புரதம் பகுத்தெடுத்தல்

புரதக் கூழ்ம மின்புல புரைநகர்ச்சி

புரத குறியீட்டு சாயம் (Sample buffer)

திரிசு- எச்.சி. இல்.( Tris-HCL)- 62.5mM

எசு.டி.எசு (SDS)- 2%

கிளிசரால் (Glycerol)- 10%

டி.ரி.ரி (DTT)- 50mM

புரோமொபினால் புளு (Bromophenol blue) அல்லது பினால் ரெட் (Phenol Red)= 0.01%

பெயர்வு இடைமம் (Transfer Buffer)

pH-8.5

திரிசு பேசு (Tris base)- 25mM

கிலைசின் (Glycine) 0.2M

மெத்தனால்- 20%

திரிசு பேசு- 24.2g

உப்பு - 80g

1 litter (pH: 7.6) பாவிக்கும் போது 1X ஆக மாற்றப்பட வேண்டும்

கொழுப்பற்ற உலர்ந்த பால்(Nonfat Dry Milk) அல்லது போவைன் சீரம் அல்புமின் (Bovine Serum Albumin)

தடுக்கும் இடைமம் (Blocking Buffer)

1X TBS.

0.1% Tween மற்றும்

5%- கொழுப்பற்ற உலர்ந்த பால் or போவைன் சீரம் அல்புமின்

அலசும் இடைமம் (Washing Buffer)

1X TBS.

0.1% Tween

வெசுட்டர்ன் படிவு காணும்பொருட்கள் (Western Blot Detection System)

இரண்டாவது எதிர்- எதிருடல் மற்றும் இதனுடன் இணைக்கப்பட்ட Horesradish peroxidase (HRP)(secondary anti-rabbit antibody conjugated with HRP)(முதனிலை எதிருடல் எவ்வகை உயிரினத்தில் பெறப்பட்டதை பொருத்து இரண்டாம் நிலை எதிருடல் அமையும். சில வேளைகளில் முயல், கழுதை, குதிரை அல்லது எலி போன்றவற்றில் இருந்து உண்டாக்க்கப்பட்ட இரண்டாம் நிலை எதிருடல் பாவிக்கப்படும்).

எதிர்-பயாட்டின் எதிருடல் மற்றும் இதனுடன் இணைக்கப்பட்ட Horesradish peroxidase (HRP)- (anti-biotin antibody conjugated to HRP)

மிளிரும் வேதிபொருள்கள் மற்றும் பெரோசிடு - LumiGLO chemiluminescent reagent and peroxide

முன் சாயமிட்ட புரத அளவிகள் (prestained protein marker)

சவ்வு: நைட்ரோ செல்லுலோசு அல்லது பி.வி.டி.எப். (Nitrocellulose or PVDF)

தேவையான நுட்பம் மற்றும் பொருட்கள்:
இரண்டாம் நிலை எதிருடல் - Secondary Antibody
வெளி இணைப்பு
புரதம் பிரித்தெடுத்தல்: