Escribe unha continuación para este parágrafo - O duque Rannucio I morreu o 5 de marzo de 1622. O seu irmán menor, o cardeal Odoardo, actuou como rexente do ducado de Parma en nome do seu sobriño de 10 anos e novo duque Odoardo. A morte do cardeal en febreiro de 1626 permitiu a Margarita, agora duquesa viúva, converterse na nova rexente do seu fillo. Os seus 2 anos de regencia transcurriron durante a Guerra dos Trinta Anos; logrou manter a estabilidade no Ducado, observando a neutralidade. Na guerra da sucesión de Mantua
Ela apoiou a Carlos Gonzaga, Duque de Nevers, que se converteu no seguinte Duque de Mantua e Montferrato.