2014 - Pagina 12 di 14 - Grüne - Verdi - Vërc\nHome2014 (Page 12)\nAssistenza a non autosufficienti: garanzie a lungo termine\nL’assegno di cura, in tedesco “Pflegeversicherung, è regolato dalla Legge provinciale 12 ottobre 2007, n. 9, ”Interventi per l’assistenza alle persone non autosufficienti”. Questa legge compie 7 anni e occorre trarre un bilancio della sua efficacia, dei suoi effetti e dei risultati che ha dato.\nRicordiamo che la legge riconosceva ad ogni persona non autosufficiente il diritto a ricevere un “assegno di cura” impostato sul principio del “Budget personale”. Il finanziamento era assicurato con un fondo alimentato dal bilancio provinciale e venivano fissati criteri per stabilire il grado di bisogno di cura della singola persona. Variabili importanti, nel tempo, sarebbero stati lo sviluppo demografico (progressivo invecchiamento della popolazione), le scelte delle persone interessate, i costi dei servizi, l’evoluzione a medio-lungo termine del fondo di garanzia.\nAbbiamo ormai alle spalle almeno 5 anni di prassi di questa legge, abbiamo verificato il funzionamento dei 4 livelli di cura, l’efficacia della cura a casa (da familiari o con assistenza domiciliare) o del ricovero in case di cura o di riposo (dove si registra una diminuzione delle persone al 3° e 4° livello e crescenti difficoltà finanziarie delle strutture), abbiamo sperimentato diversi modelli tariffari dei servizi.\nVi sono stati già in questi 5 anni sensibili cambiamenti: nei criteri di determinazione del bisogno di cura, nelle modalità di accoglienza nelle strutture e nel loro finanziamento, nel tipo di diritto che viene di conseguenza riconosciuto, nella tendenza crescente all’assistenza a casa.\nD’altra parte, il previsto “fondo di garanzia” non è stato istituito e in certi casi – come nel 2013 – si è dovuto ricorrere a riserve del bilancio provinciale per far fronte a difficoltà di finanziamento dell’assegno di cura.\nLa stessa legge prevede il puntuale aggiornamento del piano decennale. Ma per lavorare a questo aggiornamento bisogna sapere con precisione quanto denaro è stato speso, in che modo, con quali finalità e con quali risultati. A sette anni dalla legge e dopo cinque anni di sua concreta applicazione è arrivato il momento di fare questo bilancio, evitando di continuare ad apportare aggiustamenti parziali e di corto respiro senza un criterio di lungo periodo.\nTutto ciò considerato, il Consiglio Provinciale impegna la Giunta Provinciale\na predisporre una valutazione attenta dei risultati dei cinque anni di applicazione della legge sull’assegno di cura e a presentare al Consiglio provinciale, entro sei mesi dall’approvazione della presente mozione, un rapporto completo nel quale si approfondiscano i diversi aspetti del problema, in modo da rispondere in ogni caso alle seguenti domande:\nL’assegno di cura ha raggiunto l’obbiettivo che l’assistenza a casa si svolga in modo durevole in una forma qualitativamente alta e senza sovraccarico per le famiglie, per i familiari della persona assistita e in particolare per le donne della famiglia?\nCome avviene nella pratica l’assunzione privata di personale di sostegno (es. le/i cosiddette/i badanti)? E’ diffuso il lavoro nero e come si è evoluto il fenomeno nel tempo: si è ridotto, è aumentato?\nEsistono sufficienti offerte da parte dell’ente pubblico di possibilità di “alleggerimento” e sostegno per i familiari della persona assistita? Se sì, quali e quale efficacia hanno dimostrato?\nL’ammontare dell’assegno di cura è sufficiente per coprire le necessità?\n5. Le tariffe dei servizi sono adeguate?\nLe modifiche apportate ai criteri per la valutazione del bisogno di cura sono state tecnicamente e professionalmente giustificate oppure hanno portato ulteriori ingiustificate difficoltä alle persone interessate?\nIl ritiro dell’assegno di cura in caso di ricovero in casa di riposo e la sua sostituzione con un finanziamento forfettario del servizio ha portato a un ingiustificato indebolimento del diritto delle persone interessate?\nQuali conseguenze ha avuto quanto sopra citato nel finanziamento nel caso di cura in altre strutture?\nQuali conseguenze ha avuto sul finanziamento a medio e lungo periodo del fondo per la cura (Pflegefonds)?\nL’assegno di cura è garantito nel medio e lungo periodo considerando che il previsto “fondo di garanzia” non è stato mai istituito?\nQuali misure e quali correttivi sono da prendere, per fare in modo che venga garantito nel medio e lungo periodo il sistema dell’assistenza alle persone non autosufficienti, così come previsto nella legge nr. 9/2007?\nFirmato cons. provinciali\nBolzano, 10 febbraio 2014\nNetta maggioranza per il NO!\nPrendiamo atto con soddisfazione del risultato del referendum sulla legge sulla partecipazione popolare targata SVP.\nAbbiamo contrastato fin da subito questa legge in quanto avrebbe reso la partecipazione popolare una vera corsa ad ostacoli rendendo di fatto impossibile l’esercizio della democrazia diretta.\nIl 65% dei partecipanti al voto ieri si è espresso contro la legge, ponendo quindi le basi perché la discussione sulla partecipazione possa finalmente iniziare. Confermiamo, anche per il futuro, il nostro impegno affinché possa essere concretizzato il desiderio di maggior partecipazione espresso con forza dai cittadini.\nAll’iniziativa per più democrazia diretta va il nostro ringraziamento per il costante impegno in questa causa.\nCo-Portavoce Provinciali Verdi Grüne Vërc\nTar di Bolzano: prevedere pubblici concorsi per almeno la metà dei/delle magistrati/e\nDa tempo si invoca un governo dell’Autonomia improntato ai criteri di trasparenza, separazione dei poteri e prevalenza della professionalità sulla nomina puramente politica. La nuova Giunta provinciale ha annunciato di voler adottare un “nuovo stile politico” ispirato agli stessi principi. Se così è, occorre subito cominciare a correggere le più eclatanti storture nelle istituzioni dell’Autonomia.\nUna di esse – venuta recentemente alla ribalta – è quella della modalità di nomina dei e delle giudici del Tar di Bolzano. Come noto, essi/e sono tutti/e di nomina politica: 4 da parte del Governo (con l’intesa con il Consiglio provinciale sui due di lingua tedesca) e 4 da parte del Consiglio provinciale. Ciò è stabilito dall’articolo 2 della relativa Norma di Attuazione (Decreto del Presidente della Repubblica 6 aprile 1984, nr. 426).\nLa nomina politica della totalità dei/delle giudici del Tar di Bolzano è un’eccezione nell’intero ordinamento della Repubblica italiana, dove si diventa giudice con concorso, ed ha fatto parlare spesso di “giustizia domestica”. E’ una di quelle norme che indebolisce l’immagine del nostro sistema autonomistico agli occhi della popolazione e danneggia anche le persone nominate, che si ritrovano spesso al centro di spiacevoli polemiche, anche quando si tratta di persone assolutamente meritevoli di ricoprire quel ruolo.\nIl sistema di totale nomina politica del Tar di Bolzano non trova eguali neppure nella vicina Provincia di Trento, che pure con noi condivide la stessa Norma di Attuazione.\nLo stesso Decreto del Presidente della Repubblica 6 aprile 1984, nr. 426, infatti, all’articolo 1 regola le nomine per il Tribunale di Giustizia amministrativa con sede a Trento. A questo sono assegnati 6 magistrati, ma solo due di questi sono quelli designati dal Consiglio provinciale di Trento, mentre gli altri 4 sono magistrati di carriera. Di più: la Norma stabilisce anche che il collegio giudicante sia composto di 3 magistrati e di questi solo uno sia scelto tra quelli di nomina politica. “Le funzioni di presidente – aggiunge la norma trentina – sono svolte in ogni caso da un magistrato di carriera”.\nVa aggiunto inoltre che il fatto che invece a Bolzano tutti/e gli/le otto magistrati/e del Tar\nsiano di totale nomina politica non sembra neppure coerente con quanto previsto dallo stesso Statuto di Autonomia.\nL’articolo 91 dello Statuto infatti così recita:\nI componenti della Sezione per la provincia di Bolzano di cui all’articolo 90 del presente Statuto devono appartenere in egual numero ai due maggiori gruppi linguistici.\nSi succedono quali Presidenti della sezione per uguale periodo di tempo un giudice di lingua italiana ed un giudice di lingua tedesca assegnati al collegio.\nIl Presidente è nominato tra i magistrati di carriera che compongono il collegio, con decreto del Presidente della Repubblica su proposta del Presidente del consiglio dei Ministri.\nPoiché dunque lo Statuto prevede che “Il Presidente è nominato tra i magistrati di carriera che compongono il collegio”, è evidente che debbano esistere anche nel Tar di Bolzano magistrati non di nomina politica ma di carriera, altrimenti questa previsione statutaria è inapplicabile (ed in effetti non si è mai potuta realizzare).\nNel clima di riforme con cui si è aperta la presente Legislatura, occorre dare immediatamente un segnale di rinnovamento e mettere subito rimedio a questa evidente anomalia. Lo si può fare anche a Statuto invariato, semplicemente con una nuova Norma di Attuazione che riformi quella del 1984, prevedendo che – fermo restando la previsione statutaria per cui la metà dei/delle magistrati/e viene nominata dal Consiglio provinciale – almeno l’altra metà dei/delle componenti del Tar di Bolzano siano scelti/e attraverso pubblico concorso, da disciplinare con la stessa Norma di Attuazione.\nil Consiglio della Provincia autonoma di Bolzano invita la Commissione dei Sei\nad adeguare la procedura di nomina dei giudici amministrativi del Tar di Bolzano ai principi democratici e universali di separazione dei poteri e di trasparenza attraverso una riforma della relativa Norma di Attuazione (Decreto del Presidente della Repubblica 6 aprile 1984, nr. 426), prevedendo che i/le quattro magistrati/e non designati/e dal Consiglio provinciale siano nominati/e in base a concorso pubblico locale, da disciplinare con la stessa Norma di Attuazione.\nBolzano, 7 febbraio 2014\nItalicum: Lettera delle Donne Verdi ai/alle deputati/e e senatori del Sudtirolo\nGentili deputate/i e senatori dell’Alto Adige/Südtirol,\ncon la presente, Vi chiediamo di dichiarare la Vostra posizione riguardo alle seguenti due modifiche alla bozza di legge “Italicum”, proposte dalla campagna “50/50 – se non è paritaria non è democrazia” e volte a garantire la presenza paritaria di donne e uomini nelle liste elettorali:\nl’alternanza di candidate/i 1 a 1, quindi candidata donna e poi uomo, (oppure candidato uomo e poi donna) alternandosi in tutta la lista. La bozza di legge arrivata in aula prevede invece di alternare 2 a 2 le/i candidate/i per genere, col rischio che due uomini occupino le prime posizioni in lista.\nl’alternanza delle/dei capolista nei collegi plurinominali, 50% donne e 50% uomini.\nimplicazioni della bozza di legge per il Trentino-Alto Adige. Cosa intende fare per la parità di genere nei collegi uninominali e nei seggi assegnati coi resti nella nostra regione?