Prima misiune de luptă, Operațiunea Arc Light, a fost efectuată de B-52F la 18 iunie 1965, când 30 de bombardiere ale escadrilelor 9 și 441 au lovit o fortăreață comunistă în apropierea districtului Bến Cát din Vietnamul de Sud. Primele bombardiere au sosit prea devreme la un punct de întâlnire desemnat și, în timp ce manevrează pentru a menține stația de raid, două B-52 s-au ciocnit, ceea ce a dus la pierderea atât a bombardierilor, cât și a celor opt bombardieri implicați.
30 de