La generació de glucosa a partir de compostos com el piruvat, el lactat, el glicerol, el glicerat 3-fosfat i els aminoàcids s'anomena gluconeogènesi. La gluconeogènesi converteix el piruvat en glucosa-6-fosfat a través d'una sèrie d'intermediaris, molts dels quals es comparteixen amb la glicólisi. Tanmateix, aquesta via no és la glicólisi inversa, ja que diversos passos són catalitzats per enzims no glicolítics.
Els vertebrats necessiten produir cossos cetònics dels àcids grassos per reemplaçar la glucosa en teixits com el cervell que no poden metabolizar els àcids grassos