A klub 1965-ben két profi klub, a Sportclub Enschede és az Enschedese Boys egyesítéseként alakult. Az egyik ilyen előd, az SC Enschede, 1926-ban egy holland bajnokságot is megnyert. A klub első sikerei az 1965-ös egyesülés után kezdődtek, az innovatív edző Kees Rijvers alatt. A Twente 1969-ben harmadik lett, 1970-ben negyedik, 1971-ben ötödik, 1972-ben harmadik és 1973-ban ismét. A csapat kulcsfigurái helyi hősök voltak, mint például Epi Drost, Eddy Achterberg, Theo Kick van der Vall és Pahlplatz. Legjobb Eivredisie szezonjuk az 1973/74 volt, amikor a Twente a holland bajnokságért küzdött a Feyenoorddal.
1965-ben