
Hindi: 
इस पाठ्यक्रम में
आपका स्वागत है कार्यात्मक
(functional) जीनोमिक्स (genomics),
आप पिछले व्याख्यान
में जानते हैं कि
हम जीनोम संपादन
उपकरण (genome editing tools) कैसे
हैं के बारे में चर्चा
कर रहे हैं।

English: 
Welcome back to this course functional genomics
you know in the previous lecture we have discussing
about how the genome editing tools have really
helped us to engineer the genome you know
in wide variety of species So we are going
to continue the discussion and see what are
the other ways by which you are able to engineer
the genomes right
So what is shown here in this slide is some
of the approaches people have used to create
you know or engineer the genome We discussed
the cranes and which what is it leave us described

Hindi: 
वास्तव में आपने
हमें जीनोम (genome) की
इंजीनियर बनाने में
मदद की, जिसे आप विभिन्न
प्रकार की प्रजातियों
में जानते हैं।
इसलिए हम चर्चा जारी
रखने जा रहे हैं और
देखें कि वे कौन से
अन्य तरीके हैं जिनसे

English: 
in in the bacteria of bacteria forge or bacterium
system and how that can be used for you know
deleting the genes in the mouse and then we
came and looked at the hybrid restrictions
enzyme is called as a reference and then we
looked at the recent development that is CRISPR
- CAS9 and then we also discussed how this
CRISPR-CAS9 has helped in editing the genome
at least as a clinical trial in humans right
There are many other such advancements some
of them we are going to discuss today or the
following
One is in early 1986 people have you know
started engineering the plant genome and that
is done probably you know it is covered widely
in your text book called the you know the
TI Vector and so on So it is kind of a uhhh
delivery vehicle like the way we have used
plasmid and these are agro bacterium which
are able to infect the introduce the DNA into
the plant cells at least in the culture then
we can you know grow a plant out of it

English: 
That are the very first step in introducing
the DNA into the plants but now we have a
variety of you know approved by which you
are able to you know kind of engineer the
genome or affect the way the genome functions
One such very tall discovery that led to the
noble price was called as RNAi or RNA interference
which was first introduced in studying the
gene function in a very popular model system
called Celegans it is a worm is a nematode
caenorhabditis elegans
And people have used this model to understand
how the development takes place and how the
genes regulate development So this is called
as RNAi because you create a kind of a short
RNA that that can affect the function of a
given gene right and then of course very similar
powerful tool has come especially in again
understanding the development of another model

Hindi: 
आप जीनोम (genome) को सही
करने में सक्षम हैं।
तो इस स्लाइड में
यहाँ जो दिखाया गया
है, कुछ ऐसे दृष्टिकोण
हैं जिनका उपयोग
लोग आपको जानने के
लिए करते हैं या जीनोम
(genome) को इंजीनियर करने
के लिए करते हैं।
हमने cre एंजाइम पर
चर्चा की और जिसे

English: 
system zebra-fish which is called as the morpholinos
and both these systems have not restricted
its applicability only to this systems But
you know you can go and use it in wide variety
of systems and that is something that we are
going to discuss
Let us first look into how this RNAi system
functions So the RNAi is you know a way by
which you are able to silence a gene when
I say silence it is not that you are preventing
the expression of the gene but you are doing
something that equivalent to almost the gene
is not being expressed So the way we do is
we use RNA to interfere in the function of
the gene and and its you know as it is known
as RNA interference so in short people call
as RNAi so what is that so this is one of
the mechanism by which our own system is able
to regulate the half -life of a variety of
mRNA

Hindi: 
मूल रूप से बैक्टीरिया
बैक्टीरियोफेज (bacteria
bacteriophage) या बैक्टीरियल
सिस्टम (bacterial system) में
वर्णित किया गया
था और इसका उपयोग
आप माउस में जीन (gene)
को हटाने के लिए कैसे
किया जा सकता है और
फिर हमने हाइब्रिड
प्रतिबंध एंजाइम
(hybrid restrictions enzyme) को देखा

English: 
For example you know for everything you know
if you look into the system if you have driven
a two wheeler or a four wheeler which are
automobiles you have you know what is called
as a gear box you know you change the gear
then you accelerated you are able to go fast
So whenever you need you can go fast or you
need more power then you go to you know shift
to gear one or two and then you are able to
give more power at the same time you have
another system to break to stop the vehicle
So you have to have all these controls exactly
the same way the cell is able to regulate
the gene when you have more amount of protein
for a given gene how do you do it There are
various ways one you can make the gene to
make more copies of the RNA so in a given
say one minute you make hundred copies of
messenger RNA right this is one way The other
way is let the mRNA stay for longer therefore
they can make more amount of protein because

Hindi: 
और देखा, जिसे ZFN कहा
जाता है और फिर हमने
हाल के विकास को देखा
जो कि CRISPR - CAS9 है और
फिर हमने इस पर भी
चर्चा की कि कैसे
इस CRISPR-CAS9 ने जीन (gene)
को कम से कम मनुष्यों
में नैदानिक परीक्षण
के रूप में संपादित

Hindi: 
करने में मदद की है।
ऐसी कई अन्य प्रगतिएं
हैं जिनमें से कुछ
पर हम आज या निम्नलिखित
पर चर्चा करने जा
रहे हैं।
1986 की शुरुआत में है
जब आप जानते हैं कि
लोगों ने प्लांट
जीनोम (genome) की इंजीनियरिंग

English: 
everything has a half-life The RNA has a half-life
the protein has a half-like so you make the
RNA to live longer therefore even with hundred
you know RNA you are able to make more proteins
because this is another way of doing
So exactly the similar mechanism can be used
to regulate it You have made RNAs and RNA
are being converted into proteins but now
we have to shut it down We do not want protein
to be there so what we can do we can degrade
the protein or we can make it inactive but
if even if you do that if RNA is there it
is going to continue to make the protein right
So what way you can do that even if you shut
down the gene the RNA is going to be there
so what way we can do we have to degrade the
RNA
So how will you make it specific only certain
RNA are degraded and so on Our system has
you know small RNAs which go and target a
given set of messenger RNAs and that targeting

English: 
meaning it identifies sequence it goes on
binds and help the system to degrade those
RNA that have the complimentary sequence so
that is what is called as microRNAs or miRNAs
that are present in our system that is show
in the schematic
So you have these RNAs called as the miRNA
or microRNA which are you know single stranded
RNA that are obviously which are made but
they have sequence that are complimentary
so therefore they can fold back from such
kind of base pairing like a loop and these
come out of the nucleus to the side of the
side of the plasmid where there are enzymes
like dicer and risk complex and many other
which we can look into the details when we
share the you know links for you which you
know sort of cleaves them and make small segment
of RNA like what you see here
So these 20-25 base sequences you know go
and bind to most often the un-translated region

Hindi: 
शुरू कर दी है और संभवत:
आपको पता है कि यह
आपके टेक्स्ट बुक
में व्यापक रूप से
शामिल है जिसे आप
टाय (Ti) वेक्टर (Vector)
और इतने पर जानते
हैं।
तो यह डिलीवरी वाहन
की तरह है जैसे हमने
प्लास्मिड (plasmid) का
उपयोग किया है और

English: 
of the you know RNAs messengers the 3prime
un- translated so when they go and bind they
have two distinct function One for example
now when they bind like this something like
what is shown in here now this can result
in you know the translation arrest now the
RNA is not being translated The RNA is there
but they are not allowed to translate the
cell now gets the messenger kind of message
that when this microRNA comes when they are
cleaved and small RNAs are being made
And they go and bind and then prevent the
uhh translation of the protein so we are able
to block the translation the other you know
function of these such uhh RNAs whenever there
is the complementarity between the short RNA
and the target mRNAs large like what is shown
here extensive then what happens that it goes
and forms this kind of a duplex with the RNA

Hindi: 
ये एग्रो जीवाणु
(agro bacterium) हैं जो कम से
कम संस्कृति में
डीएनए (DNA) को पौधों
की कोशिकाओं में
प्रवेश करने में
सक्षम हैं तो हम आपको
पता कर सकते हैं कि
इससे एक पौधा विकसित
हो सकता है।
यह पौधों में डीएनए
(DNA) को शुरू करने के

English: 
and then you have of course enzymes which
go and recognise this as duplex and then degrade
the RNA
So mRNA is being degraded so this is the way
you can do that so what people have done is
that you look for you know RNAs that you can
make something like this for a given gene
and introduce inside the cell or animal and
then using our own machinery to degrade the
RNA you can degrade the RNA that you want
to degrade therefore the cell is almost like
not having the protein so the only difference
in here is there is not that the knock down
what do you call here that is by degrading
the messenger It is not 100 percent right
it can be 50 percent 60 percent 80 percent
90 percent but never be 100 percent but still
it is good enough because even if you have
depleted a cell of a given protein up to 90
percent that is almost not having that protein
So we can see a given phenotype so that is
the advantage of the system so what is interesting

Hindi: 
लिए पहला कदम है, लेकिन
अब हमारे पास आपके
लिए विभिन्न प्रकार
के दृष्टिकोण हैं,
जिनके द्वारा आप
जीनोम (genome) के प्रकारों
को जान सकते हैं या
जीनोम (genome) के कार्यों
को प्रभावित कर सकते
हैं।
इस तरह की एक बहुत
लंबी खोज जिसके कारण

Hindi: 
उच्च मूल्य (noble price)
आरएनएआई (RNAi) या आरएनए
(RNA) हस्तक्षेप कहलाता
है, जिसे पहली बार
जीन फ़ंक्शन (gene function)
का अध्ययन एक बहुत
लोकप्रिय मॉडल प्रणाली
में किया गया था, जिसे
सी लेगन्स (C elegans) कहा
जाता है, यह एक कीड़ा

