النيوكليازات هي أنزيمات تقطع خيوط الحمض النووي عن طريق تحفيز هيدروليز الروابط الفوسفوديسترية. النيوكليازات التي تحلل النيوكليوتيدات من أطراف خيوط الحمض النووي تسمى النيوكليازات الخارجية، في حين أن النيوكليازات الداخلية تقطع داخل الخيوط. النيوكليازات الأكثر استخدامًا في علم الأحياء الجزيئية هي النيوكليازات التقييدية، والتي تقطع الحمض النووي في تسلسلات محددة. على سبيل المثال، إنزيم EcoRV الموضح على اليسار يعرف تسلسل 6 قواعد 5 '-GATC-3' ويقطع على الخط الأفقي. في الطبيعة، تحمي هذه الأنزيمات البكتيريا من عدوى الفايج عن طريق هضم الحمض النووي الفايج عند دخول الخلية البكتيرية، كجزء من نظام التقييد. في التكنولوجيا، تستخدم هذه النيوكلي
تسلسل 6 قواعد 5′-GATATC-3