\nRingraziamo sin d’ora per la Sua risposta e La informiamo che renderemo pubblica la Sua risposta (o non risposta).\nCon l’auspicio di una legge elettorale migliore per tutte e tutti,\nle Donne Verdi\nInformazioni: Evelyn Gruber-Fischnaller, Brigitte Foppa\nLa campagna: www.senonoraquando.eu/?p=14358\nGoverno regionale: trattative scandalose\nIn questi giorni assistiamo allibiti alle trattative per la formazione della Giunta regionale. Il punto cruciale, è ormai chiaro a tutti, si chiama Roberto Bizzo. Per quanto importante possa essere una sistemazione soddisfacente per il Vicepresidente del Consiglio provinciale all’interno della coalizione di governo, facciamo notare che il destino di un solo politico non può bloccare in questo modo scandaloso la formazione di una giunta.\nIl Consiglio regionale è bloccato, la discussione politica sta degenerando e l‘opinione pubblica scrolla le spalle e si distanzia sempre piú da questa cultura politica che dovrebbe appartenere al passato, così come troppe volte annunciato.\nIl diabattito deprimente sulle quote di genere poi non è un dettaglio, ma un aspetto importante di tutta la vicenda. Così come viene trasmesso, sembra quasi che il rispetto delle quote rosa sia un peso ingombrate da rifilare ai vari partner piú deboli. Che la presenza di una (1) assessora nel governo possa essere vista come un arricchimento della squadra non passa nemmeno per l‘anticamera del cervello di chi al momento detiene il potere.\nChiediamo ai partner di governo di chiudere al più presto queste trattative deprimenti e indegne e di presentare finalmente una squadra di governo degna di questo nome, che rispetti le aspettative di cittadini e cittadine.\nConsiglieri regionali Verdi Grüne Verc\nBolzano Bozen, 6.2.2014\nSolidarietá con On.le Laura Boldrini\n1. Febbraio 2014\nGiorgio Zanvettor e Brigitte Foppa nuovi portavoce\nL’assemblea provinciale dei Verdi-Grüne-Verc del 01 febbraio 2014 ha eletto Brigitte Foppa (82% dei voti) e Giorgio Zanvettor (75% dei voti) come nuovi portavoce provinciali.\nPer questo compito, oltre ai due eletti, si erano candidati anche Marialaura Lorenzini, Andreas Unterkircher e Martin Mahlknecht.\nL’assemblea ha ringraziato Riccardo Dello Sbarba per il prezioso lavoro svolto come portavoce ad interim durante le primarie e la campagna elettorale. Un caloroso ringraziamento è andato anche a Hubert Sparer per il suo accurato servizio svolto in questi anni in qualità di tesoriere. Alla nuova tesoriera, Erica Fassa, vanno i migliori auguri di buon lavoro.\nDopo l’elezione, la mattinata è proseguita con una discussione tematica con Florian Kronbichler, Francesco Palermo, Katherina Longariva, Stephan Lausch e i nuovi portavoce Brigitte Foppa e Giorgio Zanvettor su “Nuova democrazia – nuova autonomia”.\nCongratulazioni al nostro nuovo e alla nostra nuova portavoce e in bocca al lupo a entrambi!\nQui sono a disposizione i curricula di Brigitte Foppa e Giorgio Zanvettor.\nQui si possono scaricare i discorsi di Brigitte Foppa e Giorgio Zanvettor in occasione dell’assemblea provinciale.\nE alcune foto dell’assemblea:\nQui trovi ulteriori foto, gentilmente ricevute da Hubert Gasser: foto assemblea provinciale\nEnergia: procedura d’infrazione UE 2011/2026\nConcessioni idroelettriche: Procedura d’infrazione UE 2011/2026 – Governo e Provincia hanno risposto?\nCon lettera del 26.09.2013 il Commissario europeo per il Mercato Interno Michel Banner ha inviato al ministro italiano Emma Bonino l’avviso della procedura di infrazione nr. 2011/2026 (“Normativa italiana in materia di concessioni idroelettriche – Costituzione in mora complementare”) riguardante norme di proroga o proroghe di fatto di grandi concessioni idroelettriche sia sul territorio italiano sia su quello della Provincia autonoma di Bolzano. Oggetto della procedura di infrazione europea sono infatti sia leggi nazionali sia leggi provinciali:\nIl Decreto legge 22.6.12 nr. 83, “Misure urgenti per la crescita del paese”, il cosiddetto “Decreti Monti”.\nLa Legge provinciale nr. 4 del 1998 della Provincia di Trento.\nLa Legge provinciale nr. 7 del 2006, articolo 19 bis (introdotto dalla LP nr. 122/2010) della Provincia di Bolzano.\nTutte queste normative, secondo la Commissione Europea, hanno l’effetto di prorogare “automaticamente” concessioni idroelettriche ormai scadute (ad esempio le concessioni Hydros di Brunico, Visse, Marlengo), senza alcuna gara, e questo contrasta diverse norme europee sovra ordinate, tra cui l’articolo 12 della direttiva 2006/123/CE che vieta rinnovi automatici di qualsiasi autorizzazione per una determinata attività, oppure l’articolo 49 del Trattato sul Funzionamento dell’Unione Europea sul “diritto alla libertà di stabilimento” compreso il diritto a partecipare senza subire alcuna discriminazione a gare o rinnovi di concessioni come quelle idroelettriche.\nIl Commissario Barnier dava all’Italia, e attraverso l’Italia anche alle province di Bolzano e Trento, due mesi di tempo per rispondere a questa notifica.\nI due mesi sono scaduti il 26 novembre 2013, ma non si ha notizia delle risposte che sono state date.\nRisulta che la Repubblica italiana abbia risposto alla citata procedura di infrazione europea?\nSe sì, quando e con quali argomentazioni? Si richiede gentilmente la trasmissione del documento o dei documenti con cui la risposta è stata redatta.\nLa Provincia di Bolzano è stata consultata sulla vicenda? Se sì, ha trasmesso al Governo italiano e/o all’Unione Europea una sua risposta, o un qualsiasi documento o argomentazione che riguardi la procedura di infrazione citata o comunque le circostanze e le norme oggetto di tale procedura? Si richiede gentilmente la trasmissione del documento o dei documenti con cui la risposta o l’argomentazione della Provincia è stata redatta.\nA che punto è la procedura di infrazione? Vi sono stati altri passi formali, da parte dei soggetti coinvolti (governo italiano e province autonome)? Se sì, quali e quando, e con quali esiti? Si richiede gentilmente la trasmissione della documentazione esistente al proposito.\nA che punto è la procedura di infrazione?\nItaliano News Non categorizzato\n30. Gennaio 2014\nAssemblea provinciale: Nuovi portavoce. Neue Demokratie – neue Autonomie.\nTi invitiamo alla prima Assemblea Provinciale del 2014 per l’elezione dei nuovi portavoce!\nL’assemblea si svolgerà sabato, 01 febbraio 2014 dalle 10.00 alle 13:00 nella Sala 2 della Casa Kolping a Bolzano, Via Adolph‐Kolping 3.\n1. Apertura dei lavori\n2. Elezione dei nuovi portavoce dei Verdi Grüne Vërc\n3. Discussione “Nuova Democrazia – nuova Autonomia” con Francesco Palermo (Senatore PD‐SVP), Florian Kronbichler (Deputato SEL‐Verdi), Stephan Lausch (iniziativa per più democrazia), Katherina Longariva (Rete per la Partecipazione) e i nuovi portavoce dei Verdi\n4. Eventuali mozioni (*)\n(*) Mozioni redatte in entrambe le lingue possono essere presentate entro venerdì, 31 gennaio 2014, ore 12.\nRicordiamo che possono partecipare al voto solo gli/le iscritti/e al partito. È possibile iscriversi o rinnovare l’iscrizione dalle 9.00 alle 9.45.\nPortavoce provinciale Verdi Grüne Vërc


Lettera aperta al Sindaco Adriano Palozzi su: “Sedi dei Comitati di quartiere”. | Notizie in Controluce\nLettera aperta al Sindaco Adriano Palozzi su: “Sedi dei Comitati di quartiere”.\nPur rendendoci conto dell’intensa attività che viene prodigata a tutti i livelli in questa settimana che precede la Sagra dell’uva, vorremmo porre l’attenzione sul fatto che ottobre ospita la Sagra e preannuncia quella la lunga stagione che termina nell’inverno. Una seconda considerazione riguarda i Comitati di Quartiere che nascono come punti di socializzazione e di partecipazione dei cittadini ai propri problemi locali e quindi all’andamento dei servizi essenziali gestiti direttamente o meno dall’amministrazione comunale oltre che da Società. Essendo queste le finalità, risulta chiaro che occorre attrezzare i Comitati con strutture che possono assicurare, anche nella stagione invernale, l’esercizio di queste attività di ritrovo, di svago e di approfondimento locale.\nUna terza considerazione riguarda il Comitato di quartiere di Cava di peperino. E’ a tutti noto che quel piccolo nucleo di abitazioni, nato negli anni cinquanta per iniziativa comunale, oggi rappresenta un quartiere modello per la operosità e lungimiranza dei residenti, che con il loro lavoro hanno dotato la nostra città di uno spazio verde, degno del nome di Parco.\nPur non conoscendo “origine e accordi” che, in primavera, hanno portato questo Comitato a dotarsi di una capiente tettoia in legno, prendiamo atto che da qualche mese i lavori di tamponatura sono stati bloccati. Se il manufatto si trova su terreno pubblico ed è destinato ad accogliere l’attività e le iniziative dei residenti del quartiere, privo però di qualsiasi locale di ritrovo, è possibile, al pari di quanto verificato sia nella villa comunale che nel giardino “Spigarelli” di Santa Maria delle mole, che non si trovi una modalità che renda funzionale quanto iniziato, coronando lavoro e soldi ad oggi utilizzati?\nPer esempio nel 1974, il “gruppo MarinoVerde”, per eliminare il parcheggio selvaggio attorno alla Fontana dei Mori, in piazza Matteotti, e quello sul sito del vecchio Monumento ai Caduti (di fronte alla ex Banca di Marino oggi BPM), decise e propose di operare, con soldi e mezzi raccolti tra i cittadini, per costruire le due aiuole ancora esistenti. L’allora sindaco Dante Rapo ci sfidò a presentare un progetto, e così fu fatto.\nCrediamo possibile che, al pari dei Centri diurni per gli Anziani, una Amministrazione possa decidere di dotare i Comitati di quartiere di luoghi di ritrovo. L’invito è quello di trovare la via per dare a tutti i Comitati un luogo ove operare senza interruzioni dovute alla pioggia o al gelo, ne va della crescita civica ed etica della cittadinanza, specie ora che per legge vengono meno le Circoscrizioni amministrative.\nRestiamo comunque disponibili a dare il nostro contributo.\nil portavoce del “gruppo di presenza” : corrado colizza\nInattività del Parco dei Castelli Romani\nLa faziosità del cerchio magico di Grottaferrata


