes (EHPAD).\nLe Guide spécial EHPAD est ainsi à télécharger gratuitement sur le site Web BlueKanGo dédié aux EHPAD : http://www.ehpad.bluekango.com/services/prestations-techniques/133-guide-ehpad-demarche-qualite.html\nCadre des EHPAD et conjoncture sociétal :\nLes EHPAD sont confrontés au quotidien aux difficultés liées à la prise en charge des personnes âgées. Le cadre juridique des EHPAD est précis et réglementé, notamment par l’existence d’une convention tripartite signée pour cinq ans entre l’EHPAD, le Conseil Général et l’autorité compétente pour arrêter le tarif soins. Un cahier des charges a été défini à partir duquel un outil d’autoévaluation a été élaboré, le manuel ANGELIQUE, qui sert de référentiel pour la qualité des prestations fournies. A l’heure actuelle, la qualité des procédures de soins est bien prise en compte par les EHPAD. Mais qu’en est-il de la qualité des prestations sociales et humaines ? En effet, selon le dernier sondage 2009 de la Fédération Hospitalière de France, les Français sont 61 % à avoir une opinion négative sur la prise en charge des personnes âgées en France, notamment en maisons de retraite.\nBlueKanGo et Blue Médi EHPAD, une solution informatique ad hoc à la gestion de la Qualité et des risques :\nBlueKanGo compte aujourd’hui plus de 600 établissements de santé clients parmi lesquels un certain nombre d’EHPAD. De part cette expertise avérée et éprouvée, BlueKanGo a décidé de réaliser un Guide EHPAD 2010. Disponible en deux volets, il aborde :\n- la conduite d’une démarche Qualité et Gestion des risques en EHPAD : contexte interne au sein d’un EHPAD, la conduite d’une démarche Qualité et de Gestion des risques, et les bénéficies d’une gestion de la Qualité et des Risques réussies\n- les solutions que BlueKanGo peut apporter dans ce contexte, notamment Blue Médi EHPAD, solution informatique clé en main adaptée aux problématiques des EHPAD.\nBlue Médi EHPAD, solution informatique clé en main :\nBlue Médi EHPAD est un intranet / extranet intégré et transversal qui permet aux maisons de retraite de maîtriser l’ensemble de leur système Qualité Hygiène Sécurité en impliquant leurs acteurs, qu’ils soient internes, distants ou externes (membres d’un réseau ou d’un groupement, familles, instances, tutelles, …). Il optimise leur démarche d’autoévaluation (ANGELIQUE, EVA, PATHOS, …) en leur offrant des outils de pilotage et d’analyse souples et performants. Il s’agit d’une application full Web, sans coût de licence au poste ou à l’utilisateur. Elle est accessible par un simple navigateur ne nécessitant aucune installation sur les postes. La solution se présente sous la forme d’une interface individualisée par utilisateur. Chaque utilisateur bénéficie sur son interface d’un ensemble d’outils et d’une vision personnalisée du système préétabli par les utilisateurs «administrateurs».\nLe guide EHPAD est donc téléchargeable dès maintenant et gratuitement depuis le lien suivant : http://www.ehpad.bluekango.com/services/prestations-techniques/133-guide-ehpad-demarche-qualite.html\nA propos de BlueKanGo :\nNée en 1998, BlueKanGo est une société française basée à Rennes. BlueKanGo, est l’unique société à proposer une solution globale Web qui couvre tous les processus généraux des entreprises et administrations. Lors de sa création, BlueKanGo, anciennement QSMS jusqu’en 2008, s’est positionnée comme une entreprise de conseil dans le secteur de la santé.\nDès 2003, BlueKanGo a évolué vers le métier d’éditeur de solutions BPM, en mode Software As A Service (SaaS). BlueKanGo propose des abonnements et des conseils pour l’utilisation de ses outils logiciels par le biais de l’OpenSource, du SaaS et du Full Web. Ses solutions sont à la fois logicielles et matérielles.\nBlueKanGo commercialise son offre auprès des moyens et des grands comptes mais également auprès des PME et des administrations. Aujourd’hui, BlueKanGo est présent dans les secteurs de la santé, de l’agroalimentaire, de l’industrie, du service…\nAvec plus d’une soixantaine de collaborateurs, une croissance à deux chiffres chaque année et un chiffre d’affaires de 5 millions d’euros en 2008, BlueKanGo a pour objectif d’accélérer son développement en terme de clientèle et d’effectifs sur le marché français.\nSite Internet Santé : http://www.sante.bluekango.com/\nSite Internet Ehpad : http://www.ehpad.bluekango.com/\nPauline Moreau/ Tatiana Graffeuil\nTél. 01 41 11 37 77 / 37 89\n02 23 20 14 80\nUn commentaire à “Le guide des établissements d’hébergement pour personnes âgées disponible gratuitement” - Cliquez-ici pour commenter.\nclaire le 29 sept 2011\tï¿½ 9:21\nBonjour, je souhaite recevoir le guide des ehpad car je travaille sur un projet de création, je vous remercie de bien vouloir m’indiquer les modalités pour obtenir ce guide.\nBien cordialement, Claire Fourteau\n« Creation entreprise : Vous créez ? Gagnez 1500€ en participant à un concours Ambiance et bonne bouffe: week-end Colonie de Vacances pour adultes célibataires »


