François de La Trémoïlle'n vanhin poika, Ludvig III (1521-1577), oli ensimmäinen perheestään, joka sai herttuan aseman, kun Kaarle IX myönsi hänelle tämän kunnian vuonna 1563. Hänen poikansa ja Jeanne de Montmorency, Claude (1566-1604), nosti herttuakunnan pariksi vuonna 1595, vaikka se ei ollut rekisteröity perinnölliseksi "parlamentissa" ennen vuotta 1599. Hän oli kääntynyt protestanttiseksi ja taisteli hugenoottien puolella Ranskan uskonsotien aikana Coutrasin taisteluissa vuonna 1587.
Vuonna 1590 ja Fontaine-Françaisessa vuonna 1595 sekä Pariisin ja Rouenin piirityksissä. Vuonna 1598 hän meni naimisiin Charlotte Brabantine of Orange-Nassaun (1580-1631) kanssa, joka oli protestanttisen hollantilaisen johtajan Vilhelm Hiljaisen tytär. Clauden sisar Charlotte Catherine de La Trémoille (kuo. 1619), meni naimisiin Henri I de Bourbon, prinssi de Condén (1552-1588) kanssa vuonna 1586, mutta kun hän kuoli äkillisesti kuusi kuukautta ennen heidän ainoan poikansa syntymää syyskuussa 1588, hänet vangittiin epäiltynä siitä, että hän oli myrkyttänyt miehensä estääkseen lapsen hylkäämistä äpäränä, vaikka kuningas tunnusti lapsen "premier prince du sangiksi" ja kruununperilliseksi, kunnes hänen oma poikansa, tuleva Louis XIII, syntyi vuonna 1601.