costo dello spray antizanzare per acro di terra-JOBY\nCasa > costo dello spray antizanzare per acro di terra\nSpray antizanzare: avete visto quanto costano? - Idee Green- costo dello spray antizanzare per acro di terra ,Jun 08, 2015·Per un flaconcino da 100 ml di spray antizanzare (potete riutilizzare il contenitore di un profumo esaurito) servono 15 grammi di alcol (un bilancino elettronico è sempre utile per queste cose), 85 grammi di acqua demineralizzata e 60 gocce di olio essenziale (o di più oli, sempre 60 gocce). La preparazione consiste nell’unire gli elementi ...dmso per cavalli - ItsanitasUn singolo cavallo ha bisogno della libertà offerta da un minimo 1/10 acro di terra. Molti cavalli che ricevono fienile cura la maggior parte del beneficio giorno da un piccolo pezzo di terra dove si può entrare aria fresca. I cavalli con accesso a superficie limitata dovrebbero essere montati più spesso per la loro salute generale.\nacro in English - Italian-English Dictionary | Glosbe\nAcquistò la terra a $2,50 per acro nel 1763 da Joseph Chinn, un cugino di George Washington. He purchased the land for Middleburg at $2.50 per acre in 1763 from Joseph Chinn, a …\nQuanto costa un acro nel Regno Unito? - Enciclopedia di ...\nOggi, un acro di terreno agricolo nel Regno Unito ha un valore compreso tra £ 12,000 e £ 15,000. Il prezzo di solito varia a seconda della posizione di...\nfuori dai fari gialli dello spray per insetti come si è ...\nAmbiente di produzione. Partner collaboratore. RASSEGNA STAMPA DETTI E SCRITTI 6 OTTOBRE 2020 - Detti e ...- fuori dai fari gialli dello spray per insetti come si è visto in tv ,Il tempo, qui, si eternizza – quel fluire incessante in me e fuori di me – e, per un istante, tutto si fa immobile tace come prima dello stormire del vento fra i rami le gocce di pioggia sempre più fitte la ...\nImpatto dei fattori socio-economici sull'agricoltura\n2. Dimensioni delle aziende e frammentazione dei campi: Non è solo la locazione della terra e il sistema di proprietà che influenzano i modelli agricoli e di coltivazione, le dimensioni delle aziende e la frammentazione dei campi hanno anche un rapporto stretto con i modelli di utilizzo della terra agricola e le rese per unità di superficie.\n48 Migliore trappola per mosche nel 2021 Basato su 4635 ...\nApr 03, 2021·Lampada Antizanzare EfficaceDotata di una lampada UV da 20W ad alta intensità, il zanzare elettrico attira efficacemente gli insetti; Per migliorare l’effetto, vi consigliamo di posizionare l’assassino ad un’altezza di 20cm-100cm per garantire che la …\nLuoghi d’interesse | Il Sognatore Pazzo - WordPress\nJun 21, 2021·Prima di partire, i miei compagni di trekking si cospargono di spray antizanzare, mentre io preferisco proteggermi con la crema solare. Meglio punto che ustionato, mi dico. Ma Federica ci rassicura confermando che gran parte del cammino sarà all’ombra. Non ci …\nNamibia on the road: come pianificare ... - I Viaggi di Fois\nMar 10, 2020·Per un itinerario di 15 giorni, in lodge luxury e camping molto basic, noleggio di una 4×4 tendata, per 2 pax, nel periodo di agosto, siamo più o meno intorno ai 3200,00 euro a persona. Su una base di 4 pax il prezzo si riduce in quanto la spesa dell’auto (che incide notevolmente sul costo totale del viaggio) è dimezzata .\nArchivi Progetti - Pagina 2 di 10 - Guide del Pennato\nAug 02, 2021·Spray antizanzare/zecche. ... Per scendere a terra la barca dispone di un tender da 6 posti. A bordo una fornita cucina con griglia consente di preparare ottimi piatti di mare e di terra. ... del paese dominato dalla mole del Castello di San Giorgio fino alla Bellavista dove si possono scorgere le isole di Elba e Pianosa. Cala dello Zurletto un ...\nservizio di spray antizanzare per i cantieri nei piani ...\n- Idee GreenPer un flaconcino da 100 ml di spray antizanzare (potete riutilizzare il contenitore di un profumo esaurito) servono 15 grammi di alcol (un bilancino elettronico è sempre utile per queste cose), 85 grammi di acqua demineralizzata e 60 gocce di olio essenziale (o di più oli, sempre 60 gocce).\nSono interessato all’agricoltura. Quindi, ha deciso di ...\nSono interessato all’agricoltura. Quindi, ha deciso di acquistare terreni agricoli. Ma nella mia località (Coimbatore, Tamil Nadu), 1 acro di terra costa quasi 50L. Non sono ricco a comprare la terra di quel costo. Qual è un’alternativa per perseguire il mio interesse per l’agricoltura?\nQuanto costa affittare un acro di terreno agricolo a Delhi ...\nDipende dal tipo di terreno che la terra è irrigata o meno se è poi la fonte d’acqua (tubo, pozzo, canale, fiume o stagno). Non vengo da Delhi, ma sarà circa 10.000 ¬ per acro per terra ben irrigata e 3 – 7 mila per terra parzialmente irrigata.\nper：formulazione della trappola per zanzare usandoprossimo：miglior spray per zanzare in Malesia 2019 prezzo\nzanzariera rama 10 e 30 pollici\nbobina di zanzara acquisto online india\nbobina di zanzara falco ghana 2017 2018\nvorrei uno spray antizanzare per una casa\ncodice hs di pulitore per zanzariera in vendita\naci spray antizanzare prezzo bd novità oggi 2019\nbobina di zanzara figlia nera con bambino bianco\nzanzariera un'azienda importatrice in california\nzanzara coil of africa company in sedi di miami\nspray antizanzare prezzo bd novità 2019\nbobina di zanzara senza maschera antifumo\nbobina di zanzara mortein in borsa bd\nzanzariera in bd 2020 2021\nspray antizanzare in testa di tacchino per stagni\nfabbrica di bobine di zanzara sri lanka prezzo rs\nolio di cera profumato all'incenso di zanzara\nla bobina di zanzara dà segni e sintomi di cancro\nporta zanzariera canada in vendita a buon mercato


Measurement of In Vitro Integration Activity of HIV-1 Preintegration Complexes | Protocol (Translated to Italian)\nproteine HIV-1 busta impegnano recettori cognate sulla superficie delle cellule bersaglio, che porta a fusione della membrana virale delle cellule seguita dal rilascio del nucleo capside virale (CA) nel citoplasma. Successivamente, il virale trascrittasi inversa (RT), come parte di un complesso omonimo nucleoproteina definito il trascrizione inversa Complex (RTC), converte il virale genoma RNA a singolo filamento in una copia di DNA a doppio filamento (vDNA). Questo porta alla biogenesi di un altro complesso nucleoproteina, chiamato il complesso di pre-integrazione (PIC), composto dal vDNA e proteine del virus associati e fattori dell'ospite. L'integrasi virale PIC-associato (IN) orchestra l'integrazione della vDNA nel DNA cromosomico host in un processo in due fasi temporalmente e spazialmente regolamentato. Innanzitutto, l'IN elabora estremità 3 'della vDNA nel citoplasma e, dall'altro, dopo il PIC traffici al nucleo, essa media integrazione del vDNA trasformata nel DNA cromosomico. I PIC isolatida cellule bersaglio con infezione acuta da HIV-1 sono funzionali in vitro, in quanto sono competenti per integrare il vDNA associato in un DNA bersaglio eterologo esogena aggiunto. Tale PIC-based nei test di integrazione in vitro hanno contribuito in modo significativo a delineare i dettagli meccanicistici di integrazione retrovirale e alla scoperta IN inibitori. In questo rapporto, elaboriamo su un test HIV-1 PIC aggiornato che si avvale di un annidato in tempo reale Polymerase Chain Reaction quantitativa (qPCR) strategia basata su per misurare l'attività in vitro integrazione di isolati PIC nativi.\nReplicazione dell'HIV-1 nella cella di destinazione prevede più passaggi, in linea di massima raggruppati in due fasi: eventi precoci e tardive. Gli eventi precoci iniziano quando HIV-1 in sequenza si lega alla superficie del recettore cellula bersaglio CD4 e una delle due co-recettori (CCR5 o CXCR4) 1. Di conseguenza, le membrane fusibile virus-cellula, e il capside virale (CA) nucleo viene rilasciato nel citoplasma 2. Il nucleo CA contiene il genomico RNA virale a singolo filamento (ssRNA) e diverse proteine, sia virali e cellulare in origine. Le proteine virali CA-associati includono trascrittasi inversa (RT) e integrasi (IN), due enzimi che mediano passaggi critici durante eventi precoci nella replicazione virale. La RT ed in funzione nel contesto di complessi nucleoproteina, cioè la trascrizione inversa Complex (RTC) e il complesso di pre-integrazione (PIC), rispettivamente 3, 4, 5 <sup>, 6. Le estremità del virale ssRNA genoma porto terminale di ripetizione (R) elementi adiacenti alla unica sequenze U5 (al 5 ') e U3 (al 3'). Il RTC converte il genoma virale ssRNA in un (ds) copia di DNA a doppia elica (vDNA). Questo processo di trascrizione inversa provoca anche la duplicazione delle U5 e U3 sequenze, generando così ripetizioni terminali lunghe (LTR) ad entrambe le estremità del vDNA 7, 8. Successivamente, il IN PIC-associata catalizza due reazioni biochimiche sequenziali che consentono l'integrazione del vDNA nel cromosoma ospite 9, 10, 11. Innanzitutto, nel citoplasma, IN multimeri coinvolgere sia LTR 12 e fendere un dinucleotide da ciascuna delle estremità 3'-terminali. Questa elaborazione 3'-end genera un gruppo ossidrilico ad ogni 3'-end (CA OH) del vDNA.Avanti, PIC traffici al nucleo, in cui IN utilizza il vDNA CA OH come nucleofilo per tagliare entrambi i filamenti di DNA cromosomico in modo sfalsato. Contemporaneamente, IN giunzioni coordinatamente due estremità del vDNA ai legami fosfodiestere risultanti sui filamenti opposti del DNA cromosomico. A seguito di questa fase di trasferimento filone, il macchinario cellula ospite rimuove i due nucleotidi spaiati alle estremità 5 'del vDNA e riparazioni le conseguenti lacune singolo filamento allo svincolo del sito di integrazione. I primi eventi culminano quindi con la creazione di una copia di DNA integrato (provirus) del virus HIV-1 genoma. Il provirus fornisce un ambiente adatto per l'espressione genica virale efficiente, che avvia eventi successivi, compreso l'espressione delle proteine virali codificate; assemblaggio del virus immaturo; e in erba, il rilascio e la maturazione in virioni infettivi 13.\nPurificata ricombinante retrovirale IN è competente aeffettuare, in vitro, sia attività di trasformazione e di trasferimento filo 3'-end in modo esogeno forniti LTR-come il DNA substrato. Studi biochimici utilizzando tali ricombinante purificata hanno rivelato aspetti critici vDNA integrazione 14, 15, 16, 17. Tuttavia, a differenza di infezione naturale, questa reazione biochimica in vitro non supporta l'integrazione concertata di entrambe le estremità del DNA substrato nel DNA bersaglio. Al contrario, i PIC retrovirali isolate da cellule con infezione acuta concertata integrano entrambe le estremità della vDNA endogena nel DNA bersaglio eterologo. Ciò ha portato alla diffusa adozione e le successive raffinatezze di saggi in vitro Integration (IVI) I n usando isolati PIC nativi.\nNel primo saggio riportato retrovirale IVI, estratti citoplasmatici di cellule infettate con un murino ricombinanteLeukemia Virus (MLV) ospitare il gene E. coli supF nella sua LTR servito come fonte di attività IN, e il DNA di fago lambda mutante difettoso in crescita litico fu esogenamente forniti come il DNA bersaglio. Successful integrazione del ricombinante MLV DNA copia nel DNA fagico e l'espressione conseguente supF portato al ripristino della capacità di formazione di placca dei fagi ricombinanti. Tuttavia, questa strategia sperimentale è laboriosa e misure di integrazione in maniera indiretta. Per far fronte a tali avvertimenti, un test indiretto end-etichettatura Southern Blot-based, che quantifica l'attività IVI PIC-associata come misura della vDNA endogena integrato in esogeni batteriofago linearizzato phiX174 DNA, è stato sviluppato 6, 7, 18. Anche se questo metodo fornisce una misura diretta di eventi di integrazione, sono necessarie quantità relativamente elevate di preparazione PIC, che rimane tecnicamente difficilesforzo. Per aggirare questo, sono stati sviluppati test basati sulla PCR nested che richiedono solo modeste quantità di PIC 4, 5, 19.