English: 
that you may find is that there are about
you know more than you know thousand genes
that make this mRNA right and they target
about 60 percent of our genes that are there
so it says that the majority of the genes
that we have owns you know RNA Their stability
their half-life whether it is translated or
not translated is regulated by such short
RNA called as microRNA right
So and where are these microRNAs comes from
miRNA comes from They come from a variety
of source it could be simply a small segment
of intron of any other genes which is spliced
out Now we believe normally the textbook says
the intronic region is spliced out but we
never bother about what possible functions
it has It looks like that spliced out RNA
is called also function as a regulatory RNA
and you know its its there are its present
in a wide variety of systems not restrict
to only two humans right

English: 
So that is one information so let us see how
we can do that so we can use the same machinery
you have a machinery in a cell which identifies
such RNA duplex you know short RNA bound to
miRNA therefore it can degrade so what you
need to do is if you can provide the shot
you know RNA inside you are able to you know
regulate the level of that particular messenger
thats what people have done
So one way to do is we can for example make
a plasmid which expresses you know like a
harping loop like in a sequence which are
specific to for example a given gene transcript
right So when you make this and introduce
inside the cell or you make the cells to make
this then the one of his strands that is how
the system functions goes and forms you know
complimentary base pairing with a target RNA
and then off course because it is such kind

Hindi: 
है जो नेमाटोड कैनेहैडाइटिस
एलिगेंस (nematode Caenorhabditis
elegans) है।
और लोगों ने इस मॉडल
का उपयोग यह समझने
के लिए किया है कि
विकास कैसे होता
है और जीन (gene) विकास
को कैसे नियंत्रित
करते हैं।
इसलिए इसे आरएनएआई
(RNAi) कहा जाता है क्योंकि

English: 
of duplex are recognised where the machinery
and they are being removed
So we are using the same machinery that otherwise
regulates the normal function of the gene
So in this way we can target any of this you
can make any of the duplex of the RNA which
is you know RNA at duplex and introduce inside
the organism or the cell The RNAs is targeted
or you can make this kind of construct which
keeps on making such duplex and then you know
the cell is able to degrade the target sequence
right So this again has a wider applicability
because you know for example what is show
here is one of the papers that that as shown
that you know in a given tumor
We can see this is a mouse model with the
tumor that is growing because we can you know
place few cells that have the tumor of genecity
and the tumor grows in the animal so if you
want to really test any other drug that can
regulate or reverse the growth of the tumor
than you can use this model and that is what
they have shown for example you know there

Hindi: 
आप एक प्रकार का छोटा
आरएनए (RNA) बनाते हैं
जो किसी दिए गए जीन
के कार्य को प्रभावित
कर सकता है और फिर
निश्चित रूप से बहुत
समान शक्तिशाली उपकरण
विशेष रूप से फिर
से एक और मॉडल सिस्टम
(model system) ज़ेबरा-मछली

Hindi: 
के विकास को समझने
में आया है जो मॉर्फिलोनोस
(morphilonos) के रूप में कहा
जाता है और इन दोनों
प्रणालियों ने केवल
इन प्रणालियों के
लिए इसकी प्रयोज्यता
को प्रतिबंधित नहीं
किया है।
लेकिन आप जानते हैं
कि आप विभिन्न प्रकार
की प्रणालियों में
जा सकते हैं और इसका

English: 
are two different RNAi construct meaning the
different RNA target they have looked at and
they have delivered this RNAi duplex into
the tumors and they found that if you inactivate
a given gene you know in the system
And the animal is not developing such big
tumor as you have seen otherwise right in
other words if you can target a specific gene
and block its expression using this method
RNAi we are able to control the growth of
the tumor right So it has a tremendous potential
now what it says now you can pack this RNA
duplex into certain chemical capsule like
balls and you can target it to wherever you
have the tumor and if they are delivered there
then that is going to inactivate the genes
by degrading the RNA that are being made as
a result the cell will not grow into tumor
or we can regress
So in this along with other combination of
therapy you will have a better control over

English: 
treatment right so that has the potential
so this is one way we can do The advantage
is that it is very simple we can we can make
we can target any genes that you want because
all you need to make is a small segment of
the RNA whether the duplex or the shRNA that
you make so much easier and it also allowed
people to look at knock down a large number
of genes in fact we have now libraries for
humans all the genes for which you know you
want to study you have libraries of the RNAi
So simply select what you want and you can
knock down and then study This also has application
in other field for example you can engineer
plants to make you know double stranded RNA
for a gene that is not present in the plant
but in the parasites or nematode that infect
plants right
One of the example that is shown here that
is come from our own institute from IIT Kanpur

Hindi: 
उपयोग कर सकते हैं
और यह एक ऐसी चीज है
जिस पर हम चर्चा करने
जा रहे हैं।
आइए हम सबसे पहले
यह देखें कि यह आरएनएआई
(RNAi) सिस्टम (system) कैसे
कार्य करता है।
तो आरएनएआई (RNAi) आप
एक ऐसा तरीका है जिसके

English: 
wherein they have engineered the plants such
that it makes a double stranded RNA for a
gene that is normally critical for the development
of parasitic you know young ones the larwa
forms So they are the one that infect the
plant and what is shown here you can see in
this left side is that this is the root of
a plant which is a heavily infested with the
parasites so the parasites gets in and they
form this no dues and as a result the plant
do not grow well it is the infection
But if you can make the plant to make a double
stranded RNA for you know some of the genes
that are critical for the development of the
worm the nematode the parasites then what
happens even if you now infect the plant with
these nematodes because the nematodes eat
the plant cells for their survival as a result
the double stranded RNA gets into their guts
and that can sort of you know trigger a systemic
you know kind of a silencing of the gene as

Hindi: 
द्वारा आप एक जीन
(gene) को चुप करने में
सक्षम हैं जब मैं
कहता हूं कि मौन यह
नहीं है कि आप जीन
(gene) की अभिव्यक्ति
को रोक रहे हैं, लेकिन
आप कुछ ऐसा कर रहे
हैं जो लगभग जीन (gene)
के बराबर व्यक्त
नहीं किया जा रहा
है।

Hindi: 
तो जिस तरह से हम करते
हैं हम जीन (gene) के कार्य
में हस्तक्षेप करने
के लिए आरएनए (RNA) का
उपयोग करते हैं और
आप इसे जानते हैं
क्योंकि इसे आरएनए
(RNA) हस्तक्षेप के रूप
में जाना जाता है,
इसलिए लोग इसे आरएनएआई

English: 
a result the nematodes do not grow and therefore
the infection is minimized
So these are some of the applications really
powerful applications using the RNAi This
techniques that you spoke about the RNAi and
others uhhh these are you known some of them
that are very specific to the genes because
you want to delete the genes that you want
or mutate a gene that you want or alter the
gene that you want but there are also other
methods people have used uhhh which are not
target specific but phenotype specific meaning
I am looking into a function say for example
vision using Drosophila model
So what I do I expose the fly to a chemical
what is shown here is Ethyl methanesulfonate
EMS they call it and if you expose the animal
to this chemical and this chemical is known

Hindi: 
(RNAi) के रूप में कहते
हैं, इसलिए ऐसा क्या
है यह तंत्र में से
एक है जिससे हमारा
स्वयं का तंत्र विभिन्न
प्रकार के mRNA के आधे
जीवन को विनियमित
करने में सक्षम है।
उदाहरण के लिए आप
जानते हैं कि आप जो

English: 
to cause mutation but normally these are base
changes What happens is chemical especially
with guanine it interacts with and then it
makes what is called as co-ethyl guanine that
the way it is changed as the result what happens
as this gets changed now this G no longer
pairs with G but it can pair with T
So if you have a cell in which such kind of
modification took place and that cell is dividing
then what happens now this ethyl guanine now
sort of mimic the base pairing as if it is
A and the new strand that is being made will
have T in place of you know C so in that way
you are able to change the base and if it
happens to B a region where there is a codon
and the codon is altered then you are going
to have a different amino acid
If this is the reason where you have some
transcription factors you are going to bind
so it may not bind and things like that so
you are creating mutation randomly and you
are going to screen a large number of the
that come out and then look at the phenotype

English: 
and if they have a desirable phenotype like
for example loss of vision then you are going
to look at where this mutation took place
and then you can go back and map you know
the genome right so this is this is other
much simpler method people have used right
So there are ways what we discussed is how
a genetics the forward genetics and then you
have come to genomics we have understood large
number of genes and that now called as the
genomics wherein you know every gene you done
not know what is the function you knock out
and look at the function now what you are
going to do discuss is you know the topic
that is functional genomics How this has led
to what is called as understanding the function
the entire you know genes that are present
in the genome as to what function they do
So genetics just let us look into this genetics
versus genomics the genetics is the study
of the gene functions so normally if you look
into the classic Morgan model you have looked
at the phenotype and try to map it to a region
of the genome and then find the gene and then

Hindi: 
कुछ भी जानते हैं
अगर आप सिस्टम में
देखते हैं, अगर आपने
एक दो पहिया या एक
चार पहिया वाहन चलाया
है जो आपके पास है,
तो आप जानते हैं कि
गियर बॉक्स (gear box) के
रूप में क्या कहा
जाता है, जिसे आप जानते

Hindi: 
हैं कि आप गियर बदलते
हैं तो आपने जल्दी
किया आप तेजी से जाने
में सक्षम हैं।
इसलिए जब भी आपको
आवश्यकता हो आप तेजी
से जा सकते हैं या
आपको अधिक शक्ति
की आवश्यकता है तो
आप एक या दो गियर में

English: 
say this word is Due to you know the way because
now you have understood all the genes as to
how many genes are there what kind of protein
it can code for but what you do not know is
what is the function
A transcription factor may be helping you
either to digest the product or it can be
in your vision or it could be something else
So the protein per say does not say what is
the final function in terms of phenotype For
that what you do you delete the gene and look
at the phenotype right So this is the genotype
to phenotype that was possible you know from
genomics point of view but still there are
challenges so how are you going to assay like
you know I do not know when I find a new gene
using a genomic approach Now I delete it but
I need to assay the function of it so I may
not be able to see everything at the phenotype
level
For example a gene is involved in cell division
and I knock out that gene so I will never
see that phenotype because the every time
you delete the gene the cell will not survive

