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  彼得·帕克自从被恋人玛莉珍·华生发现自己的「蜘蛛人」身份后,如今跟她交往三年而准备向她求婚。就在玛莉珍刚在百老汇剧院初演完成后,彼得和她在中央公园里赏流星雨时,未注意到一颗小型陨石落至他们附近。陨石中附有的外星黑色共生体,爬上彼得的摩托车跟着他回家。哈利·奥斯本得知彼得是蜘蛛人后决心为父报仇,通过父亲遗留的科技和配方增强体能、继承父亲的绿恶魔身份。他搭乘滑翔翼袭击回家途中的彼得,经历街巷的一番斗争后被水管撞击头部至昏迷,被彼得送医清醒后患上失忆症,忘记彼得是蜘蛛人等相关记忆。与此同时,一位刚越狱的逃犯佛林特·马可,回家见他身患绝症的女儿潘妮一面,随后继续逃亡却不慎掉进实验重地,受粒子加速器实验影响而身体发生分解,跟周围的沙子融合后变成能自由变形的「沙人」。  彼得化身蜘蛛人营救即将坠楼的大学同学关·史黛西,使她在庆祝活动上公然感谢蜘蛛人并当众吻他,这让玛莉珍感到生气与不解。远处,获得控制沙子能力的马可袭击一辆运钞车,希望能将其作为女儿的治疗费,彼得前去干预时因未预估他的能力,虽然救下运钞车却也让马可逃跑。后来,关的父亲兼纽约市警察队长乔治·史黛西向彼得和梅婶汇报说,马可才是五年前抢车并枪杀班叔的真凶,而抢钱的抢劫犯 (漫威漫画)只是帮凶。愤怒的彼得收听警用频道追寻马可过程中,共生体偷偷爬入穿着蜘蛛人战服的彼得身上,跟其混合后将战服变为黑色并增强彼得的实力。然而,共生体同时黑化彼得的善良心灵,使他着装黑战服跟着抢完钱的马可至下水道。得知水是马可的弱点后,彼得打开水管将马可分解并冲走,认为他已为班叔报完仇。  玛莉珍的演艺事业一落千丈,失落之下找出院的哈利独处乃至亲吻,最后她不想背叛彼得而离开。受打击的哈利因此恢复记忆,在父亲幻觉督促下继续他的复仇,以彼得的性命来威胁玛莉珍忍痛跟他分手。在听完玛莉珍分手是因为“爱上某人”后,彼得发现是哈利搞鬼而换上黑战服,跑到哈利的顶层公寓跟他一决高下。彼得击败哈利后讽刺他父亲从来没有爱过他,当哈利扔出一颗南瓜炸弹时,彼得将其扔回去使哈利被炸伤而毁容。与此同时,彼得发现他在《号角日报》的竞争对手摄影师艾迪·布洛克,在报纸上发表一张经过电脑合成而伪造的“蜘蛛人偷窃”之照片。他来到报社以确凿证据公开艾迪的造假行为后,总编J·乔纳·詹姆森愤怒地将艾迪开除并发表更正声明;一切顺心让彼得认为这件黑战服是天赐。同时,马可成功克服怕水弱点,存活下来并逃出下水道。  为了让玛莉珍嫉妒,彼得将关约至玛莉珍如今工作的夜间俱乐部,当关领略到彼得的企图后便离开,而彼得因为在夜店里的小争执,无意间打到玛莉珍。彼得霎那间发现自己变得残暴无常,在教堂顶上为了摆脱共生体,利用教堂钟声的强大声波来干扰共生体且将其撕下来。这时,身败名裂的艾迪来到教堂里祈祷能杀死彼得时,听见彼得的喊声后来到钟下方,不仅注意到彼得是蜘蛛人、还跟落下来的共生体融合后变成邪恶的「猛毒」。艾迪随后找到马可来提出合作,杀死蜘蛛人来达到各自的目的,他随后绑架玛莉珍、在一座建筑工地高楼上布下黑色蜘蛛网,而底下由变成沙子巨人的马可负责看守。  由于哈利拒绝帮他,彼得只好独自上阵,在一对二的情况下完全无力招架。就在彼得几近被打死之际,哈利从曾经处理过父亲遗体的管家伯纳德口中得知,自己父亲死因其实是咎由自取,在觉醒之下搭滑翔翼及时赶到与彼得携手对敌。彼得对抗猛毒途中,哈利发射导弹使马可散架,随后跟彼得一起救下玛莉珍。但猛毒几乎能以一敌二,当猛毒捡起哈利的滑翔翼刀刃刺向彼得时,哈利跳过去为彼得挡下刀而受致命伤。彼得找准时机用多根铁柱将猛毒罩住,通过敲打出高音声波来让艾迪脱离共生体。当彼得准备用南瓜炸弹消灭猛毒时,艾迪不情愿让牠毁灭而自行跳过去,最后跟共生体一起炸成灰烬。  恢复人形的马可向彼得陈述五年前的实情,解释道班叔在被他抢车时一度劝过他住手而使他动摇,后来被抢完钱的搭档丹尼斯用手推一下,才导致他手里的枪意外走火杀死班叔。马可表示他五年来都因这件事备受煎熬,如今只想救他的女儿,彼得最终原谅马可,让马可化为沙子离去。重伤的哈利临死之际,跟彼得释尽所有前嫌且证明他们的友情,最后死在彼得和玛莉珍面前。哈利被誉为英雄后被安葬,彼得、玛莉珍、梅婶、关和管家伯纳德等人均出席。葬礼过后,彼得和玛莉珍在夜店里正式和解,两人跳着舞并相拥。

  烂番茄新鲜度63%,基于254条评论,平均分为6.2/10,而在Metacritic上得到59分,IMDB上得6.2分,评价两极。

  由于商业原因,《蜘蛛侠3》在2007年5月1日全球公映。全球总票房为8.908亿美金。  北美方面,零点首映票房为1000万美金,首日的票房收入为5984万美金,打破《神鬼奇航2》的5580万美金票房。首周票房并创下1.51亿美金票房。最终总票房为3.36亿美金票房。  在日本和韩国,此电影的首日票房都超越了《蜘蛛侠2》。《蜘蛛侠3》在香港、台湾、东南亚等地方也创下首日票房新高。其中香港的开画日收入为738万港元。  台湾方面,首日票房为新台币3300万元;最终全台票房为新台币2.48亿元。
《蜘蛛人3》(英语:Spider-Man 3)是一部2007年上映的美国超级英雄电影,由史丹·李和史蒂夫·迪特科所创作的漫画《蜘蛛人》所改编。电影是蜘蛛人系列电影的第三部作品,为2004年电影《蜘蛛人2》的续集,同时作为该系列的最终作。电影继续由前两部导演山姆·雷米执导,由陶比·麦奎尔、克莉丝汀·邓斯特、詹姆斯·法兰科、萝丝玛莉·哈里斯和J·K·西蒙斯主演,这次加入汤马斯·海登·乔许、陶佛·葛瑞斯、布莱丝·达拉斯·霍华和詹姆斯·克伦威尔饰演新角色。