\nIn questo rapporto, descriviamo una versione aggiornata di un nested PCR-based metodo in vitro ideato per ricapitolare l'attività di integrazione di HIV-1 PIC-mediata che si verificano durante l'infezione naturale. Questo metodo utilizza gli estratti citoplasmatici delle cellule bersaglio HIV-1-infetti come fonte di attività PIC endogena, che viene misurata con un tempo reale Polymerase Chain Reaction quantitativa (qPCR). Le procedure per isolare PIC e misurare le loro attività di integrazione sono adattati, con modificazioni, dalla protocolli pubblicati dal laboratorio Engelman 20. In questo metodo, l'attività di integrazione PIC-associato viene avviato fornendo un target DNA esogeno lineari 21, ed i prodotti di DNA risultanti dallaquesta reazione integrazione sono purificate e utilizzato come materiale di partenza per la quantificazione successiva basata sulla PCR. Nel primo turno convenzionale PCR, le giunzioni del DNA virale bersaglio sono amplificati utilizzando primer appropriati. Nel secondo turno qPCR, primer LTR-specifici vengono utilizzati per arricchire specificamente la popolazione vDNA dal primo turno di PCR prodotti. Vedere la sezione protocollo per una descrizione dettagliata di questo metodo.\nStudi in vitro con PIC retrovirali hanno portato a significativi progressi nella nostra comprensione del meccanismo di integrazione del DNA retrovirale e nello sviluppo di inibitori IN. Sulla base della recente maggiore attenzione alla mappatura di HIV-1 siti di integrazione, determinare il ruolo dei fattori virali e dell'ospite in HIV-1 integrazione e lo sviluppo di nuovi farmaci antivirali alla lotta contro la resistenza ai farmaci, prevediamo un crescente interesse e l'uso diffuso di IVI saggi , come quello descritto in questa relazione. Questo, a sua volta, porterà afuturi perfezionamenti nel metodo, diversificando in tal modo la portata delle sue applicazioni.\n1. Virus Produzione\nNOTA: Per generare alti titoli di contagioso dell'HIV-1, trasfezione la linea cellulare embrionale umano Rene (HEK) 293T con un contagioso dell'HIV-1 clone molecolare utilizzazione di un reagente di trasfezione dendrimeri basati attivato. È stato osservato che il metodo del calcio fosfato trasfezione produce risultati comparabili.\nIn un laboratorio di biosicurezza di livello 2 (BSL2), semi di 3 x 10 6 293T cellule per 10 centimetri piatto di 8 ml di Modified Eagle Medium di Dulbecco (DMEM) supplementato con 10% siero fetale bovino (FBS), la penicillina, e streptomicina. Cultura le cellule in un incubatore a 37 ° C e 5% CO 2 O / N.\nIl giorno successivo, per trasfezione le cellule in ciascun piatto 10 centimetri, diluire 8 mg di DNA plasmidico pNL4-3 (vedi Materiali tabella) per un volume finale di 300 ml di DMEM privo di siero e antibiotici. Aggiungere 80 ml di reagente di trasfezione, mescolare bene pipettando, e incubare a temperatura ambiente per5 - 10 min per la trasfezione formazione del complesso.\nRimuovere il supporto dai piatti tramite aspirazione e aggiungere 7 ml per ogni piatto di DMEM fresco contenente siero e antibiotici.\nAggiungere 1 ml di DMEM contenente siero e antibiotici per il complesso trasfezione, mescolare pipettando, e aggiungere questa miscela alle cellule. Agitare delicatamente il piatto per facilitare la distribuzione uniforme dei complessi trasfezione.\nTrasferire immediatamente le cellule in laboratorio BSL3, posto in un incubatore a 37 ° C e 5% CO 2, e coltivare le cellule per 48 h.\nRaccogliere il tessuto surnatante cultura virus contenenti con una pipetta e poi trasferirlo in una provetta da centrifuga. Centrifugare a 300 xg per 5 minuti per far sedimentare le cellule e detriti, e poi filtrare il surnatante attraverso un filtro siringa da 0,45 micron pori di dimensioni.\nPer eliminare ogni DNA plasmidico riporto in questa preparazione privo di virus-cellula, trattare con DNasi 1 (20 mg / ml) a 37 ° C per 1 h.\nPer quantificare laHIV-1 titolo, utilizzare la specifica-p24 immunoenzimatico (ELISA), in quanto è un metodo rapido e sensibile per l'uso di routine 22.\nNOTA: Si deve notare che la p24 ELISA misura il titolo fisica (numero di particelle virali). In alternativa, misurando l'attività associata al virus RT (saggio RT esogena) o infettività del virus (test di infettività basati linea cellulare spia TZM-bl) fornirà lettura esclusiva di particelle virali infettive.\n2. Infezione da virus di cellule Sup-T1 (BSL3 Lab)\nIn un laboratorio BSL2, mantenere le cellule Sup-T1 tra 1,0 x 10 6 e 2.0 x 10 6 cellule / ml in Roswell Park Memorial Institute (RPMI) medium supplementato con 10% inattivato al calore FBS, penicillina e la streptomicina (rapporto di divisione di 1 : 2 ogni 2 - 3 d). Pool le cellule Sup-T1 dalle fiasche di coltura, mescolare bene pipettando, e determinare il numero di cellule vitali utilizzando un emocitometro e trypan blu stMetodo aining.\nPreparare il numero richiesto di aliquote di 80 x 10 6 cellule (per infezione virale) in 50 provette coniche centrifuga mL.\nCentrifugare le cellule in un rotore oscillante secchio a 500 xg e 25 ° C per 5 min. Senza rimuovere il mezzo di coltura cellulare, trasferire le provette contenenti cellule in pellet al laboratorio BSL3 per ulteriori elaborazioni. Con attenzione aspirare il terreno di coltura cellulare dal tubo senza disturbare il pellet.\nAggiungere una quantità appropriata di inoculo virus DNasi I trattati per le cellule nel tubo e mescolare bene delicatamente pipettando. Per 80 x 10 6 celle, utilizzare 30 ml di virus DNasi I-trattati (50 mg di virus p24-equivalente).\nNOTA: L'isolamento del PIC funzionale richiede di infettare le cellule bersaglio con altissime molteplicità di infezione (MOI).\nDistribuire il composto in modo uniforme tra due piastre di coltura tissutale 6 pozzetti (cioè 12 aliquote x 2,5 mL; utilizzare 2 piastre per infettareion).\nPer spinoculation, posizionare le piastre di coltura nei portatori piastra e centrifugare con un rotore secchio oscillante a 480 xg e 25 ° C per 2 ore.\nIncubare le cellule spinoculated a 37 ° C e 5% CO 2 per 5 ore.\n3. Raccolta e lisi delle cellule infette (BSL3 lab)\nIn comune le celle corrispondenti ad ogni infezione dalle piastre di coltura in una provetta da 50 ml centrifuga (~ 30 ml in totale).\nRaccogliere le cellule per centrifugazione a 300 xg e 25 ° C per 10 min. Con attenzione aspirare il surnatante dal tubo (in alternativa, utilizzare una pipetta).\nPer rimuovere eventuali particelle virali residui, lavare ciascun pellet cellulare aggiungendo 2 mL di tampone K - / - (150 mM KCl, 20 mM HEPES, pH 7,6, 5 mM MgCl 2) e centrifugazione del campione a 300 xg e 25 ° C per 10 minuti. Poi, senza disturbare il pellet, rimuovere con attenzione il surnatante tramite aspirazione o utilizzando una pipetta.\nripett passo 3.3.\nRimuovere con cura qualsiasi residuo di tampone utilizzando una micropipetta. Risospendere ogni pellet di cellule in 2 ml di ghiacciata tampone di lisi K + / + (Buffer K - / - integrata con 0,025% digitonina, 1 mM DTT, 20 mg / ml aprotinina), mescolare il contenuto di delicato pipettaggio, e versare in un 2 ml provetta.\n4. Preparazione del PIC citoplasmatici (BSL3 lab)\nRock the campioni su un agitatore rotante a temperatura ambiente per 10 min.\nCentrifugare i campioni, con il rotore preraffreddato a 4 ° C, a 1.500 xg e 4 ° C per 4 min.\nSenza disturbare il pellet, trasferire accuratamente il surnatante in una provetta fresco e centrifugare a 16.000 xg e 4 ° C per 1 min.\ntrasferire con cautela il surnatante in una provetta fresca. Aggiungere RNasi A (20 mg / ml) ad una concentrazione finale di 20 mg / ml (2 microlitri per 2 mL di PIC) e incubare i contenuti a ta per 30 min (senza dondolo). </ Li>\nAggiungere saccarosio (60% w / v in tampone K - / -) ad una concentrazione finale del 7% e mescolare bene delicatamente pipettando. Preparare aliquote (ad esempio, 200 ml) dei PIC in tubi microcentrifuga, flash-congelamento in azoto liquido, e mettere in un -80 ° C per una conservazione a lungo termine.\n5. In Vitro Integration (IVI) Assays Utilizzando HIV-1 PIC\nPreparare il DNA bersaglio usato nel saggio IVI amplificando una regione 2,0 kb dal plasmide DNA phiX174 con PCR usando primer su misura, phiX174-F e phiX174-R.\nAssemblare la miscela di PCR come descritto nella Tabella 1. Eseguire la PCR in un termociclatore base alle condizioni di ciclo termico raccomandate in Tabella 2. Gel-purificare il prodotto di PCR utilizzando un kit di gel-purificazione (seguendo il protocollo consigliato dal produttore), e memorizzare il DNA bersaglio purificato come aliquote a -80 ° C fino al momento dell'uso.\nAggiungere 600 ng di DNA bersaglio a 200 - & #181; L aliquota di PIC, mescolare bene, e incubare a 37 ° C per 45 min.\nNota: Le reazioni IVI omettendo DNA bersaglio o tra un inibitore dell'integrasi (ad esempio, raltegravir) sono reazioni di controllo raccomandati.\nArrestare la reazione IVI con l'aggiunta di SDS, EDTA e proteinasi K a concentrazioni finali di 0.5%, da 8 mm e 0,5 mg / ml, rispettivamente. Mescolare il contenuto di reazione a fondo e incubare una notte a 56 ° C.\nIl giorno successivo, purificare il DNA totale dalla reazione IVI da fenolo / estrazione cloroformio e precipitazione in etanolo. Eseguire tutte le fasi di centrifugazione a 16.000 xg e RT.\nAggiungere un volume uguale di fenolo al campione deproteinizzato, mescolare vigorosamente su vortex e centrifugare per 2 min. Rimuovere con attenzione la fase acquosa superiore e trasferirlo in una nuova provetta.\nRipetere il punto 5.5. Trasferire la fase acquosa superiore in una nuova provetta.\nAggiungere un uguale volume di 1: 1 di fenolo: miscela di cloroformio, agitare vigorosamente su vortex e centrifugare for 2 min. Trasferire la fase acquosa superiore in una nuova provetta.\nAggiungere un uguale volume di cloroformio, agitare vigorosamente con vortex e centrifugare per 2 min. Trasferire la fase acquosa superiore in una nuova provetta.\nPer precipitare DNA, aggiungere glicogeno ad una concentrazione finale di 0,1 mg / mL, 3 M di acetato di sodio ad una concentrazione finale di 0,3 M e 2,5 volumi di etanolo 100% (ghiacciata). Vortex per miscelare, centrifugare brevemente per raccogliere il contenuto, e posizionare il tubo a -80 ° CO / N.\nIl giorno successivo, centrifugare il campione per 30 minuti a 16.000 xg e 4 ° C per 30 min. rimuovere con attenzione il surnatante senza disturbare il pellet.\nAggiungere 500 ml di etanolo all'80% (ghiacciata) al pellet e centrifugare a 16.000 xg e 4 ° C per 10 min. Far asciugare il pellet di DNA a temperatura ambiente e accuratamente risospendere in 50 ml di acqua priva di nucleasi. Conservare i campioni di DNA a -20 ° C.