English: 
because it cannot divide So in this approach
given I have created a knockout or whatever
it is it is not going to help me in dissecting
this So you have to have a powerful assays
to understand the variety of functions so
here the assays is the assays is dedicated
to a particular function for example growth
cell division or the reverse of it
What are the genes that help in the cell death
right so all our cell have a finite division
after that they cease to you know divide and
they die so there are now you know that there
are genes that trigger cell death or pro apoptotic
protein So what are these proteins what are
the genes how do you screen for it right So
it depends on what kind of assays so that
is what called as functional genomics Determine
functions of all genes in the genome So one
assay is not going to help you screen the
function of all the genes
So we are going to look into some hypothetical
projects I am going to show you then some
examples from the literature how people have
used this functional genomics approach to

Hindi: 
शिफ्ट करने के लिए
जानते हैं और फिर
आप एक ही समय में अधिक
शक्ति देने में सक्षम
हैं, आपके पास वाहन
को रोकने के लिए एक
और सिस्टम (system) है।
इसलिए आपको इन सभी
नियंत्रणों को पूरा
करना होगा, ठीक उसी
तरह जब आप जीन (gene) को

Hindi: 
नियंत्रित करने में
सक्षम होते हैं जब
आपके पास किसी दिए
गए जीन (gene) के लिए अधिक
मात्रा में प्रोटीन
होता है तो आप इसे
कैसे करते हैं।
ऐसे कई तरीके हैं
जिनसे आप RNA की अधिक
प्रतियां बनाने के
लिए जीन (gene) बना सकते

English: 
understand the function of a large number
of genes that all of them function in one
particular pathway Let us say our project
is to identify all genes involved in mitosis
cell division right we have all growing because
of mitosis if you have a wound cut in your
body it gets you know filled up and healed
is because of mitosis so everything you know
envy mitosis right
So let us see so will you identify all the
genes that are there in your genomes that
help in mitosis right The approach is you
have now again you have to go for appropriate
but there are we discussed a variety of approach
we can use it for genomics applications So
let us look into a simple approach RNAi because
human mitosis we are going to study and then
we have the siRNA duplex for every gene that
genome has so I have the tools so I am going

English: 
to introduce this double duplex into the cell
as a result what would happen is that you
know whatever RNA that carries this segment
will be degraded
So therefore the proteins in that cell would
go down and if they are very critical for
the function that function lasts so you can
use a large number of genes for the screen
because simply I have to you know put them
into the cell Second this requires live cells
because I am studying a process which cannot
be studied in a dead cell in the sense I am
talking about cell division So I have to look
at cells that divide so that division is a
process that I am going to score for So I
should be able to look at cell that are live
so how will you do so normally when you talk
about microscopy it is difficult to you know
staying cells unless you have fixed them and
you are using as antibody and so on
So therefore you have to come up with ways
so people have now we can use this called

Hindi: 
हैं, इसलिए दिए गए
एक मिनट में आप मैसेंजर
आरएनए (RNA) की सौ प्रतियां
सही बनाते हैं, यह
एक तरीका है।
दूसरे तरीके से mRNA
को अधिक समय तक रहने
दिया जाए, इसलिए वे
अधिक मात्रा में
प्रोटीन बना सकते
हैं क्योंकि हर चीज
का आधा जीवन होता
है।

English: 
as fluorescent protein these are proteins
that are normally present in marine animals
which live in conditions where in it not that
bright They emit light kind of fluorescent
protein these are called as GPF and people
have engineered this GPF to make you know
proteins to fluorescent different colours
for example there could be RPF red fluorescent
protein yellow fluorescent protein and so
on so what I can do is that I can use a protein
which are normally present in your cell such
that the protein in fused to now GFP so now
the fused protein would do the function of
whatever the function the protein is be able
to do but it also would flourish right so
it will tell you where the protein is
Say suppose if I am using a protein that binds
to the spindle you know the fibres that bind
to the chromosome and pull you must have studied
in you text book If that spindle forming protein

Hindi: 
आरएनए (RNA) का आधा जीवन
प्रोटीन का आधा जीवन
होता है, इसलिए आप
आरएनए (RNA) को लंबे
समय तक जीने के लिए
बनाते हैं इसलिए,
यहां तक कि आप जानते
हैं कि आरएनए (RNA) आप
अधिक प्रोटीन बनाने
में सक्षम हैं क्योंकि
यह एक और तरीका है।
तो ठीक, इसी तरह के
तंत्र का उपयोग इसे

English: 
as GFP it would look something like this so
the spindle would flourish then I can see
that cell I say ok this is a particular cell
division or not dividing at all so I am able
to analyse right What is the other important
element I should be able to automate so I
am looking at some 40000 genes to screen so
anyone or hundreds of them could be involved
in the process but I cannot you know study
this manually
If I have to study the function of every one
gene out of that 40000 from this particular
process I will be spending hours and hours
with just for one gene to you know because
its cells takes about 24 hours to divide So
at the maximum I can finish in 2 days or 3
days I can confirm that one gene whether it
is involved or not involved So it is not possible
because you cannot spend without you know
basically sleeping sitting at the microscope
and observing its difficult tedious process
so you have to have high through put meaning
you should be able to look into a large number
of samples at the same time it is automated
meaning you do not sit there

Hindi: 
विनियमित करने के
लिए किया जा सकता
है।
आपने आरएनए (RNA) बनाया
है और आरएनए (RNA) प्रोटीन
में परिवर्तित हो
रहे हैं लेकिन अब
हमें इसे बंद करना
होगा।
हम नहीं चाहते हैं
कि प्रोटीन वहां
हो ताकि आप क्या कर
सकते हैं आप प्रोटीन
को ख़राब कर सकते
हैं या आप इसे निष्क्रिय

Hindi: 
कर सकते हैं लेकिन
यदि आप ऐसा करते हैं
कि यदि आरएनए (RNA) है
तो यह प्रोटीन को
सही बनाने के लिए
जारी रहेगा।
तो आप किस तरह से कर
सकते हैं कि अगर आप
जीन को बंद कर दें
तो भी RNA होने वाला
है तो हम RNA को नीचा
दिखाने के लिए क्या
कर सकते हैं।

English: 
Machine does that right so this this is doable
because you know you can have plates that
you know you have 96 wells for example what
is shown here but you can go much closer to
400 or so and each one you have seeded some
cells and then in the each one of the well
you have given the siRNA for a given genes
So in one plate I am screening for 96 you
know genes like ways I can you know scale
up the reaction then you have a system in
which you know you are able to analyse the
cell but not by yourself the computer does
So you have given the patterns and their algorithms
that looks at the imaging pattern because
you are going to look at cells from the fluorescence
and the algorithm would look at the you know
the kind of patterns that the fluorescent
gives and it will call ok this cell did enter
mitosis or it did not exit mitosis right So
this way you are able to analyse and tell

English: 
what are the genes that are affecting the
mitosis or not affecting the mitosis obviously
the genes that are not affecting the mitosis
are going to much larger because they have
a variety of functions but then you are going
to have a list of hundred genes or whatever
that are involved in the mitotic function
that is the screen that we use
Let look into the flow chart how does it do
so the step one establish a model system to
assay the the process of cell division so
what do you do you know you have a cell in
which you have engineered the cell line such
that it is going to express a protein which
binds to for example the tubulin the spindle
micro tuble marker and for example histone
which is a marker for thechromosome because
the histones are the basic protein bound to
the DNA so what you are seen here beautifully
is that these are the the red ones or the
chromosomes and the green ones are the spindle
that are pulling the chromosome to the two

Hindi: 
तो आप इसे कैसे विशिष्ट
बनाएंगे केवल कुछ
आरएनए (RNA) को न्यून
दिखाया जाता है।
हमारे सिस्टम में
आपको छोटे RNA के बारे
में पता है, जो दूत
RNA के दिए गए सेट को
लक्षित करते हैं
और इसका अर्थ है कि
यह अनुक्रम (sequence) की
पहचान करता है यह

Hindi: 
बाइंड्स पर जाता
है और सिस्टम को उन
RNA को न्यून दिखाने
में मदद करता है जिनके
पास मानार्थ अनुक्रम
(complimentary sequence) है, इसलिए
इसे microRNAs कहा जाता
है।
या miRNAs जो हमारे सिस्टम
में मौजूद हैं जो
योजनाबद्ध (schematic) में
दिखाए जाते हैं।
तो आपके पास इन आरएनए
(RNAs) को miRNA या माइक्रोआरएनए

English: 
things so if I can make the computer to find
this pattern in a if the computer was you
know through microscope or looking at cells
for 24 hours or 36 hours if that cell has
shown this pattern that means that its able
to you know divide that is what it is the
system is able to score it right
And and you are able to culture the cells
in this kind of plate I describe and then
you are going to what you do is that this
is the process there is not a snap shot You
are going to look at the cell for a period
of 36 hours because its division it is normally
it is about 24 to 30 hours the cell might
divide so you are going to look at that so
the computer has to the camera microscope
has to image it at the intervals for example
every time minutes one it will take a snap
So when you have that kind of snap taken and
then you know you run it in a continuous way
then it would look like a movie and that image
can be used for you know deciphering whether
the entered mitosis or existed mitosis or

English: 
it is not at all entering or not at all existing
So that is easy to do in that way
So then you have there are other challenges
for example when you have 96 well pate then
you want to add medium then you cannot take
keep on adding in one because then when will
you finish dispensing all the liquid that
is not you know so you have to have you know
either robotic work station or pipers that
can dispense at the same time to either you
know 9 well 8 well or 16 wells whatever it
is right so that that again helps and then
you have for example a work station in which
you know completely takes care of you know
imaging at every interval and processing it
and telling you all this things So this is
all doable and with this you will be able
to at the end of 2 days - 3 days you will
be able to call as to how many genes possibly
affect mitosis
This is a land mark paper which used one such
approach using RNAi screen to identify what

