Prima versiune operațională a fost B-52B, care a fost dezvoltată în paralel cu prototipurile încă din 1951. A zburat pentru prima dată în decembrie 1954, B-52B, AF Serial Number 52-8711, a intrat în serviciu operațional cu 93rd Heavy Bombardment Wing (93rd BW) la Castle Air Force Base, California, pe 29 iunie 1955. Aripa a devenit operațională pe 12 martie 1956. Formarea pentru echipajele B-52 a constat în cinci săptămâni de școală la sol și patru săptămâni de zbor, acumulând 35 până la 50 de ore în aer. Noile B-52B au înlocuit B-36 operaționale pe o bază una-la-una.
Baza aeriană Castle