Gluconeogenesis muuttaa pyruvaatin glukoosi-6-fosfaattiin useiden välituotteiden kautta, joista monet ovat yhteisiä glukoosian kanssa. Gluconeogenesis ei kuitenkaan ole glykolyysin käänteinen polku, sillä useat vaiheet katalysoidaan ei-glykoosien glukoosien entsyymillä. Tämä polku on tärkeä, koska se sallii glukoosin muodostumisen ja hajoamisen, eikä se estä molempia polkuja toimimasta yhtäaikaisesti. Vaikka glukoosi on rasvahappojen, laktaattien, glyserolin, glyseraattien 3-fosfaatin ja aminohappojen yhdisteistä, glukoosiin syntyvä glukoosi voidaan siirtää monoksidien tai sitruunahappojen, kuten glukoosiin tai sitruunahappojen monoksidien tai sitruunahappojen kautta. Kyseinen polku voi tapahtua monoksidien tai sitruunahappojen, kuten glukoosiin tai sitruunahappojen avulla.
selkärankaisten on tuotettava ketonielimitä rasvahappoista glukoosin korvaamiseksi kudoksissa, kuten aivoissa, jotka eivät voi metaboloida rasvahappoja