Hindi: 
(microRNA) के रूप में बुलाया
जाता है जो कि आप जानते
हैं कि फंसे हुए आरएनए
सिंगल (RNA signal) हैं जो
स्पष्ट रूप से बने
हैं, लेकिन उनके पास
अनुक्रम (sequence) हैं
जो इसलिए प्रशंसा
करते हैं इसलिए वे
वापस मोड़ सकते हैं,

English: 
you call as genes involved in mitosis cell
divisions So you can see that this paper came
in nature and 2000 tonnes it is phenotypic
profiling of human genome by time laps microscopy
review cell division genes What is called
as human genome look at every gene almost
and its function in cell division so now it
is now what we have discussed earlier is that
you are looking at the phenotype going to
the gene through genomic approach you identify
all the genes now you want to delete the genes
and look at functions now we are not looking
at just one gene
We are looking at every gene by using a high
throughput screening you know automated process
to identify set of genes involve in in a given
function right So you have to come up with
assays and so on So they have screened close
to 22 thousand human genes and then then they
found that 1249 genes siRNA exhibit mitotic
phenotype and then 500-700 genes exhibited

Hindi: 
इस तरह के बेस पेयरिंग
से लूप और इन जैसे
नाभिक से साइटोप्लाज्म
(cytoplasm) से बाहर आते
हैं, जहां डिसर और
आरआईएससी कॉम्प्लेक्स
(RISC complex) जैसे एंजाइम
होते हैं और कई अन्य,
जिन्हें हम विवरण
में देख सकते हैं
जब हम आपके लिए लिंक
जानते हैं जो आप जानते

English: 
mitotic phenotype with you know meaning two
different siRNA you can use and so on Let
us not get into that but these are validation
right once you found some positive heats then
you are going to validate and indeed that
the case and so on
So these are some of the images that are shown
we can see that these are time lapse that
is 21:48 hours and you can see that from you
know 25 minutes 46 minutes 47 47 54 and so
on and they are showing how beautifully this
cell is dividing you can see that if you look
at very carefully you have the histone that
is marking the chromosome you have the spindle
you have the cell divide so that is the normal
process but in this conditions vary and knockdown
certain genes that are like that shown here
OGG or zenpep or whatever it is then the process
is altered
Either it is not entering mitosis or the cell
division is not proper you can see that the

Hindi: 
हैं कि आप किस तरह
के क्लीवेज (cleaves) जानते
हैं और आरएनए (RNA) जैसे
छोटे खंड बनाते हैं
आप यहाँ क्या देख
रहे हैं।
तो ये 20-25 बेस सीक्वेंस
जिन्हें आप जानते
हैं कि आप जाने अनजाने
में से अधिकतर अन-ट्रांसलेटेड

English: 
phenotype that varying the cells not properly
dividing they are come together and it is
not dividing that pretty much tells you that
you know loss of this gene results in a phenotype
that is not ideal for mitosis so here you
went with an approach without really bothering
about with genes and at the end of the screen
you are able to identify hundreds of genes
that are involved in the process So that is
you know high throughput process
Now I am going to talk about another such
approach again its construct to be a land
mark discovery wherein they identified human
genes or the protein called it by the genes
helping the influence of virus to enter our
human cells So the virus does not just enter
on its own there are some it uses some of
our own machinery to survive and infect ourselves
So if we can identify those proteins then
we can come up with the better therapeutic
or preventive measures that is the you know
paper here They identified genes that help

Hindi: 
एरिया (un translated region) को
जानते हैं और RNAs मैसेंजर
को 3prime को अन-ट्रांसलेट
(un- translated) करते हैं इसलिए
जब वे जाते हैं और
बाइंड करते हैं तो
उनके दो अलग फंक्शन
होते हैं।
एक उदाहरण के लिए
अब जब वे इस तरह बाँधते
हैं जैसे कि यहाँ
दिखाया गया है, तो
इससे आपको पता चल
सकता है कि अनुवाद

Hindi: 
गिरफ्तारी अब आरएनए
का अनुवाद नहीं हो
रहा है।
RNA है, लेकिन उन्हें
सेल का अनुवाद करने
की अनुमति नहीं है,
अब संदेशवाहक को
इस तरह का संदेश मिलता
है कि जब यह माइक्रोआरएनए
(microRNA) आता है जब उन्हें
क्लीव (cleaved) किया जाता

English: 
in this process how did they do again they
used automated process let us not get into
all the details but what is shown here is
that a process that you have uhhh a viral
particle you now that gets into the cell and
then again it makes its own copies and again
goes and infects and so on
So what they have done is they have again
used the same approach meaning you have a
system wherein you are introducing the virus
and looking it how it gets into the cell again
makes copies of itself and then goes and does
one more round of infection using time lapse
videography and then on the top of it they
have you know looked you know genes that affects
this process Now you go on knocking out every
gene each one after the other or high throughput
screen and see in which when you knock out
a given gene or whichever genes when you knock
down then this process of infection is altered
right

Hindi: 
है और छोटे RNA बनाए
जा रहे होते हैं और
वे बंध जाते हैं और
फिर प्रोटीन के अनुवाद
को रोकते हैं जिसे
हम कहते हैं।
अनुवाद को अवरुद्ध
करने में सक्षम हैं।
आप इन आरएनए (RNA) के
अन्य कार्यों को
जानते हैं, जहां कहीं
भी आरएनए (RNA) और लक्ष्य
mRNAs के बीच पूरकता
होती है जैसे कि यहाँ
व्यापक दिखाया गया
है तो क्या होता है

English: 
So the use of this very similar approach of
image processing to identify genes and they
are able to tell that it uses a machinery
which is normally the cell uses to clear the
abnormal proteins that are made in the in
the in the cell So it uses that machinery
hijacks that for its own benefits and it is
able to multiply and so on so that is you
know the way they have done
So again just to show a flow chart that you
have had a system wherein you have a large
number of you know what is called as a multi
well plates you have seeded the cells you
have seeded the virus you have ways to image
certain events there and then the computer
scores this images and tells you whether the
infection is proper whether the virus is able
to replicate and make more particle or not
With that you are able to target the genes
that help in this process so that is the way
it is done
So again these are using the RNAi as I said
the knockdown of the gene is done by duplex

Hindi: 
कि यह जाता है और आरएनए
(RNA) के साथ इस तरह का
द्वैध बनाता है और
फिर आपके पास होता
है बेशक एंजाइम (enzyme)
जो जाते हैं और इसे
डुप्लेक्स (duplex) के
रूप में पहचानते
हैं और फिर आरएनए
को न्यून दिखाते
हैं।
इसलिए mRNA को ख़राब
किया जा रहा है, इसलिए
यह तरीका है कि आप
ऐसा कर सकते हैं कि
लोगों ने क्या किया
है कि आप RNA को जानें
कि आप किसी दिए गए
जीन के लिए कुछ ऐसा
बना सकते हैं और सेल
या जानवर के अंदर
परिचय कर सकते हैं
और फिर हमारे स्वयं
का उपयोग कर सकते
हैं।
आरएनए (RNA) को नीचा
करने के लिए मशीनरी
आप आरएनए (RNA) को न्यून
दिखा सकते हैं जिसे
आप नीचा दिखाना चाहते
हैं, इसलिए सेल लगभग
प्रोटीन नहीं होने
की तरह है, इसलिए यहां
केवल एकमात्र अंतर
यह नहीं है कि नीचे
दस्तक क्या है जिसे
आप अपमानित करते
हैं संदेशवाहक।
यह 100 प्रतिशत सही
नहीं है यह 50 प्रतिशत,
60 प्रतिशत, 90 प्रतिशत
हो सकता है लेकिन
कभी भी 100 प्रतिशत
नहीं होगा लेकिन
फिर भी यह काफी अच्छा
है क्योंकि भले ही
आपने किसी दिए गए
प्रोटीन की कोशिका
को 90 प्रतिशत तक कम
कर दिया हो वह प्रोटीन
नहीं है, इसलिए आप
किसी दिए गए फेनोटाइप
को देख सकते हैं।
तो
यह प्रणाली का लाभ
है इसलिए जो दिलचस्प
है वह आपको मिल सकता
है कि आपके बारे में
हजार जीनों (gene) को
जानने वाले से अधिक
आपके बारे में पता
है जो इस mRNA को सही
बनाते हैं और वे हमारे
60 प्रतिशत जीनों (gene)
को लक्षित करते हैं
जो वहां हैं, इसलिए
यह कहता है जीन्स
(genes) का अधिकांश हिस्सा
जो आपके पास है, आप
आरएनए (RNA) को जानते
हैं।

English: 
that people use and this RNA screen is something
that now is routinely done and I just give
this RNA screen This is a pubmerge search
and you will find that already when I say
screen it is not individual RNA or individual
gene You are talking about you know screening
for a particular process using thousands of
constructs that knockout thousands of genes
So when you see that you are already 700 papers
and you can see here on the right side this
cystogram only talks about how you know a
number of papers that used these RNAs screen
as increasing by every year then you can see
that this is you know probably 2017 now sorry
16 and this when probably this approach is
came
You find that the number of papers goes up
that means that the technique is being refined
and more and more groups are using it because
it is very desirable to find the screen right
So that really helps us to identify that is
what it is about RNAi