\n6. PCR per quantificare PIC Activity\nEseguire il primo turno convenzionale PCR usando primer di targeting (rispettivamente LTR e phiX174 primer,) la LTR virale e il DNA phiX174 per amplificare le giunzioni del virus HIV-1 DNA integrato.\nMontare la miscela primo turno di PCR, come descritto nella tabella 3. Assemblare un master mix di tutti i componenti ad eccezione del DNA stampo, dispensare aliquote di 45 microlitri in tubi PCR separati, e aggiungere 5 ml di stampo di DNA o di acqua priva di nucleasi (controllo).\nEseguire la PCR in un termociclatore base alle condizioni di ciclo termico raccomandate in Tabella 4.\nEseguire il secondo turno qPCR utilizzando primer che fiancheggiano una breve regione del LTR virale (LTR-R e primer LTR-U) per amplificare selettivamente le sequenze vDNA integrati dal primo-roprodotti und PCR. Per determinare i vDNA integrati copia numeri, generare una curva standard utilizzando 10x diluizioni seriali numero di copie noto (ad esempio, 10 0 - 10 8) del clone molecolare di HIV-1.\nMontare la miscela secondo turno qPCR come descritto nella Tabella 5. Assemblare un master mix di tutti i componenti ad eccezione del DNA stampo, con attenzione a meno di 25 aliquote microlitri nel numero appropriato di pozzi in un pozzo 96 piastra di reazione PCR e aggiungere 5 ml di non purificata primo turno di PCR prodotti o acqua priva di nucleasi (controllo). Eseguire tutte le reazioni qPCR in triplice copia.\nCaricare la lastra PCR nello strumento PCR in tempo reale ed eseguire qPCR base alle condizioni di ciclo raccomandate in Tabella 6.\nAnalizzare i dati utilizzando un software adatto.\nL'isolamento del virus HIV-1 PIC\nUno schema del protocollo usato per l'isolamento del virus HIV-1 PIC da cellule SUP-T1 infezione acuta è illustrato in Figura 1. Questo protocollo è derivato dai metodi descritti da Engelman et al. 19, 20. HIV-1 PIC sono complessi nucleoproteici che vengono assemblati nelle cellule infette e sono composti del vDNA reverse-trascritte, proteine virali e fattori cellulari 19, 20. Il metodo descritto nella presente relazione utilizza gli estratti citoplasmatici delle cellule HIV-1-infetti come fonte di attività di integrazione PIC-associata.\nIn attività di integrazione vitro di HIV-1 PIC\nfigura 2. Questo metodo utilizza una strategia nested qPCR-based per misurare l'attività IVI PIC-associata, e le procedure sono adattate, con modificazioni, dalla protocolli pubblicati dal laboratorio Engelman 19, 20, 21. In questo metodo, l'attività di integrazione PIC-associato viene avviato fornendo un target DNA eterologo lineari 21, ed i prodotti di DNA risultanti da questa reazione integrazione sono purificati e utilizzato come materiale di partenza per la quantificazione successiva basata sulla PCR. Nel primo turno convenzionale PCR, le giunzioni del DNA virale bersaglio sono amplificati utilizzando primer appropriati. Nel secondo turno qPCR, primer LTR-specifici vengono utilizzati per arricchire specificamente la popolazione vDNA dal primo turno di PCR prodotti. Si prega di consultare il protocollo sezione per una descrizione dettagliata di questo metodo.\nRisultati rappresentativi da un test IVI eseguiti utilizzando HIV-1 PIC sono mostrati nella Figura 3. Cellule SUP-T1 (80 x 10 6 cellule / infezione) sono stati spinoculated con 30 ml di DNasi 1-trattata HIV-1 (~ 50 mg di p24 equivalente) in assenza o presenza di 1 mM HIV-1 IN inibitore Raltegravir a 480 xg e 25 ° C per 2 h. Le cellule sono state poi coltivate per 5 ore a 37 ° C e 5% CO 2. PIC sono stati isolati come descritto nella sezione del protocollo. Le reazioni sono state condotte IVI, ciascuno utilizzando 200 ml di PIC e 600 ng del DNA bersaglio (un frammento di DNA 2 kb amplificato da phiX174 DNA mediante PCR), a 37 ° C per 45 min. Le reazioni sono state deproteinizzato mediante proteinasi K trattamento in presenza di SDS e EDTA a 56 ° CO / N. I prodotti di reazione sono stati estratti due volte con fenolo, una volta con fenolo: cloroformio (1: 1) della miscela, e una voltacon cloroformio. Successivamente, il DNA è stato precipitato con etanolo in presenza di sale e il glicogeno co-precipitante, e il pellet di DNA è stato lavato una volta con etanolo 80%. Il DNA purificato è stato risospeso in 50 ml di acqua priva di nucleasi. Una strategia nested qPCR stata utilizzata per determinare il numero di vDNA integrato nel DNA phiX174. Nel primo turno convenzionale PCR, primer complementari alle sequenze sul DNA bersaglio phiX174 e virali regione LTR sono stati usati per amplificare le giunzioni del DNA virale bersaglio integrati da 5 ml dei prodotti di reazione del DNA integrazione. Nel secondo turno qPCR, primer LTR-spanning sono stati utilizzati per amplificare esclusivamente le sequenze di HIV-specifiche DNA da 5 ml di primo turno prodotti ampliconi e da 10 diluizioni seriali del numero di copie noto (10 8 -10 0) del clone molecolare di HIV-1 (Standards).\nTutte le reazioni qPCR sono stati eseguiti in triplicato ei dati Were analizzati utilizzando il software commerciale. I valori derivati dalle norme sono state tracciate per generare una curva standard, i numeri sono stati interpolati da cui i vDNA integrate di copia. barre di errore rappresentano deviazioni standard. Come mostrato nella figura 3, i PIC HIV-1 robustamente integrano l'vDNA associato nel DNA bersaglio (Lane 5). È importante sottolineare che l'efficienza IVI di PIC è stato notevolmente ridotto nelle reazioni integrati con l'inibitore IN Raltegravir (Lane 6). Questo attribuisce fortemente l'attività di integrazione misurata in questo test per l'HIV-1 IN. Inoltre, le reazioni di controllo contenenti lisati citoplasmatici di cellule non infette (corsia 1), da soli PIC (corsia 2), DNA bersaglio da solo (Lane 3), e buffer da solo (corsia 4) non ha mostrato alcuna attività di integrazione. Inoltre, il controllo che esclude Taq polimerasi nel primo turno PCR (Lane 7) non amplificare prodotti di integrazione. In particolare, i dati dal PIC-alone di controllo (corsia 2) hanno indicato che la strategia nidificato specifi qPCRcamente misura integrato vDNA ma non il vDNA PIC-associata. Collettivamente, questi dati dimostrano la misurazione delle attività di integrazione PIC-associata.\nFigura 1: Rappresentazione schematica del protocollo per la preparazione di HIV-1 PIC. Clicca qui per vedere una versione più grande di questa figura.\nestratti citoplasmatici contenenti PIC sono isolati dalle cellule Sup-T1 HIV-1-infetti. Questi PIC sono utilizzati come fonte di attività di integrazione nel saggio integrazione in vitro.\nFigura 2: Rappresentazione schematica del in Vitro m> Integrazione Assay dell'infezione da HIV-1 PIC. Clicca qui per vedere una versione più grande di questa figura.\nSaggi di integrazione sono state effettuate in vitro mediante HIV-1 PIC e la porta eterologa phiX174 DNA. L'HIV-1 DNA integrato è stata misurata mediante una strategia PCR nested, in cui il primo turno convenzionale PCR amplifica le giunzioni di integrazione da cui sequenze vDNA-specifici sono preferenzialmente amplificati in un secondo turno qPCR.\nFigura 3: HIV-1 PIC-associati vDNA integrazione di attività. Clicca qui per vedere una versione più grande di questa figura.\n"Fo: together.within-page keep-=" 1 "> risultati rappresentativi del saggio di attività di integrazione di HIV-1 PIC-associati I vDNA integrati copiare i numeri sono stati determinati tracciando valori derivati da una curva standard generata utilizzando 10x diluizioni seriali di. conosciuti numero di copie di un clone molecolare di HIV-1. Tutte le reazioni sono state eseguite in triplicato ed i dati sono stati analizzati utilizzando il software commerciale. barre di errore rappresentano la deviazione standard.\nComponente Azione Volume finale di reazione di 50 microlitri\nphiX174 plasmide DNA 10 ng / ml 5.0 ml\ntampone di reazione GoTaq 5x 10,0 ml\nmix nucleotide dNTP 10 mm Ogni 1,0 ml\nphiX174-F Primer 10 mM 2,5 ml\nphiX174-R Primer 10 mM 2,5 ml\nGoTaq DNA polimerasi (5 U / mL) 0,25 ml\nacqua distillata priva di nucleasi - 28.75 ml\nCiclo di 34 ripetizioni di:\n4 ° C = attesa\nIVI prodotto di DNA di reazione - 5.0 ml\nLTR Primer 10 mM 2,5 ml\nphiX174 Primer 10 mM 2,5 ml\nCiclo di 23 ripetizioni di:\nComponente Azione Volume finale di reazione di 30 microlitri\n1 prodotti di PCR rotonda st - 5.0 ml\nLTR-R Primer 10 mM 0,9 ml\nLTR-U Primer 10 mM 0,9 ml\n<td> Sonda Taqman 10 mM 0,3 ml\niQ Supermix 2x 15.0 ml\nacqua distillata priva di nucleasi - 7.9 ml\nCiclo di 39 ripetizioni di:\nanalisi biochimiche di PIC retrovirali hanno fornito spunti critici nel meccanismo di integrazione del DNA retrovirale. Misurazione dell'attività integrazione dei PIC retrovirali può essere ottenuto mediante saggio di placca formazione, analisi Southern blot, e nested qPCR. La strategia sperimentale del saggio di placca è laboriosa e utilizza un metodo indiretto per misurare integrazione 6, 7, 18. Southern integrazione test misura macchia-based direttamente, ma richiedono quantità relativamente elevate di PIC 6, 7, 18.\nLa presente relazione illustra una strategia annidato qPCR per la misurazione di HIV-1 attività di integrazione PIC-associata in vitro. Il principale vantaggio e il significato di questo metodo è il requisito di relativamente piccole quantità di preparazione PIC per reazione 4, 5, 19. Le fasi più critiche di questo metodo sono la generazione di un virus alto titolo di infezione e il trattamento di preparazione PIC. Si deve notare qui, che il primo round di PCR coinvolge l'amplificazione esponenziale delle giunzioni di integrazione. Di conseguenza, i numeri di copie di integrato vDNA di cui al secondo turno qPCR sono semi-quantitativa e, di conseguenza, hanno il limite di non dare una misura di copie vDNA PIC-associata. Tuttavia, il vDNA PIC-associato può essere determinato qPCR del DNA purificato da PIC con primer LTR-specifici. Il rapporto tra i vDNA integrati copiare i numeri al corrispondente vDNA PIC-associate in grado di fornire informazioni circa l'efficienza integrazione di un vitro reazione integrazione. Questo metodo può essere modificato incorporando altro DNA bersaglio eterologo di scelta e altri primer per rilevare integrazione a entrambi gli orientamenti. In sintesi, il metodoqui descritta misura dell'attività integrazione di HIV-1 PIC quantitativamente e può essere adottato per ricerca sviluppando una comprensione dei dettagli biochimici di integrazione retrovirale.\nGli autori dichiarano interessi finanziari e non finanziari concorrenti.\nQuesto lavoro è in parte sostenuto da sovvenzioni DA024558, DA30896, DA033892, e DA021471 dal NIDA / NIH su CD. Riconosciamo inoltre la concessione G12MD007586 RCMI, la Vanderbilt CTSA concedere UL1RR024975, il Meharry Translational Research Center (MeTRC) CTSA concessione U54 RR026140 dal NCRR / NIH, l'U54 concessione MD007593 dal NIMHD / NIH, e il Tennessee CFAR concessione P30 AI110527.