Message par Fabien » 04 mars 2016, 13:17\nQuand j'étais petit, j'étais un garçon très calme et le premier de ma classe. C'est pourquoi à force de cumuler des bons points et des images, la maitresse a fini par m'acheter un livre et pas n'importe quel livre ! Un livre dont vous êtes le héros ! Qu'est-ce qu'elle n'a pas fait la malheureuse !? Et me voilà depuis accro et à rechercher d'autres livres dont vous êtes le héros puis j'ai découvert les jeux de rôles et commencé avec les plus grands/vieux/moisis/nostalgiques des jeux de l'époque (Oeil Noir, Donjon et dragon, etc). En //, bien sûr, j'ai testé d'autres jeux tous plus bizarres les uns que les autres.\nMon lieu de résidence : Maroué\nMes passions : les jeux (rôles/video/plateau/cartes...), le cinéma, la lecture, l'informatique, les bds (mangas en particulier), le volley-ball (mais je ne peux plus en faire), les arts martiaux (en ce moment le taijiquan)\nMon métier / Mes études : Animateur multimédia à la MJC de Lamballe et à la cyber-base de la communauté de communes. Sinon j'ai aussi fait un DEUG Sciences de la matière Chimie Physique, une licence d'histoire, un titre professionnel d'analyste programmeur et un BPJEPS (cherchez l'erreur)\nMa Ludothèque : Essentiellement du Jeu de rôles (ADD2, DD3, DD4, Pathfinder, Warhammer 1&2, INS/MV 1&2&3&4&5, L'appel de cthulhu 6, Praetoria prima, Pavillon noir, Qin, Yggdrasil, L5A, Devastra, Oikoumene, Warsaw, Zcorp, Chroniques oubliées, Shadowrun 2&4, Subabysses, Starwars, Anima, Bloodlust 1&2, Keltia, Fate, le Trône de fer, Leagues of adventures, Sable rouge, Polaris, JRTM, Rolemaster, Bimbos, 7ème mer, sables brûlants, Exalted, Vampire la mascarade, Tenga, Patient 13, Dawnforge, Terres de légendes)\nSinon en jeux de plateau et autres jeux de société, j'ai: Munckin & ses dérivés, Magic, Descent, Heroquest, Starcraft, World of warcraft, Civilisation, Doom et plein d'autres jeux longs et prises de tête ^^ (j'aime bien ce qui prend la tête)\nMes jeux préférés : les gros jeux et les jeux de rôles\nMon niveau de Game: Expert en jeux de rôles, Initié en jeux de société\nMon profil de joueur : "je ne perds jamais" ^^\nComment j'ai connu l'association : Je bosse à côté\nPensez vous participer aux soirées jeux : Voui, voui, voui\nPensez-vous vous investir dans l'association : "J'aimerai bien mais je peux point" en tout cas pas les samedi. Mais autrement je suis partant\nMessage par ChifouJulie » 04 mars 2016, 18:13\noooh la maîtresse et les livres, vraiment, elles ont un problème ^^\nMessage par chifouronan » 05 mars 2016, 10:48\nImagines si la maitresse t'aurais donner un livre sur Mitterrand, tu serais devenu président.