Hindi: 
उनकी स्थिरता उनके
आधे-जीवन को चाहे
वह अनुवादित हो या
न अनुवादित हो, ऐसे
छोटे आरएनए द्वारा
नियंत्रित किया जाता
है जिसे माइक्रोआरएनए
(microRNA) राइट कहा जाता
है।
इसलिए और कहां से
ये microRNAs आते हैं miRNA
से आता है।
वे विभिन्न प्रकार
के स्रोत से आते हैं
यह किसी भी अन्य जीन
(gene) के इंट्रॉन का
एक छोटा सा खंड हो
सकता है जिसे बाहर
निकाला जाता है।
अब हम मानते हैं कि
आम तौर पर पाठ्यपुस्तक
का कहना है कि जीर्ण
क्षेत्र को बाहर
निकाल दिया जाता
है, लेकिन हमारे पास
कभी भी यह चिंता नहीं
होती है कि इसके क्या
संभावित कार्य हैं
ऐसा लगता है कि आरएनए
(RNA) को बाहर निकालने
के लिए एक नियामक
आरएनए (RNA) के रूप में
भी कार्य किया जाता

English: 
And because of its simplicity and the power
you know to identify genes whose function
is last you know this discovery led to the
award of noble price to Mofire and Melo and
that is really tremendous application in that
So we are going to go and look at another
such approach which is called as morpholino
again it is uhhh DNA sequence based knockout
strategy originally you know described for
zebra-fish
Let us see what it is these morpholinos is
nothing but oligos you know these are synthetic
single stranded DNA but these you know the
back bone of the the DNA that are made are
modified such that you know it is a stable
otherwise it may be degraded and these are
antisense meaning they complimentary to given
RNA and they have their efficiency to knock
down the gene expression meaning it goes and
forms a duplex like what is shown here and

Hindi: 
है और आपको पता है
कि इसके कई प्रकार
मौजूद हैं जो केवल
मनुष्यों के लिए
ही सीमित नहीं हैं।
इसलिए यह एक जानकारी
है तो हमें यह देखने
दें कि हम ऐसा कैसे
कर सकते हैं ताकि
हम उसी मशीनरी का
उपयोग कर सकें जिसके
पास सेल में एक मशीनरी
है जो ऐसे आरएनए (RNA)
डुप्लेक्स की पहचान
करती है जिसे आप जानते
हैं कि आरएनए (RNA) miRNA
से बंधा हुआ है, इसलिए
यह नीचा दिखा सकता
है कि आपको क्या चाहिए
यदि आप आरएनए (RNA) को
आपके द्वारा ज्ञात
छोटा प्रदान कर सकते
हैं, तो आप यह जान
सकते हैं कि उस विशेष
संदेशवाहक के स्तर
को विनियमित किया
जा सकता है जो लोगों
ने किया है।
तो ऐसा करने का एक
तरीका यह है कि हम
उदाहरण के लिए एक
प्लास्मिड (plasmid) बना
सकते हैं जो आपको
एक अनुक्रम (sequence) में
लूप की तरह जानता
है जो उदाहरण के लिए

English: 
this is your RNA and this is your morpholino
this is nothing but an oligo having a modified
5prime end and then you have this bases ok
So they all form base pair just like that
right and they have the same standard nuclear
bases but there are changes like what is shown
here these are non-ionic this basically makes
this nucleic acid to survive in the condition
because your cell otherwise could you know
degrade them right and this is the assay system
with which people have developed this and
validated it because these are zebra-fish
These are animals that lay eggs unfertilised
eggs and sperm in the medium water and the
fertilization takes place outside and you
can see from zero meaning just fertilize to
the formation of the young to adult happens
outside therefore you can follow the development
you know under a microscope unlike for example
mouse

English: 
The development happens within the system
uterus then you cannot follow but here it
is external therefore if you really want to
study the genes that are involved in the early
development This is one of the best models
because its vertebrate and external fertilization
external development and the entire process
is translucent You do not need any colour
any fluorescent protein and all so you can
see that these are bright filled imaging just
you are looking at an microscope you are able
to see the all the process you can see that
this is animal pole and you have the cells
dividing and so on
So then this embryo is coming out and you
can see that People have used this so if you
are looking at genes that are involved in
developmental processes all you have to do
is take these oligos and then inject into
the egg and see whether the process is happening
or hampered If the gene is critical for the
process then the RNA rather it is going to
go and form a duplex that will not be translated
so you will not have the protein made So hampered

Hindi: 
विशिष्ट है जो किसी
दिए गए जीन (gene) प्रतिलेख
को सही करता है।
इसलिए जब आप इसे बनाते
हैं और सेल के अंदर
पेश करते हैं या आप
इसे बनाने के लिए
सेल बनाते हैं, तो
स्ट्रैंड्स में से
एक यह है कि सिस्टम
फ़ंक्शंस (system function)
कैसे जाता है और फॉर्म
आपको पता है कि एक
लक्ष्य आरएनए (RNA) के
साथ काम्प्लमेन्टरी
बेस पेयरिंग (complimentary
base pairing) और फिर ऑफ कोर्स
क्योंकि यह इस तरह
का है द्वैध की पहचान
मशीनरी द्वारा की
जाती है और उन्हें
हटाया जा रहा है।
इसलिए हम उसी मशीनरी
का उपयोग कर रहे हैं
जो अन्यथा जीन (gene)
के सामान्य कार्य
को नियंत्रित करती
है।
तो इस तरह से हम इसमें
से किसी को भी टारगेट
कर सकते हैं या तो
आप RNA का एक द्वैध बना
सकते हैं जिसे आप
RNAi द्वैध जानते हैं
और जीव या कोशिका
के अंदर परिचय कराते
हैं।

Hindi: 
आरएनए (RNA) को लक्षित
किया जाता है या आप
इस तरह का निर्माण
कर सकते हैं जो इस
तरह के द्वैध में
बना रहता है और फिर
आपको पता है कि सेल
सही लक्ष्य अनुक्रम
(sequence) को न्यून दिखाने
में सक्षम है।
तो यह फिर से एक व्यापक
प्रयोज्यता है क्योंकि
आप उदाहरण के लिए
जानते हैं कि यहां
जो दिखाया गया है,
वह उन कागजों में
से एक है जो दिखाया
गया है कि आप किसी
दिए गए ट्यूमर में
जानते हैं।
हम देख सकते हैं कि
यह ट्यूमर (tumor) के साथ
एक माउस मॉडल है जो
बढ़ रहा है क्योंकि
हम जान सकते हैं कि
कुछ कोशिकाएं हैं
जिनके पास ट्यूमरजन्य
है और ट्यूमर (tumor) जानवर
में बढ़ता है, इसलिए
यदि आप वास्तव में
किसी अन्य दवा का
परीक्षण करना चाहते
हैं जो विनियमित
या फिर से पा सकता
है ट्यूमर (tumor) का विकास
आप इस मॉडल का उपयोग
कर सकते हैं और यही
उन्होंने उदाहरण
के लिए दिखाया है
कि आप जानते हैं कि
दो अलग-अलग आरएनएआई
(RNAi) हैं, जिसका अर्थ
है कि उनके द्वारा
देखे गए अलग-अलग आरएनए
लक्ष्य और उन्होंने
इस आरएनएआई (RNAi) डुप्लेक्स
को ट्यूमर (tumor) में
पहुँचा दिया और उन्होंने
पाया कि यदि आप किसी
दिए गए जीन (gene) को सिस्टम
में जानते हैं और
जानवर इतने बड़े
ट्यूमर (tumor) को विकसित
नहीं कर रहा है, जैसा
कि आपने अन्यथा देखा
है तो ठीक है, दूसरे
शब्दों में, यदि आप
एक विशिष्ट जीन को
लक्षित कर सकते हैं
और इस पद्धति का उपयोग
करके इसकी अभिव्यक्ति
को अवरुद्ध कर सकते
हैं तो आरएनएआई (RNAi)
सही ट्यूमर (tumor) के
विकास को नियंत्रित
करें।
तो इसकी एक जबरदस्त
क्षमता है, अब यह क्या
कहता है कि आप इस आरएनए
डुप्लेक्स (RNA duplex) को
गेंदों की तरह कुछ
रासायनिक कैप्सिड
(chemical capsid) में पैक कर
सकते हैं और आप इसे
जहां कहीं भी ट्यूमर
(tumor) है, इसे लक्षित
कर सकते हैं और यदि
वे वहां पहुंचते
हैं तो यह जीन को निष्क्रिय
करने वाला है आरएनए
(RNA) को नीचा दिखाने
के कारण जो सेल में
ट्यूमर (tumor) के रूप
में विकसित नहीं
होगा या यह फिर से
विकसित हो सकता है।
तो, यह चिकित्सा के
अन्य संयोजन के साथ-साथ
आपके पास सही उपचार
पर बेहतर नियंत्रण
होगा, इसलिए यह क्षमता
है इसलिए यह एक तरीका
है जिससे आप कर सकते
हैं।
लाभ यह है कि यह बहुत
सरल है आप कर सकते
हैं आप किसी भी जीन
को लक्षित कर सकते
हैं जिसे आप चाहते
हैं क्योंकि आपको
केवल इतना करना है
कि आरएनए (RNA) का एक
छोटा सा खंड या तो
डुप्लेक्स या shRNA है
जो आप इतना आसान बनाते
हैं और यह भी अनुमति
देता है लोग वास्तव
में हमारे पास अब
उन सभी जीनों के लिए
पुस्तकालयों की एक
बड़ी संख्या को देखने
के लिए हैं जिनके
लिए आप जानते हैं
कि आप आरएनएआई (RNAi)
के पुस्तकालयों का
अध्ययन करना चाहते
हैं।
तो बस आप क्या चाहते
हैं का चयन करें और

English: 
the process will be hampered On the other
hand if there not involved the process the
process will continue
The question is how does this oligo or the
morpholino really affect the gene or the RNA
from splicing There are two ways it can do
for example it can even affect the splicing
of the RNA so what is known is that you must
have studied in the textbook that when you
have a gene which has multiple exons the introns
sequence should be removed What is shown here
here that there are proteins that comes and
binds and then cleave the RNA such that the
intronic region is removed so when you have
this morpholino targeting to that kind of
sequence where you have the intron-exon boundaries
then what would happen is that it would prevent
the formation of this the complex that help
in splicing of the mRNA
So when that happens the RNA will not be cleaved
and some of the factors is still bound to
the RNA and the RNA will never come to the
as a result you know there is not going to