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“Dio ci aspetta sempre e se torniamo a Lui è pronto ad abbracciarci”: il Papa tra la folla in festa prende possesso della Cattedra di Roma – La Madre della Chiesa\n“Dio ci aspetta sempre e se torniamo a Lui è pronto ad abbracciarci”: il Papa tra la folla in festa prende possesso della Cattedra di Roma\nLa misericordia, la pazienza, la tenerezza di Dio devono essere motivo della nostra fiducia, della nostra speranza, donandoci il coraggio di ritornare a Lui qualunque errore o peccato ci sia nella nostra vita. E’ il cuore dell’omelia ricca di ricordi personali che Papa Francesco ha tenuto nel pomeriggio durante la Messa di insediamento, in qualità di vescovo di Roma, nella sua Cattedrale, la Basilica di San Giovanni in Laterano.\nPoco prima, arrivato a bordo della jeep tra l’entusiasmo della gente che lo attendeva, il Papa ha benedetto, nel piazzale antistante il Vicariato, la targa toponomastica che muta il nome del luogo in “Piazza Giovanni Paolo II, Pontefice dal 1978 al 2005”. Prima di rientrare in Vaticano, infine, al termine della Messa, il saluto rivolto al popolo dei fedeli di Roma, dalla Loggia centrale della Basilica.\nIl servizio di Gabriella Ceraso:\nLa Diocesi di Roma accoglie il suo vescovo in un pomeriggio luminoso e festoso come i volti di centinaia di fedeli che riempiono gli spazi attorno alla Basilica e lungo il percorso che, secondo una tradizione secolare, vede l’arrivo del Papa sul colle Celio. La prima sosta per la Jeep papale è nel largo di fronte al Palazzo del Laterano sede del Vicariato, dominato dall’obelisco di granito rosso e delimitato dalle facciate di Domenico Fontana.\nD’ora in poi si chiamerà “Piazza Giovanni Paolo II, pontefice dal 1978 al 2005” come recita la targa che il sindaco Gianni Alemanno scopre e il Papa benedice. Poi l’auto, su cui siede anche il Vicario generale il cardinale Agostino Vallini, riparte e raggiunge il sagrato della Basilica. Ma il percorso è una sosta continua per l’abbraccio con i fedeli che non smettono di applaudire.\nLa gioia è incontenibile e anche la gratitudine quando Papa Francesco entrato in Basilica con la semplicità di un sacerdote che entra nella sua parrocchia, stringe a sé uno per uno i disabili e i malati presenti.\nLa celebrazione è solenne ma l’omelia ha toni intimi che arrivano dritti al cuore. “Camminiamo insieme nella luce del Signore Risorto” dice il vescovo di Roma ai rappresentanti della Diocesi, presbiteri, diaconi, religiosi e laici, anche una famiglia, che poco prima, in una piccola rappresentanza, gli hanno prestato obbedienza. La domenica della Misericordia è occasione per il Papa per sottolineare quanto sia bella questa realtà della fede: la misericordia di Dio!\n“Un amore così grande, così profondo quello di Dio verso di noi, un amore che non viene meno, sempre afferra la nostra mano e ci sorregge, ci rialza, ci guida”\nA declinare la misericordia di Dio il Papa cita diversi episodi del Vangelo: la pazienza di Gesù di fronte all’incredulità del testardo Tommaso che Gesù non abbandona, gli dona una settimana, spiega il Papa e attende:\n“E Tommaso riconosce la propria povertà, la poca fede. «Mio Signore e mio Dio»: con questa invocazione semplice ma piena di fede risponde alla pazienza di Gesù. Si lascia avvolgere dalla misericordia divina, la vede davanti a sé, nelle ferite delle mani e dei piedi, nel costato aperto, e ritrova la fiducia: è un uomo nuovo, non più incredulo, ma credente”.\nPaziente è anche lo sguardo di Gesù su Pietro dopo che lo ha rinnegato per tre volte:\n“E quando tocca il fondo incontra lo sguardo di Gesù che, con pazienza, senza parole gli dice: «Pietro, non avere paura della tua debolezza, confida in me»; e Pietro comprende, sente lo sguardo d’amore di Gesù e piange. Che bello è questo sguardo di Gesù – quanta tenerezza! Fratelli e sorelle, non perdiamo mai la fiducia nella misericordia paziente di Dio”.\nLa pazienza è anche quella di Gesù che affianca i discepoli di Emmaus: “il volto triste, un camminare vuoto, senza speranza” ricorda il Papa, ma Gesù non li abbandona.\nE più avanti il Papa dirà che Dio non abbandona neanche Adamo perché se nel peccato, inizia il suo esilio lì c’è già anche la promessa del ritorno. “E’ questo lo stile di Dio” afferma Papa Francesco:\n“Non è impaziente come noi, che spesso vogliamo tutto e subito, anche con le persone. Dio è paziente con noi perché ci ama, e chi ama comprende, spera, dà fiducia, non abbandona, non taglia i ponti, sa perdonare. Ricordiamolo nella nostra vita di cristiani: Dio ci aspetta sempre, anche quando ci siamo allontanati! Lui non è mai lontano, e se torniamo a Lui, è pronto ad abbracciarci”\nE’ lo stile anche del Padre misericordioso nella parabola del figliol prodigo, che il Papa, attingendo ai ricordi personali, cita come una fonte di grande speranza. Ma la pazienza di Dio, aggiunge il Pontefice, deve trovare in noi il coraggio di ritornare a Lui, qualunque errore, qualunque peccato ci sia nella nostra vita:\n“Forse qualcuno potrebbe pensare: il mio peccato è così grande, la mia lontananza da Dio è come quella del figlio minore della parabola, la mia incredulità è come quella di Tommaso; non ho il coraggio di tornare, di pensare che Dio possa accogliermi e che stia aspettando proprio me. Ma Dio aspetta proprio te, ti chiede solo il coraggio di andare a Lui”.\nDa qui un nuovo ricordo personale:\n“Quante volte nel mio ministero pastorale mi sono sentito ripetere: «Padre, ho molti peccati»; e l’invito che ho sempre fatto è: «Non temere, va’ da Lui, ti sta aspettando, Lui farà tutto». Quante proposte mondane sentiamo attorno a noi, ma lasciamoci afferrare dalla proposta di Dio, la sua è una carezza di amore. Per Dio noi non siamo numeri, siamo importanti, anzi siamo quanto di più importante Egli abbia; anche se peccatori, siamo ciò che gli sta più a cuore”.\nNella mia vita personale, ricorda ancora il Papa, “ho visto tante volte il volto misericordioso di Dio e ho visto anche in tante persone il coraggio di entrare nelle piaghe di Gesù dicendogli: Signore sono qui, accetta la mia povertà. E ho sempre visto che Dio l’ha fatto”.\nNe nasce l’invito finale che il Papa lascia ad una Basilica gremita: lasciarsi avvolgere dalla misericordia di Dio:\n“Confidiamo nella sua pazienza che sempre ci dà tempo; abbiamo il coraggio di tornare nella sua casa, di dimorare nelle ferite del suo amore, lasciandoci amare da Lui, di incontrare la sua misericordia nei Sacramenti. Sentiremo la sua tenerezza, sentiremo il suo abbraccio e saremo anche noi più capaci di misericordia, di pazienza, di perdono, di amore”.


