Prospero Colonna átti stóran þátt í sigur Spánverja við Cerignola
(1503), sem gaf Spáni lyklana að Napólí. Eftir dauða Alexander VI gat hann einnig tekið aftur svæði sín í Lazio. Hann skipaði léttum riddara í Garigliano-baráttunni.