Hindi: 
आप नीचे दस्तक और
फिर अध्ययन कर सकते
हैं।
यह अन्य क्षेत्र
में भी आवेदन करता
है उदाहरण के लिए
आप पौधों को इंजीनियर
कर सकते हैं ताकि
आप एक जीन (gene) के लिए
डबल फंसे हुए आरएनए
को जान सकें जो पौधे
में मौजूद नहीं है
लेकिन परजीवी (parasites)
या नेमाटोड (nematode) में
जो पौधों को संक्रमित
करते हैं।
एक उदाहरण जो यहाँ
दिखाया गया है, जो
आईआईटी कानपुर के
हमारे अपने संस्थान
से आया है, जिसमें
उन्होंने पौधों को
ऐसे इंजीनियर किया
है कि यह एक जीन के
लिए एक डबल फंसे हुए
आरएनए (RNA) बनाता है
जो सामान्य रूप से
महत्वपूर्ण है परजीवी
का विकास आप युवा
लोगों को लार्वा
के रूप में जानते
हैं।
तो वे एक हैं जो पौधे
को संक्रमित करते
हैं और यहां जो दिखाया
गया है वह आप इस बाईं
ओर देख सकते हैं कि
यह पौधे की जड़ है
जो परजीवियों से
बहुत अधिक संक्रमित
है, इसलिए परजीवी
अंदर आते हैं और वे
इस नोड्यूल्स (nodules)
का निर्माण करते
हैं।
नतीजतन, पौधे अच्छी
तरह से विकसित नहीं
होता है यह संक्रमण
है।
लेकिन अगर आप पौधे
को डबल फंसे हुए आरएनए
(RNA) बनाने के लिए बना
सकते हैं, तो आपको
कुछ ऐसे जीनों (genes)
के बारे में पता होगा
जो कृमि के परजीवी
निमेटोड (nematode) के विकास
के लिए महत्वपूर्ण
हैं, फिर क्या होता
है, भले ही आप अब इन
नैमेटोड्स (nomatodes) से
पौधे को संक्रमित
करते हों क्योंकि
नेमाटोड (nematode) खाते
हैं पौधे के जीवित
रहने के लिए कोशिका
कोशिकाएं एक परिणाम
के रूप में दोहराए
गए आरएनए (RNA) उनके
कण्ठ में समा जाती
हैं और इससे आपको
पता चल सकता है कि
आप एक प्रणालीगत
ट्रिगर करते हैं,
जिसे आप जीन (gene) के
एक साइलेंसिंग (silencing)
के रूप में जानते
हैं, परिणामस्वरूप
नेमाटोड (nematodes) नहीं
बढ़ता है और इसलिए
संक्रमण कम से कम
हो जाता है।
तो ये कुछ अनुप्रयोग
हैं जो आरएनएआई (RNAi)
का उपयोग करके वास्तव
में शक्तिशाली अनुप्रयोग
हैं।
ये तकनीकें जो हमने
आरएनएआई (RNAi) और अन्य
के बारे में बोलीं,
उनमें से कुछ ऐसे
हैं जिन्हें आप जीन
(gene) के लिए बहुत विशिष्ट
जानते हैं क्योंकि
आप उस जीन (gene) को हटाना
चाहते हैं जिसे आप
चाहते हैं या किसी
जीन को परिवर्तित
करना चाहते हैं या
आप जिस जीन (gene) को चाहते
हैं उसे बदल सकते
हैं लेकिन वहां ऐसे
अन्य तरीके भी हैं
जिनका लोगों ने उपयोग
किया है जो लक्षित
विशिष्ट नहीं हैं,
लेकिन फेनोटाइप (phenotype)
विशिष्ट अर्थ है
जो मैं एक फ़ंक्शन
में देख रहा हूं उदाहरण
के लिए ड्रोसोफेन
मॉडल (Drosophila model) का उपयोग
करना।
तो मैं क्या करता
हूं, मैं एक केमिकल

English: 
be you know functional because it will not
make any protein The other process is that
that you can make the morpholino such that
you know you have this ribosome binding to
the RNA and then reading and then you will
have the peptide being made translation process
so you can make morpholino such that the assembly
of the large ribosome is hampered You make
it to the 5 prime end of the RNA and where
the assembly takes place therefore you prevent
the translation so in both the approach basically
you are you are the end result is that the
protein is not made it is as good as not having
the genes so that is how you do
I am going to show you some examples again
how people have used this approach to identify
genes involved in certain developmental events
You must have seen that there are developmental
email called as craniofacial morphogenesis
meaning when you are the embryo is developing

English: 
you have this colour which even forms the
roof of your mouth and other part these are
very tightly regulated development process
there are people who have deformity in the
development as a result they have a defect
because it again because of some genetic defect
that they have
So what are the genes that are involved in
such process right so this study here what
is shown in this screen here they have looked
at a large number of genes they have used
morpholinos to sort of affect the function
of the gene and looked at how what are the
genes that affect the skeletal the craniofacial
development because these are all conserved
genes because the same genes that functions
the similar way in human as well So you can
see these are un-injected embryo they are
normal you have the eye and then you have
this this skull coming up and this is one
such gene when you lose then the you know
the skull is not being formed well So in this
way we are able to quickly come up with genes

Hindi: 
के लिए मक्खी को बेनकाब
करता हूं, जो यहां
दिखाया गया है, एथिल
मेथनोसल्फोनेट ईएमएस
(Ethyl methanosulfonate EMS) वे इसे
कहते हैं और यदि आप
इस केमिकल को जानवर
को एक्सपोज करते
हैं और यह केमिकल
म्यूटेशन (chemical mutation)
का कारण बनता है, लेकिन
आम तौर पर ये आधार
परिवर्तन होते हैं।
क्या होता है विशेष
रूप से ग्वानिन (guanine)
के साथ रासायनिक
होता है, इसके साथ
इंटरैक्ट करता है
और फिर यह बनाता है
जिसे ओ-एथिल ग्वानिन
(o-ethyl guanine) कहा जाता है,
जिस तरह से यह बदल
गया है, जिसके परिणामस्वरूप
क्या होता है जब यह
बदल जाता है अब यह
जी (G) के साथ नहीं रह
गया है, लेकिन यह हो
सकता है टी (T) के साथ
जोड़ी बना सकता है।
इसलिए यदि आपके पास
एक सेल है जिसमें
इस तरह का संशोधन
हुआ है और वह सेल विभाजित
हो रहा है तो अब क्या
होता है यह एथिल ग्वानिन
(ethyl guanine) अब आधार युग्मन
की नकल करता है जैसे
कि यह ए (A) और नया स्ट्रैंड
है जिसे बनाया जा
रहा है।
क्या आपके पास C का
पता C के स्थान पर
होगा, इसलिए इस तरह
से आप आधार को बदल
सकते हैं और यदि ऐसा
होता है कि एक ऐसा
क्षेत्र है जहां
एक कोडन (codon) है और
कोडन (codon) को बदल दिया
जाता है तो आपके पास
एक अलग एमिनो एसिड
(amino acid) होने वाला है।
यदि यही कारण है कि
आपके पास कुछ प्रतिलेखन
कारक हैं जिन्हें
आप बाँधने जा रहे
हैं तो यह बाँध नहीं
सकता है और इस तरह
की चीजें।
इसलिए आप बेतरतीब
ढंग से उत्परिवर्तन
(mutation) पैदा कर रहे हैं
और आप बड़ी संख्या
में संतान उत्पन्न
करने जा रहे हैं जो
बाहर आते हैं और फिर
फेनोटाइप (phenotype) को
देखते हैं और यदि
उनके पास वांछनीय
फेनोटाइप (desirable phenotype)
है उदाहरण के लिए
दृष्टि की हानि, तो
आप उस उत्परिवर्तन
(mutation) को देखने जा रहे
हैं।
जगह ले ली और फिर आप
वापस जा सकते हैं
और मैप कर सकते हैं
कि आप जीनोम को सही
जानते हैं, इसलिए
यह अन्य सरल विधि
है जिसका लोगों ने
सही उपयोग किया है।
तो ऐसे तरीके हैं
जिन पर हमने चर्चा
की है कि आगे की आनुवंशिकी
(genetics) में एक आनुवंशिकी
(genetics) कैसे है और फिर
आप जिनोमिक्स (genomics)
में आए हैं, हम बड़ी
संख्या में जीन को
समझ गए हैं और जिसे
अब जीनोमिक्स (genomics)
कहा जाता है, जिसमें
आप हर जीन को कहते
हैं।
पता नहीं कि वह कौन
सा कार्य है जो आप
खटखटाते हैं और कार्य
को देखते हैं, अब आप
जिस पर चर्चा करने
जा रहे हैं क्या आप
उस विषय को जानते
हैं जो कार्यात्मक
(functional) जीनोमिक्स (genomics)
है।
इसने उस कार्य को
कैसे अंजाम तक पहुंचाया
है, जिसे आप उस पूरे
जीन (gene) को जानते हैं,
जो जीनोम (genome) में
मौजूद हैं, वे किस
कार्य को करते हैं।
तो जेनेटिक्स (genetics),
बस हमें इस जेनेटिक्स