Mercedes Classe C 220 d 194ch AMG Line 9G-Tronic Euro6d-T rouge neuf à Saint-grégoire (35 Ile-et-Villaine) - n°4026062 - Annonces Automobile\nMercedes Classe C 220 d 194ch AMG Line 9G-Tronic Euro6d-T rouge\nMise à jour hier - N°4026062\nFinition 220 d 194ch AMG Line 9G-Tronic Euro6d-T Garantie -\nPuis. DIN 194 ch (143 kW) Référence ZAS_1280632_17601659\nCette annonce de Mercedes Classe C est proposée par MERCEDES RENNES DELOURMEL\nCette voiture est proposée par MERCEDES RENNES DELOURMEL situé à Saint-grégoire (à proximité de Rennes) dans le département Ile-et-Villaine (35). Vous pouvez visualiser le listing de véhicule du professionnel MERCEDES RENNES DELOURMEL en passant sur sa vitrine.\nCette Mercedes Classe C 220 d 194ch AMG Line 9G-Tronic Euro6d-T en occasion est mise en vente par le professionnel MERCEDES RENNES DELOURMEL dans la commune de saint-grégoire dans le département Ile-et-Villaine (35).\nL'auto Berline dispose d'une première immatriculation le 07/2018 et affiche aujourd'hui 20 kilomètres à son tableau de bord. Elle est proposée pour un montant s'élevant à 61990 euros TTC.\nLes principales particularités de cette voiture Mercedes Classe C 220 d 194ch AMG Line 9G-Tronic Euro6d-T sont indiquées ci-après :\ncouleur Rouge, 2 portes, energie Diesel, transmission Automatique, puissance fiscale de 10 cv, puissance réelle de 194 ch, 20 km.\nVous pouvez contacter le vendeur de cette annonce de Berline pour obtenir plus d'éclaircissements et pour un achat de automobile futur.\n03/2018, 10.980 Km\n03/2017, 8.990 Km\n10/2014, 96.386 Km\nBonjour, La Mercedes Classe C 220 d 194ch AMG Line 9G-Tronic Euro6d-T au prix de 61990€ sur le site Annonces Automobile m'intéresse. Merci de me contacter pour avoir plus d'information.\nMercedes Classe C occasion à Saint-grégoire


Audiences radio: La bonne rentrée d'Europe 1 - Come4News\nAudiences radio: La bonne rentrée d’Europe 1\nPosted by Krusty Mas | 21, Nov, 2008 | Ciné, Musique, Médias, TV\nLes audiences radio ont été publiées : RTL reste leader, mais Europe 1 gagne 280 000 auditeurs.\nLe nombre d'auditeurs baisse. Avec près de 42 millions d'auditeurs quotidiens en semaine, le média radio est en recul par rapport aux trois dernières rentrées. 300 000 auditeurs manquent à l'appel par rapport à l'année dernière.\nLe podium reste inchangé. Avec 6,27 millions d'auditeurs quotidiens, RTL reste un leader incontesté, même si la station de la rue Bayard retrouve son niveau de la rentrée 2006. Derrière, NRJ reste la musicale la plus écoutée de France, avec 5,35 millions d'auditeurs, mais cet auditoire a chuté de 433 000 paires d'oreilles sur un an. France Inter suit avec 5,24 millions d'auditeurs, en légère hausse.\nEurope 1 signe la plus forte progression. 4,88 millions d'auditeurs, soit 280 000 de plus qu'il y a un an : pas de doute, la station de la rue François-Ier a réussi sa rentrée. Elle signe ainsi la plus forte progression toutes radios confondues. Le virage éditorial effectué cet été sous l'impulsion du nouveau patron de la station, Alexandre Bompard, a donc porté ses fruits. Au classement, Europe 1 est quatrième.\nPreviousPHOTO : j’ai testé pour vous le NIKON D60\nNextEuropeana : La Bibliothèque Européenne entre pornographie et plantages\nRetour à Ithaque, le film de Laurent Cantet\nLes enfants et les dangers de la télévision.\nANDREA\tsur 21 novembre 2008 à 17 h 53 min\nMerci Louis 33000,\nPour ces informations. Personnellement j’aime beaucoup NRJ.\nAmicalement. Andréa et bien sûr un vote super.\neleina\tsur 21 novembre 2008 à 19 h 11 min\nje suis Andréa\nPour ma part je suis sur RTF dès les yeux ouverts pour les premières informations. France musique toute la journée. Depuis que je suis revenue au pays je néglige Europe 1 alors que lorsque j’étais à Marseille je l’écoutais toute la journée. Merci pour cet article qui nous\napporte une chose à laquelle l’on ne pense pas.


