Elísabet fæddist í Greenwich-höllinni og var nefnd eftir ömmum sínum, Elísabet af York og Elísabet Howard. Hún var annað barn Henriks 8. sem fæddist innan hjónabands til að lifa af barnæsku. Móðir hennar var Anna Boleyn, önnur eiginkona Henriks. Við fæðingu hennar var Elísabet líkleg erfingja Englandstrónu. Eldri hálfsystur hennar, María, hafði misst stöðu sína sem lögmætur erfingur þegar Henriks aflýsti hjónaband sitt við móður Maríu, Katrinu frá Aragón, til að giftast Anne, með það í huga að eignast karlkyns erfingja og tryggja Tudor-ættinn. Hún var skírð 10. september 1533.
Boleyn