Hindi: 
(genetics) बनाम जीनोमिक्स
(genomics) में देखें, जेनेटिक्स
(genetics) जीन (gene) कार्यों
का अध्ययन है इसलिए
यदि आप क्लासिक मॉर्गन
मॉडल को देखते हैं
जिसे आपने फेनोटाइप
(phenotype) में देखा है
और इसे जीनोम (genome)
के क्षेत्र में मैप
करने की कोशिश करते
हैं और फिर जीन (gene)
को ढूंढें और फिर
कहें कि यह क्या है।
जीनोमिक्स (genomics) ने
रास्ता बदल दिया
है क्योंकि अब आप
सभी जीनों (genes) को समझ
गए हैं कि कितने जीन
हैं, यह किस प्रकार
के प्रोटीन के लिए
कोड कर सकता है, लेकिन
जो आप नहीं जानते
हैं कि फ़ंक्शन क्या
है।
एक प्रतिलेखन कारक
आपको उत्पाद को पचाने
में मदद कर सकता है
या यह आपकी दृष्टि
में हो सकता है या
यह कुछ और हो सकता
है।
इसलिए प्रति प्रोटीन
प्रोटीन यह नहीं
कहता कि फेनोटाइप
(phenotype) के संदर्भ में
अंतिम कार्य क्या
है।
उसके लिए आप जीन को
क्या हटाते हैं और
फेनोटाइप (phenotype) सही
देखते हैं।
तो यह फेनोटाइप (phenotyoe)
का जीनोटाइप (genotype)
है जो संभव था कि आप
जीनोमिक्स (genomics) के
दृष्टिकोण से जानते
हैं लेकिन फिर भी
चुनौतियां हैं तो
आप कैसे परख रहे हैं
जैसे कि आप जानते
हैं कि मुझे नहीं
पता कि जब मैं जीनोमिक
दृष्टिकोण (genomics approach)
का उपयोग करके एक
नया जीन पाता हूं।
अब मैं इसे हटा देता
हूं लेकिन मुझे इसके
कार्य को परखने की
जरूरत है ताकि मैं
सब कुछ फेनोटाइप
स्तर (phenotype level) पर नहीं
देख पाऊं।
उदाहरण के लिए एक
जीन कोशिका विभाजन
में शामिल होता है
और मैं उस जीन (gene) को
बाहर निकाल देता
हूं, इसलिए मैं उस
फेनोटाइप (phenotype) को
कभी नहीं देख पाऊंगा
क्योंकि हर बार जब
आप जीन (gene) को हटाते
हैं तो कोशिका जीवित
नहीं होगी क्योंकि
यह विभाजित नहीं
हो सकती है।
इसलिए इस दृष्टिकोण
को देखते हुए मैंने
एक नॉकआउट (knockout) बनाया
है या जो कुछ भी है,
यह मुझे इसे अलग करने
में मदद करने वाला
नहीं है।
इसलिए आपके पास विभिन्न
प्रकार के कार्यों
को समझने के लिए एक
शक्तिशाली assays होना
आवश्यक है, इसलिए
यहाँ assays है, उदाहरण
विकास, सेल डिवीजन
या इसके विपरीत के
लिए एक विशेष फ़ंक्शन
के लिए assays समर्पित
है।
वे कौन से जीन हैं
जो कोशिका मृत्यु
में मदद करते हैं,
इसलिए हमारे सभी
सेल का परिमित विभाजन
होता है, इसके बाद
वे आपको विभाजित
करना जानते हैं और
वे मर जाते हैं, इसलिए
अब आप जानते हैं कि
कोशिका मृत्यु या
प्रो एपोप्टोटिक
प्रोटीन (apoptotic protein)
को ट्रिगर करने वाले
जीन (gene) हैं । तो ये
प्रोटीन क्या हैं,
जीन (gene) क्या हैं, आप
इसके लिए स्क्रीन
कैसे करते हैं, ठीक
है।

English: 
that are involved in this process you know
So that in fact you know there are several
implications I will show you one more example
in fact this paper used the zebra-fish model
to understand you know a gene which is even
involved in human development function For
example this particular gene called FAN1 mutation
in the gene causes uhhh interstitial nefrtiti
some defect in the kidney function and it
is genetic mutation it is a severe condition
affecting the human And and they found the
mutation but they were not sure how does it
really this gene or its or its mutation affect
a kidney function So they went to this in
fact they stared with the zebra- fish model
they used the morpholinos to knockout the
genes and looked at how the kidney being developed
their function and there are able to validate
and show that the same gene is involved in
human as well as in zebra-fish in the same
function that is how the kidney functions
right

English: 
So that is the power of these uhhh approaches
here your approach is unbiased you are not
looking at any gene you are looking at every
gene Every end product is what is the functional
out come in regard to kidney or regard to
skeletal development regard to mitosis You
are looking at the process and you are looking
at all the genes that are involved in the
process so you are able to identify all the
genes involved in that particular process
So that is pretty much uhhh the end of the
functional genomics and we will end here and
then we will again look into some other analysis
especially on how you can look at the expression
of the gene because so far you are looking
at how you delete the genes and how you engineer
the genome or destabilise the RNA and how
the function is affected
In the next lecture we will look into how
we can look at the expression patterns expression

Hindi: 
तो यह इस बात पर निर्भर
करता है कि यह किस
प्रकार का assays है, जिसे
कार्यात्मक (functional)
जीनोमिक्स (genomics) कहा
जाता है।
जीनोम (genome) में सभी
जीनों के कार्य निर्धारित
करते हैं।
तो एक परख सभी जीनों
के कार्य को प्रदर्शित
करने में आपकी मदद
करने वाली नहीं है।
इसलिए हम कुछ काल्पनिक
परियोजनाओं पर गौर
करने जा रहे हैं, जो
मैं आपको दिखाने
जा रहा हूं, फिर साहित्य
से कुछ उदाहरण हैं
कि कैसे लोगों ने
बड़ी संख्या में
जीन (gene) के कार्य को
समझने के लिए इस कार्यात्मक
(functional) जीनोमिक्स दृष्टिकोण
(functional genomics approach) का उपयोग
किया है जो वे सभी
एक विशेष मार्ग में
कार्य करते हैं।
हम कहते हैं कि हमारी
परियोजना माइटोसिस
कोशिका विभाजन (mitosis
cell division) में शामिल सभी
जीनों की पहचान करने
के लिए है, हम सभी
सम्‍मेलन के कारण
बढ़ रहे हैं यदि आपके
शरीर में कोई घाव
कट गया है, तो आपको
पता चल जाता है कि
माइटोसिस (mitosis) के
कारण भरा और चंगा
हो जाता है, इसलिए
आप जो कुछ भी जानते
हैं वह सब कुछ माइटोसिस
(mitosis) है।
तो आइए हम देखते हैं
कि क्या आप अपने जीनोम
(genome) में मौजूद उन
सभी जीनों (genes) की पहचान
करेंगे जो माइटोसिस
(mitosis) में मदद करते
हैं।
दृष्टिकोण यह है
कि अब आपके पास फिर
से उपयुक्त दृष्टिकोण
के लिए जाना है, लेकिन
वहाँ हम विभिन्न
दृष्टिकोणों पर चर्चा
कर रहे हैं हम इसका
उपयोग जीनोमिक्स
अनुप्रयोगों (genomics
applications) के लिए कर सकते
हैं।
तो आइए हम एक सरल दृष्टिकोण
आरएनएआई (RNAi) पर ध्यान
दें क्योंकि मानव
म्यूटोसिस (mitosis) हम
अध्ययन करने जा रहे
हैं और फिर हमारे
पास जीनोम (genome) वाले
प्रत्येक जीन (gene)
के लिए siRNA द्वैध है,
इसलिए मेरे पास उपकरण
हैं इसलिए मैं इस
दोहरे द्वैध को सेल
के रूप में पेश करने
जा रहा हूं परिणाम
यह होगा कि आप जानते
हैं कि इस सेगमेंट
(segment) में जो भी आरएनए
(RNA) करता है, उसे नीचा
दिखाया जाएगा।
इसलिए, उस सेल में
प्रोटीन कम हो जाएगा
और यदि वे उस फ़ंक्शन
के लिए बहुत महत्वपूर्ण
हैं, जो फ़ंक्शन रहता
है, तो आप स्क्रीन
के लिए बड़ी संख्या
में जीन (gene) का उपयोग
कर सकते हैं क्योंकि
बस मुझे आपको पता
है कि उन्हें सेल
में डाल दिया है।
दूसरा इसके लिए जीवित
कोशिकाओं की आवश्यकता
होती है क्योंकि
मैं एसएक प्रक्रिया
है जो एक मृत सेल में
अध्ययन नहीं किया
जा सकता है, इस अर्थ
में मैं कोशिका विभाजन
के बारे में बात कर
रहा हूँ।
इसलिए मुझे उन कोशिकाओं
को देखना है जो विभाजित
करते हैं ताकि विभाजन
एक प्रक्रिया है
जिसके लिए मैं स्कोर
करने जा रहा हूं।
इसलिए मुझे उस सेल
को देखने में सक्षम
होना चाहिए जो जीवित
हैं इसलिए आप सामान्य

