Reaksi ini dikatalisis oleh enzim serine palmitoyl transferase dan merupakan langkah pembatasan laju jalur. Pada gilirannya, 3-keto-dihydrosphingosine direduksi menjadi dihydrosphingosine, yang kemudian diikuti oleh asimilasi oleh enzim (dihydro) ceramide synthase untuk menghasilkan dihydroceramide. Reaksi akhir untuk menghasilkan ceramide dikatalisis oleh dihydroceramide desaturase. De novo sintesis ceramide terjadi di endoplasmic reticulum. Ceramide kemudian diangkut ke sistem vesikula dengan mengangkut ceramide atau protein ceramingolipid spingolipid.
(dihydro) ceramide sintase