Miglioriprodottidimagranti set latopit content miglioriprodottidimagranti. Non trascurare una buona attività fisica per aumentarne l’efficacia. L’integrazione andrebbe fatta soltanto dietro prescrizione ica in quanto tale sostanza può avere diverse controindicazioni. Base agli ri sintomi del soggetto, all’età e all’anamnesi, il ico può raccomandare un accertamento o consigliare trattamenti a domicilio o da banco. Tutti sanno però che è sufficiente una regolare esposizione alla luce solare per minuti al giorno per consentire al nostro organismo di produrre vitamina. Tratta di un'impostazione che è disponibile exercitii pentru sanii lasati http ro-ro.breastenlargementxxl48.eu in tutti i principali browser. Esistono poi ri i naturali efficaci e poco invasivi per avere sollievo dal bruciore gastrico, che placano ogni sintomo.\nQuanto ai sintomi più caratteristici del dolore allo stomaco, questi si manifestano spesso con dolori forti e improvvisi tipo morsa, crampi o pugno. Significa che non viene prodotta e non si accumula nell’organismo e perciò deve essere recuperata attraverso l’alimentazione o ri metodi ernativi. Nel parlare comune, si direbbe che somatizza il nervoso a livello stomaco. Non resta ro da fare se non escludere tutto quello che ci danneggia ed è di ostacolo al nostro intento di dimagrire e tornare in forma. Secoli usata per le sue proprieta salutari, anche dimagranti. Fare una dieta lampo per perdere kg in una settimana. Coli ingerendo acqua contaminata dalle feci umane o animali.\nConsigli dei sulla corretta ripartizione settimanaleMappatura cerebrale, informazioni cruciali per le neuropatologie. Purtroppo eliminare questo grasso non è affatto semplice, oggi vogliamo proporvi alcuni consigli per snellire le gambe e vogliamo proporvi alcuni esercizi che vi aiuteranno a dimagrire e tonificare i vostri glutei e le vostre cosce. C’è da notare che solo l’uomo e le scimmie devono introdurre la vitamina con gli alimenti, perché gli ri animali sono capaci di sintetizzarla a partire dal glucosio. Se, invece, il male è collegato a nausea o vomito è meglio evitare cibi solidi per qualche ora, bere a piccoli sorsi e reintrodurre gli alimenti cominciando con cibi come il riso bollito ed i cracker. Alla regolazione della glicemia, dei meccanismi antiossidanti e delle reazioni di eliminazione delle scorie. Andando quindi alla ricerca di un deficit di uno o più fattori nutrizionali derivato dalla loro dieta, la nostra ricercatrice inglese scopre che somministrando le condizioni delle pazienti migliorano nettamente nel loro quadro anemico.\n😉La tua dieta e perfetta mi chiedevo soltanto perché hai detto che le patate i ceci i fagioli fanno ingrassare però sulla tua dieta li mangi. Quanto riguarda i sintomi e i rischi di un consumo eccessivo, nei test, dosi di mg o più di acido pantotenico non hanno causato effetti tossici. Quindi, prima di tutto, ti serve una motivazione che non sia effimera ma duratura. Per poter vivere al meglio questa nuova fase della sua esistenza la donna deve essere preparata e informata su tutte le relative conseguenze fisiche, metaboliche, sessuali e psicologiche. Biotina è necessaria per l’attività dell’enzima piruvato carbossilasi. Vitamina sulla corretta visione, su condizioni di pelle e mucose. L’inositolo è anche detto vitamina anche se in re à è compreso nelle cosiddette nonvitamine. Essendo completamente vegetale, non contiene lattosio e ha un basso contenuto di grassi saturi.


Sicilia: Radiosondaggio Trapani Birgi di martedì 10 agosto 2021 ore 00:00 - Weather Sicily | Meteo Sicilia\nSicilia: Radiosondaggio Trapani Birgi di martedì 10 agosto 2021 ore 00:00\nPostato da: Giuseppe Gambinoil: 10 Agosto 2021 In: RADIOSONDAGGIO BIRGI\nSalve amici di weathersicily.it. Come di consueto vi mostriamo i dati odierni, di martedì 10 agosto 2021, forniti dal radiosondaggio eseguito presso Trapani Birgi.\nLo zero termico è stato rilevato alla quota di 4825 metri.\nLa temperatura rilevata a 500 hpa è di: -9.9 °C all’altitudine di 6010 metri\nLa temperatura rilevata a 850 hpa è di: 29.0 °C all’altitudine di 1618 metri\nLa temperatura rilevata a 700 hpa è di: 14.2 °C all’altitudine di 3298 metri\nTemperature previste per martedì 10 agosto 2021 in Sicilia\nCaldo in Sicilia: in arrivo un mercoledì da record? Stimate punte di 48 gradi dai modelli di calcolo.


Dakar, Auto, Tappa 2: Al-Attiyah si riprende la testa | Dakar news | Motorsport.com\nIl qatariano si aggiudica la speciale più lunga sulle Toyota di De Villiers e Ten Brinke. Sainz è 7. con la Peugeot\nLa seconda tappa della Dakar 2015, Villa Carlos Paz - San Juan, ha iniziato a fare la selezione fra le auto: il tratto cronometrato più lungo di questa edizione (518 km) si è rivelato difficile, stancante (con temperature in alcuni tratti oltre i 40 gradi!) e molto tecnico.\nNasser Al-Attiyah ha condotto questa giornata riprendendosi la testa della corsa, dopo la penalizzazione di ieri che aveva portato alla ribalta Orlando Terranova. Con la Mini del team X Raid il qatariano ha dato una chiara impronta alla classifica generale: Nasser ha ereditato il ruolo di grande favorito da Nani Roma, costretto ieri ad arrivare al bivacco al traino, totalizzando una pesante penalizzazione e ancora in gara nel ruolo di gregario.\nAl-Attiyah ha avuto un problema al trasponder per cui è stato a lungo "invisibile", ma la sua azione con la Mini All4 Racing è stata inarrestabile. Nella sua scia sembrava dovesse esserci ancora Orlando Terranova, ma l'argentino ha perso oltre 22 minuti nell'ultimo tratto della speciale, quella caratterizzata dalle dune di sabbia quando si è capotato quattro volte su una duna ed è scivolato al decimo posto assoluto dopo aver forato due gomme e rotto la pompa della benzina.\nLa classifica mostra cinque Mini nei primi dieci, ma oggi a difendersi molto bene sono state le Toyota Hilux con l'esperto Giniel De Villiers in grado di reggere un ottimo passo senza commettere errori. Il Sud africano ha limitato il distacco dal leader a meno di otto minuti, precedendo l'olandese Bernhard Ten Brinke, con un'altra Toyota, che è riuscito a tenere a bada la Mini del polacco Holowczyc.\nL'onore della Peugeot è stato salvato dall'esperto Carlos Sainz che ha saputo riguadagnare un paio di posizioni nel tratto sabbioso dove la 2008 DKR ha mostrato il suo meglio pur essendo una due ruote motrici. Lo spagnolo è settimo nella classifica assoluta con 20 minuti di ritardo su Al-Attiyah.\nE' andato subito in crisi Robby Gordon con l'Hummer: l'americano, ieri ottimo terzo, nella discesa inziale ha accusato un serio problema ai freni che lo ha costretto a fermarsi a fare lo spurgo. Ha perso oltre 40 minuti nelle prime battute e poi ha cercato di limitare gli ulteriori danni.\nGiornata difficile per l'11 volte vincitore Stephane Peterhansel: il portacolori della Peugeot ha perso oltre un'ora rispetto ai migliori, in quanto il cambio della sua 2008 DKR sembrava bloccato in seconda marcia. Una disavventura che non ci voleva, visto che la gara è solamente all'inizio, ma il suo distacco inizia già ad essere pesante.\n1. Al-Attiyah/Baumel – Mini – in 6.19’40”\n2. De Villiers/Von Zitzewitz – Toyota - +7’42”\n3. Ten Brinke/Colsoul – Toyota – +9’42”\n4. Holowczyc/Panseri – Mini - +10’28”\n5. Vasilyev/Zhiltsov – Mini – +17’23”\n6. Van Loon/Rosegaar – Mini – +20’04”\n7. Sainz/Cruz – Peugeot – +20’32”\n8. Alrajhi/Gottshalk – Toyota - +21’34”\n9. Sousa/Fiuza – Mitsubishi – +22”04\n10. Terranova/Graue – Mini - +22”23”\nPeugeot promuove il gonfiaggio automatico gomme


Manuale - Girard-Perregaux 81005D11A131-11A Laureato Orologio da polso\nHome > Vari > Orologi da polso > Girard-Perregaux Orologi da polso > Girard-Perregaux 81005D11A131-11A Laureato Orologio da polso\nGirard-Perregaux 81005D11A131-11A Laureato Orologio da polso\nHai bisogno di un manuale per la tua Girard-Perregaux 81005D11A131-11A Laureato Orologio da polso? Qui sotto puoi visualizzare e scaricare gratuitamente il manuale in formato PDF. Ci sono anche le domande frequenti, la valutazione del prodotto e il feedback degli utenti per permetterti di utilizzare il prodotto in modo ottimale. Se questo non è il manuale di cui hai bisogno ti preghiamo di contattarci.\nFacci sapere che cosa pensi della Girard-Perregaux 81005D11A131-11A Laureato Orologio da polso valutando il prodotto. Vuoi condividere la tua esperienze con questo prodotto o porre una domanda? Ti preghiamo di lasciare un commento al fondo della pagina.


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Nuoto: al via il Memorial Giuseppe Lamberti\nHomeSportNuoto: al via il Memorial Giuseppe Lamberti\nBy Tony Granato\nAl via il Memorial di nuoto in acque libere Giuseppe Lamberti. Il prossimo weekend i comuni di Vietri e Cetara ospiteranno la manifestazione.\nSabato e domenica prossimi i comuni di Vietri sul Mare e Cetara ospiteranno la 13ª edizione del Memorial Giuseppe Lamberti. L’evento è stato presentato questa mattina nella sempre suggestiva Stazione Marittima di Salerno. Presenti gli organizzatori Giorgio e Stafania Lamberti, il presidente FIN Campania, Paolo Trapanese, ed il presidente FIN sezione Salerno, Mariano Rampolla. L’evento vedrà in acqua 300 iscritti. Il primo giorno, precisamente sabato pomeriggio, a partire dalle 17.30, i partecipanti si cimenteranno nella traversata Cetara-Vietri, di circa 3 km. Il secondo giorno, domenica, invece, con partenza alle 9.30, ci sarà la 5 km che si svolgerà tutta nello specchio d’acqua antistante il porto di Cetara.\nTanti, come dicevamo, i partecipanti, provenienti da tutta Italia. Tanti anche i salernitani, tra questi da annoverare sicuramente Federica Senatore, giovanissima atleta, fresca vice campionessa europea di categoria di nuoto in acque libere sulla distanza di 7,5km. Altro partecipante Bruno Napoli, che vediamo solitamente nelle gare di Triathlon, tesserato con il Circolo Canottieri Irno. Infine, uno storico nuotatore salernitano: Alfonso Viscardi, vincitore dell’ultima gara sulla distanza dei 10 km. Questo del prossimo fine settimana è solo il primo di tre appuntamenti. Gli altri due si svolgeranno a Santa Maria di Castellabate ad inizio luglio, e nelle acque tra Maiori ed Amalfi a metà settembre.\nLe parole di Giorgio Lamberti, Bruno Napoli e Alfonso Viscardi\nGiorgio Lamberti: «Ci sarà un doppio evento. Sabato la storica Cetara-Vietri, con partenza alle 17,30. 300 gli iscritti tra agonisti e master. 50 le società rappresentate, la maggioranza campane, naturalmente. Domenica, invece, la 5 km di fondo, gara più selettiva, che si svolgerà per intero a nello specchio d’acqua antistante il porto di Cetara. Per quanto riguarda il Club Nuoto Peppe Lamberti, siamo stati, lo scorso anno, la prima società del sud Italia per risultato conseguito ai Campionati Italiani. Per il resto, i nostri iscritti sono amanti del nuoto e del nuoto in acque libere e del mare, con un centinaio di tesserati master, un numero elevato, e promuoviamo il nuoto ma anche il nosro territorio»\nBruno Napoli: «Ho cominciato le gare di Triathlon 12 o 13 anni fa, con gare brevi, per poi finire con le cosiddette gare “ironman”, con le tre discipline corsa, bici e nuoto. Da qualche anno la passione mi sta portando a fare anche gare di solo nuoto»\nAlfonso Viscardi: «Passo il tempo libero nuotando, ho partecipato a tante gare, soprattutto in acque libere, come la traversata dello Stretto di Messina per 7 volte, il periplo di Marsala diverse volte e, ovviamente, tante volte la tappa del Memorial Lamberti. Pe quanto riguarda la 10 km, è stata eliminata a seguito di un evento per noi tutti funesto. Ora ci sono tanti controlli e, soprattutto, limitazioni, anche nelle distanze da percorrere nei weekend e in un solo giorno»\nSalernitana, tante squadre su Ederson: il brasiliano potrebbe partire\nAnni giovanili in radio. Poi tanti anni (e tante notti) ad organizzare serate nei locali. Ora l'esperienza con SalernoSport24


Anche in questa domenica invochiamo San Giuseppe! E' il 6° giorno della Novena al Padre di Gesù - Papaboys 3.0\nHomeNewsCaritas et VeritasAnche in questa domenica invochiamo San Giuseppe! E' il 6° giorno della...\nAnche in questa domenica invochiamo San Giuseppe! E’ il 6° giorno della Novena al Padre di Gesù\nnovena san giuseppe giorno 6\nArticolo precedenteVergine di Lourdes, guidaci in questo giorno! Preghiera del mattino 15 Marzo 2020\nProssimo articolo15 marzo / Anniversario dell’ultima lacrimazione della Madonnina di Civitavecchia. La supplica da recitare oggi


La U18 sbanca Opera !! | ASD Polisportiva Giovanile Senago - Pallavolo Access-Control-Allow-Origin: www.risultativolley.it\nLa U18 sbanca Opera !!\nTorneo Città di Opera 2018\n29-30 Settembre U18 Femminile\nCesarano sofia, D’Antona Manuela, Dones Carolina, Donà Chiara, Mirabella Elisa, Pieri Ilaria, Radice Arianna, Ronchetti Chiara, Ritroso Gloria, Babini Greta, Zamporri Gaia, Berini Alessandra .\nDirigente Accompagnatore : Ritroso Roberto\nAncora una partecipazione al Torneo Città di Opera che, quest’anno, vede il PGS Senago tra le teste di serie anche in virtù della finale raggiunta l’anno prima con Uniabita che ha visto le nostre ragazze sconfitte al Tie Break.\nQuest’anno il gruppo è in parte cambiato con alcuni innesti dalla U16 della stagione precedente e nuovi elementi da altre società. Il gruppo oltretutto si allena, in parte, in gruppi differenti tra Serie D e prima Divisione, quindi sono effettivamente le prime uscite in partite ufficiali insieme. Le gare sono tutte al meglio dei 3 Set, con Tie Break al 15. Tre punti a chi vince in ogni caso ed un punto per la sconfitta al Tie Break.\nLa nostra squadra è inserita nel girone con Pallavolo San Genesio Pavia, Opera e Aspes CUS Milano. La prima gara del sabato pomeriggio con PSG Pavia inizia in modo farraginoso, le ragazze sembrano avere ancora poca intesa e sicurezza commettendo diversi errori punto soprattutto in ricezione. Nonostante le avversarie non sembrino particolarmente insidiose in attacco riescono a prendere un discreto vantaggio, poi ricucito con alcune rotazioni ma non sufficiente a vincere il set. Si riprendono nel secondo set le Senaghesi anche se ancora piuttosto appesantite nei movimenti e reattività e riescono ad impattare. Il Tie Break ci vede ancora punto a punto ma è Pavia a spuntarla. Prima sconfitta ma almeno un punto preso e parziali molto ravvicinati.\nLa seconda gara con Aspes vede le ragazze più decise anche se, apparentemente, la fisicità delle avversarie è superiore dal punto di vista tecnico non c’è confronto. Senza troppi patemi le nostre atlete si aggiudicano la gara con un secco 2 a 0. La giornata del sabato si chiude qui.\nSi arriva alla domenica mattina con solita levataccia, gara con inizio alle 09.30 e avversaria la squadra di casa di opera. In gioco c’è il passaggio alle semifinali. Le ragazze ci tengono a far bene con la squadra di casa ed in effetti, a parte qualche temporaneo black out da sistemare, si impongono con decisione con un altro 2 a 0. Per capire se il passaggio è come prima o seconda del girone (e quindi quale orario per partita successiva) si dovrà attendere l’esito di PSG Pavia vs Aspes.\nPavia, come previsto, vince ma il coefficiente punti fatti e punti subiti è nettamente a vantaggio di Senago che si qualifica come prima classificata ed incontrerà la seconda dell’altro girone, una delle tante squadre del consorzio Vero Volley che nasce dall’unione di Cistellum Cislago e Venegono.\nAnche la semifinale con il Vero Volley Varese ha qualche sussulto negativo con rimonte concesse alle avversarie ma viene chiusa con un altro 2 a 0 a favore del PGS per il salto direttamente in finale ancora con il PSG Pavia.\nQuesta volta le nostre atlete non si fanno sorprendere e, nella stanchezza generale, hanno nettamente la meglio sulle avversarie che le avevano battute nel primo incontro.\nIl trofeo U18F Città di Opera va alla PGS Senago. Bravissime le ragazze che hanno saputo comunque tenere una certa concentrazione, cosa non facile in questi tornei con tante partite e lunghe pause.


Petizione · ZTL gratis per i residenti del Centro Storico, firma anche tu! · Change.org\nMatteo Costantini ha lanciato questa petizione e l'ha diretta a Sindaco di Roma e a 1 altro/altra\nL'aumento spropositato delle tariffe per i permessi ZTL non ha alcuna giustificazione, se non quella di costituire l'ennesima nuova tassa sulle spalle dei residenti del Centro Storico.\nGli abitanti del primo municipio sono già vessati dalla mancanza cronica di parcheggi, carico e scarico merci selvaggio, rumori fino a tarda notte e come se non bastasse ora dovranno pagare fino ad un massimo di 2.000 mila euro l'anno, semplicemente per raggiungere la propria abitazione!!\nLa lista civica Uniti x il Centro Storico si è sempre battuta contro l'introduzione di questa ennesima gabella, raccogliendo con Matteo Costantini, candidato Presidente del I Municipio, oltre 300 firme in pochi giorni.\nAvendo riscontrato una totale indisponibilità da parte dell'allora Assessore alla Mobilità, Guido Improta, nel rivedere le tariffe per i permessi ZTL, la nostra candidata Letizia Tavella ha proceduto quindi a predisporre un ricorso al TAR del Lazio contro la delibera del Comune di Roma, che verrà discusso nei prossimi giorni. Gli aggiornamenti sul ricorso saranno pubblicati sul nostro sito www.Unitiperilcentrostorico.it\nSindaco di Roma, Assemblea Roma Capitale: ZTL gratis per i residenti del Centro Storico, firma anche tu!\nMatteo Costantini ha bisogno del tuo aiuto con la petizione "Sindaco di Roma, Assemblea Roma Capitale: ZTL gratis per i residenti del Centro Storico, firma anche tu!". Unisciti con Matteo ed 6 sostenitori più oggi.


Il Carnevale di Viareggio pronto a sfilare, Ciuoffo: "Un'iniziativa culturale unica" - Dettaglio notizia - Toscana Notizie - Regione Toscana\nSono passati 146 anni da quando tutto è nato nel lontano 1873 e continua a piacere, perché popolare ma moderno. Alla presentazione di Firenze c'erano – e non potevano mancare – le storiche maschere di Burlamacco e Ondina. E c'era la voce ufficiale del Carnevale, Daniele Maffei. Il primo appuntamento in strada di quest'anno sarà il 9 febbraio: le altre date sono il 17 e 23 febbraio, il 3 e 5 marzo, quattro giorni e una notte, cinque settimane in cui ai cortei con i grandiosi carri in carta pesta si accompagneranno – ricorda l'assessore alla cultura del Comune, Sandra Mei - le feste notturne, gli spettacoli pirotecnici, la rassegne teatrali e gli eventi gastronomici.\nSui viali a mare della città si potranno ammirare nove carri di prima categoria - quelli giganti, alti venti metri e larghi dodici - cinque di seconda categoria, nove mascherate di gruppo e nove maschere isolate create dalle ‘promesse'. A giudicarli saranno cinquanta giurati, che vengono da tutta Italia ed anche dall'estero e i cui nomi saranno svelati solo ad edizione conclusa. Tra le presenze attese quella di Carla Fracci, grande étolie a cui andrà uno dei riconoscimenti pensati per le donne che nel mondo si sono distinte.\nTag: carnevale di viareggio, carnevale, viareggio\n05/02/2019 - Il Carnevale di Viareggio 2019 omaggia le donne - VIDEO


Worlds First Game per PC reso disponibile su iTunes App Store [News] / Gaming | Notizie dal mondo della tecnologia moderna!\nWorlds First Game per PC reso disponibile su iTunes App Store [News]\nApple ha appena rilasciato il primo gioco per PC, Donkey, come app per iPhone / iPad. Bill Gates è accreditato di molte grandi cose e ha rivoluzionato il personal computer in molti modi. Si potrebbe dire che è in gran parte responsabile di portare il computer di casa alle masse. Una cosa per la quale non è spesso noto è essere l'uomo responsabile del primo gioco per PC, ma in realtà lo è. Quel gioco si chiamava Donkey e veniva distribuito gratuitamente nelle prime versioni di DOS. Ora è disponibile su iTunes App Store per $ 0,99.\nBill Gates e un amico hanno codificato questo gioco alle 4 del mattino di una notte del 1981. Hanno usato un prototipo di computer IBM, e il risultato finale è ben ... interessante. Non è un gioco super avanzato, e non necessariamente regge bene nel tempo, ma è divertente da controllare, solo per il viaggio nel dimenticatoio.\nLa premessa di Donkey è semplice. Guidi una super macchina lungo una strada e cerchi di evitare un asino. Ovviamente, non si accumula con giochi di fascia alta come NOVA e Modern Combat, ma è certamente un viaggio interessante nella storia. Chissà; se non fosse per questo gioco, i videogiochi così come li conosciamo potrebbero non esistere, e personalmente non vorrei vivere in un mondo senza videogiochi.\n« Il primo Google eBook Reader al mondo per gli scaffali dei negozi 17 luglio [News] WorldsBiggestPacMan Enorme collezione di mappe di PacMan per giocare a Pac-Man »