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  当父亲阿尔布雷希特一世当选为罗马人民的国王,身为长子的鲁道夫被任命为奥地利及施蒂里亚公爵与父亲共治,是为鲁道夫三世。1300年5月25日,阿尔布雷希特一世为鲁道夫迎娶法国国王腓力三世的女儿布朗歇,希望与法国的卡佩王朝联盟,但是因鲁道夫及布朗歇(死于1305年)两夫妇皆早逝而失败。  1306年,波希米亚的普热米斯尔王朝最后一位君主温塞斯拉斯三世被杀,阿尔布雷希特一世为求增加哈布斯堡王朝的影响力,将波希米亚王国收归为王室的领地,将鲁道夫捧成波希米亚王位的觊觎者,但是遭受其舅父克恩滕的亨利反对,因为亨利的妻子是温塞斯拉斯三世的妹妹波希米亚的安妮,亨利认为自己更适合继承王位。阿尔布雷希特一世因此为鲁道夫一世娶了波希米亚前国王温塞斯拉斯二世的遗孀、皮雅斯特王朝普热梅斯瓦夫二世的女儿伊丽莎白为妻。阿尔布雷希特一世占领布拉格,赶走克恩滕的亨利,接着将波希米亚王位交给鲁道夫一世。  鲁道夫一世受到数码支持克恩滕的亨利的波希米亚贵族排斥及嘲笑。虽然鲁道夫一世围攻反对派的城堡霍拉日焦维采,但是他却因患上痢疾而于1307年死于当地,死后无嗣。鲁道夫一世被葬于布拉格的圣维特主教座堂。

  其后,波希米亚贵族重新拥立克恩滕的亨利为波希米亚国王以获得更多特权。三年后,亨利又宣布放弃王位,传位给神圣罗马帝国皇帝亨利七世之子卢森堡的约翰。另一方面,为鲁道夫一世争取采邑激化了哈布斯堡王朝内部为了继承权所发生的矛盾。阿尔布雷希特一世的侄儿士瓦本的约翰因阿尔布雷希特一世一直没有执行莱茵费尔登条约内对鲁道夫二世的补偿条款,剥夺了他的继承权,所以于1308年杀害了阿尔布雷希特一世。
鲁道夫一世(1281年-1307年-7月3日)哈布斯堡王朝的奥地利及施蒂里亚公爵(1298年-1307年在位)为鲁道夫三世、波希米亚国王(1306年–1307年在位)、及名义上的波兰国王(1306年–1307年在位)。鲁道夫一世是罗马人民的国王阿尔布雷希特一世的长子。