4% immobilier : habiter barembach acheter appartement 5190\nBAREMBACH EXCLUSIVITE 4% IMMOBILIER DE SCHIRMECK !!! Situé au 1er étage d'un petit immeuble de 6 logements bâti en 2005, bel appartement de type F3, d'une surface habitable d'environ 76,20 m². Il se compose d'une entrée, d'un spacieux et lumineux salon-séjour avec accès terrasse, d'une cuisine équipée US, d'un WC séparé, d'une salle de bain équipée avec baignoire et vasque/meuble, de 2 belles chambres. En annexes, d'un garage double de 33 m² et d'une place de parking. Copropriété de 18 lots dont 6 appartements. Charges annuelles : 1 1243,80 € (dont l'eau, l'entretien de la VMC, l'électricité, l'assurance et l'entretien des parties communes, les honoraires de syndic). Pas de litige en cours.\n161 200 € HAI *\nConsomation énergetique 156\nTaxe foncière 606\nAppartement 2 pièces+parking+balcon\nMutzig hyper centre f2 de comprenant séjour avec cuisine ouverte semie équipée, une chambre, une salle de bains. Chauffage individuel électrique, petite copropriété de 5 appartements. loyer 470€ + 20€ de charges Frais d'agence 261,6€...\nMaison Wittelsheim 4 pièce(s) 73 m2\nLUTZELHOUSE EXCLUSIVITE 4% IMMOBILIER DE SCHIRMECK !!! Proche de toutes les commodités (écoles, commerces, médecins, axes routiers,...), gros potentiel pour cette maison individuelle d'une surface habitable d'environ 110 m² sur un terrain...


Payer comptant va devenir beaucoup plus difficile - Belgique - LeVif.be\n14/01/12 à 09:24 - Mise à jour à 09:24\nUn commerçant ne pourra bientôt plus accepter d'argent comptant s'il vend des marchandises pour plus de 5.000 euros.\nAujourd'hui, cette limite se situe à 15.000 euros. Le gouvernement veut en outre élargir cette réglementation au paiement des services. C'est ce que rapportent samedi les journaux De Standaard, Het Nieuwsblad et De Morgen.\nDans l'accord de gouvernement, il est en effet prévu de réduire considérablement la limite au-dessus de laquelle on ne peut pas payer en cash. L'objectif est de dresser une barrière pour empêcher le blanchiment d'argent, mais également la fraude fiscale. Tout ce qui n'est pas payé en espèces laisse une trace...\nLa limite pour les paiements en cash sera réduite encore cette année à 5.000 euros. C'est ce qui ressort de la note de politique du secrétaire d'Etat à la Lutte contre la fraude, John Crombez (sp.a), rédigée sur la base de l'accord de gouvernement. M. Crombez présentera sa note la semaine prochaine devant le parlement.\nL'idée est d'aller encore plus loin en 2014, en rabaissant le montant maximum à 3.000 euros. Par ailleurs, l'interdiction de payer en espèces sera étendue aux "prestations de services".


Mardi 08 février 2022 à 11:28 - par Emilie FLORES\nMargaux, plus grande gagnante de l'émission N'oubliez pas les paroles adore les tatouages. Elle vient d'ajouter un nouveau dessin à sa longue liste de tatouages. Découvrez-le.\nUne passion que certains ignoraient peut-être encore. Margaux, l'une des championnes emblématiques de N'oubliez pas les paroles, est une véritable fan de tatouages ! Sur le plateau de l'émission, les téléspectateurs ne pouvaient pas se douter que la jeune femme possédait de nombreux dessins et phrases écrites sur le corps. Pourtant, Margaux en a plusieurs et c'est à travers une photo d'elle en maillot de bain qu'elle avait dévoilé quelques-uns de ses dessins. Il y a quelques heures, la plus grande gagnante de l'émission de Nagui semble avoir voulu faire une nouvelle folie en ajoutant un nouveau tatouage à sa longue liste. Sur son compte Instagram, elle dévoile le résultat qui est magnifique.\nCette fois-ci, Margaux a décidé de faire un dessin un peu plus grand pour représenter son "amour pour nos amis les chats". "Cat lover", légende-t-elle sur Instagram, dévoilant une vidéo de son tatouage qui représente la moitié d'un visage d'un chat. Un dessin qui semble combler Margaux et l'ensemble de ses fans. "J'adore", "Magnifique tatouage", "Il est magnifique", "Vraiment joli"… peut-on lire en commentaire. Ce tatouage a-t-il été douloureux ? Margaux affirme que "non", après avoir été questionné par l'un de ses followers dans les commentaires.\nMargaux bientôt en tournée dans toute la France\nCela fait maintenant deux ans que Margaux a gagné pour la première fois son premier duel dans l'émission N'oubliez pas les paroles, et elle ne s'attendait pas à devenir quelques mois plus tard la plus grande gagnante du jeu de karaoké. Il y a quelques mois, Margaux n'a pas réussi à briller sur France 2 lors des Masters 2021, face aux autres champions. Elle est ainsi éliminée en quart de finale face à Hervé ; une véritable déception. Mais que les fans se rassurent, ils pourront prochainement la voir sur scène, avec ses tatouages, lors de la tournée N'oubliez pas les paroles se donne en spectacle qui débutera le 9 avril prochain à Aurillac (15) pour s'achever le 29 mai à L'Olympia de Paris.


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