9. helmikuuta 1941 Iachino johti italialaista laivastoa epäonnistuneessa takaa-ajoon Englannin H-joukkojen kimppuun, jotka olivat pommitelleet Genovan ja La Spezian. Hän komensi Italian taistelukoneistoa Matapanin mysän taistelussa.
Hän lähetti koko 1. risteilijädivisioonan pelastamaan risteilijä "Pola", mikä johti koko divisioonan hävittämiseen amiraali Andrew Browne Cunninghamin Välimeren laivaston kolmella taistelulaivalla. Hänen toimintansa taistelussa on ollut paljon kritiikin kohteena siitä lähtien; huolimatta tästä, Iachino ei vapautettu komennosta.