Hindi: 
रूप से ऐसा कैसे करेंगे
जब आप माइक्रोस्कोपी
(microscopy) के बारे में
बात करते हैं तो यह
मुश्किल है कि आप
दाग कोशिकाओं को
जानते हैं जब तक कि
आपने उन्हें तय नहीं
किया है और आप कुछ
एंटीबॉडी (antibody) और
इतने पर उपयोग कर
रहे हैं।
इसलिए, आपको ऐसे तरीकों
के साथ आना होगा ताकि
लोग अब हम इसे फ्लोरोसेंट
प्रोटीन (fluorescent protein)
के रूप में उपयोग
कर सकें, ये प्रोटीन
हैं जो आम तौर पर समुद्री
जानवरों में मौजूद
होते हैं जो उन परिस्थितियों
में रहते हैं जहां
यह उतना उज्ज्वल
नहीं है।
वे प्रकाश प्रकार
के फ्लोरोसेंट प्रोटीन
(fluorescent protein) का उत्सर्जन
करते हैं जिन्हें
GFP कहा जाता है और लोगों
ने इस GFP को इंजीनियर
बनाया है ताकि आप
प्रोटीन को फ्लोरोसेंट
विभिन्न रंगों के
बारे में जान सकें
उदाहरण के लिए RFP लाल
फ्लोरोसेंट प्रोटीन
(fluorescent protein), पीले फ्लोरोसेंट
प्रोटीन (fluorescent protein)
और इतने पर मैं क्या
कर सकता हूं।
मैं एक प्रोटीन का
उपयोग कर सकता हूं
जो आपके सेल में सामान्य
रूप से मौजूद होता
है जैसे कि प्रोटीन
जो फ्यूज हो गया है,
अब GFP तो अब फ्यूज किया
हुआ प्रोटीन जो भी
कार्य करने में सक्षम
है उसे करने के लिए
कार्य करेगा लेकिन
यह भी सही तरीके से
विकसित होगा आपको
बताएगा कि प्रोटीन
कहां है।
मान लीजिए कि अगर
मैं एक प्रोटीन का
उपयोग कर रहा हूं
जो धुरी से बांधता
है तो आप उन तंतुओं
को जानते हैं जो गुणसूत्र
(chromosome) से बांधते हैं
और खींचते हैं जो
आपने पाठ्य पुस्तक
में पढ़े होंगे।
यदि वह स्पिंडल जीएफपी
(GFP) के रूप में प्रोटीन
बनाता है तो यह कुछ
इस तरह दिखाई देगा
ताकि स्पिंडल फ़्लुसेज़(spindle
fluoresce) हो जाए तो मैं
देख सकता हूं कि मैं
ठीक कहता हूं कि यह
एक विशेष सेल डिवीजन
है या बिल्कुल विभाजित
नहीं है, इसलिए मैं
सही विश्लेषण करने
में सक्षम हूं।
अन्य महत्वपूर्ण
तत्व क्या है जो मुझे
स्वचालित करने में
सक्षम होना चाहिए,
इसलिए मैं कुछ 40,000
जीनों (genes) को स्क्रीन
पर देख रहा हूं ताकि
किसी को या उनमें
से सैकड़ों प्रक्रिया
में शामिल हो सकते
हैं, लेकिन मैं आपको
यह मैन्युअल (manual) रूप
से अध्ययन नहीं कर
सकता।
अगर मुझे इस विशेष
प्रक्रिया के लिए
उस 40,000 में से हर एक
जीन के कार्य का अध्ययन
करना है, तो मुझे पता
है कि सिर्फ एक जीन
(gene) के लिए घंटों और
घंटों का समय बिताना
होगा क्योंकि इसकी
कोशिकाओं को विभाजित
होने में लगभग 24 घंटे
लगते हैं।
इसलिए अधिकतम पर
मैं 2 दिन या 3 दिन में
समाप्त कर सकता हूं
मैं पुष्टि कर सकता
हूं कि एक जीन (gene) शामिल
है या नहीं।
इसलिए यह संभव नहीं
है क्योंकि आप मूल
रूप से सोते हुए, माइक्रोस्कोप
पर बैठकर और इसकी
कठिन थकाऊ प्रक्रिया
का अवलोकन किए बिना
खर्च नहीं कर सकते
हैं, इसलिए आपको पुट

English: 
profile of various genes in a process

Hindi: 
के माध्यम से उच्च
होना होगा जिसका
अर्थ है कि आप एक ही
समय में बड़ी संख्या
में नमूनों को देख
सकें।
यह स्वचालित है जिसका
अर्थ है कि आप वहां
नहीं बैठते हैं मशीन
उस अधिकार को करती
है।
तो यह उल्लेखनीय
है क्योंकि आप जानते
हैं कि आपके पास ऐसी
प्लेटें हो सकती
हैं, जिन्हें आप जानते
हैं कि आपके पास 96
कुएँ हैं, उदाहरण
के लिए यहाँ जो दिखाया
गया है, लेकिन आप 400
या तो बहुत करीब जा
सकते हैं और हर एक
को आपने कुछ कोशिकाओं
में बीज दिया है और
फिर हर एक में अच्छी
तरह से आपने दिए गए
जीन के लिए siRNA दिया
है।
तो एक प्लेट में मैं
96 के लिए स्क्रीनिंग
(screening) कर रहा हूं, आप
जानते हैं कि मैं
जीन (gene) को जानता हूं
कि क्या आप प्रतिक्रिया
को माप सकते हैं, तो
आपके पास एक ऐसी प्रणाली
है जिसमें आप जानते
हैं कि आप सेल का विश्लेषण
करने में सक्षम हैं,
लेकिन खुद कंप्यूटर
द्वारा नहीं।
तो आपने पैटर्न और
उनके एल्गोरिदम (algorithms)
दिए हैं जो इमेजिंग
पैटर्न को देखता
है क्योंकि आप प्रतिदीप्ति
से कोशिकाओं को देखने
जा रहे हैं और एल्गोरिथ्म
(algorithms) आपको देखेगा
कि फ्लोरोसेंट (fluorescent)
किस प्रकार का पैटर्न
देता है और यह ठीक
है इस सेल को कॉल करेगा
माइटोसिस (mitosis) में
प्रवेश किया या यह
माइटोसिस (mitosis) से
बाहर नहीं निकला।
तो इस तरह से आप विश्लेषण
कर सकते हैं और बता
सकते हैं कि वे कौन
से जीन हैं जो माइटोसिस
(mitosis) को प्रभावित
कर रहे हैं या माइटोसिस
(mitosis) को प्रभावित
नहीं कर रहे हैं।
जाहिर है कि जिन माइटोसिस
(mitosis) को प्रभावित
नहीं कर रहे हैं वे
बहुत बड़े होने जा
रहे हैं क्योंकि
उनके पास कई प्रकार
के कार्य हैं लेकिन
फिर आप जा रहे हैं
सौ जीनों की सूची
या जो कुछ भी माइटोटिक
फ़ंक्शन (mitotic function) में
शामिल हैं, वह स्क्रीन
है जिसका हम उपयोग
करते हैं।
आइए हम चार्ट चार्ट
में देखते हैं कि
यह ऐसा कैसे करता
है एक कदम, सेल विभाजन
की प्रक्रिया को
परखने के लिए एक मॉडल
सिस्टम स्थापित करें
ताकि आप क्या करें,
आपको पता है कि आपके
पास सेल लाइन है जो
आपने सेल लाइन को
इंजीनियर किया है
जैसे कि यह एक प्रोटीन
को व्यक्त करने वाला
है जो उदाहरण के लिए
ट्यूबलिन को स्पिन्डल
सूक्ष्मनलिका मार्कर
(spindle microtubule marker) से बांधता
है और उदाहरण के लिए
हिस्टोन (histone) जो क्रोमोसोम
(chromosome) के लिए एक मार्कर
है क्योंकि हिस्टोन
डीएनए के लिए बाध्य
मूल प्रोटीन हैं
इसलिए जो आप यहां
देख रहे हैं, वह यह
है कि ये लाल रंग के
गुणसूत्र (chromosome) हैं
और हरे रंग के धुरी
हैं जो गुणसूत्र
(chromosome) को दो चीजों
की ओर खींच रहे हैं,
इसलिए अगर मैं कंप्यूटर
को इस पैटर्न को खोजने
के लिए कंप्यूटर
बना सकता हूं तो क्या
आप माइक्रोस्कोप
(microscope) के माध्यम से

Hindi: 
जानते हैं या 24 घंटे
या 36 घंटों तक कोशिकाओं
को देख रहे हैं यदि
उस सेल ने इस पैटर्न
को दिखाया है, जिसका
अर्थ है कि आप को यह
पता है कि यह क्या
है जो सिस्टम को सही
स्कोर करने में सक्षम
है।
और आप इस तरह की प्लेट
में कोशिकाओं का
वर्णन करने में सक्षम
हैं और फिर आप जो करने
जा रहे हैं, वह यह
है कि यह एक प्रक्रिया
है जिसमें एक स्नैप
शॉट नहीं है।
आप 36 घंटे की अवधि
के लिए सेल को देखने
जा रहे हैं, क्योंकि
इसका विभाजन सामान्य
तौर पर होता है, यह
लगभग 24 से 30 घंटे का
होता है, जिससे सेल
विभाजित हो सकता
है, इसलिए आप यह देखने
जा रहे हैं कि कंप्यूटर
में कैमरा माइक्रोस्कोप
(microscope) की छवि है उदाहरण
के लिए हर दस मिनट
के अंतराल पर यह एक
तस्वीर लेगा।
इसलिए जब आपके पास
उस तरह का स्नैप लिया
जाता है और तब आपको
पता चलता है कि आप
इसे एक निरंतर तरीके
से चलाते हैं तो यह
एक फिल्म की तरह दिखाई
देगा और यह चित्र
आपके लिए इस्तेमाल
किया जा सकता है ताकि
आपको पता चल सके कि
क्या सेल ने म्यूटोसिस
(mitosis) या एक्साइटेड
मिटोसिस (exited mitosis) में
प्रवेश किया है या
यह नहीं है प्रवेश
करते समय या बाहर
निकलने पर बिल्कुल
नहीं।
तो उस तरीके से करना
आसान है।
तो फिर आपके पास उदाहरण
के लिए दूसरी चुनौतियाँ
हैं, जब आपके पास 96
अच्छी प्लेट है तो
आप माध्यम जोड़ना
चाहते हैं, तो आप पिपेट
(pipette) नहीं ले सकते,
पिपेट को एक में जोड़कर
रखें क्योंकि तब
आप कब खत्म करेंगे
आपको पता नहीं है
कि सभी तरल thats को दूर
करने के लिए, तो आप
जानते हैं कि आप या
तो रोबोटिक वर्क
स्टेशन (robotic work station)
या पिपेट (pipette) को जानते
हैं जो एक ही समय में
डिस्पेंस कर सकते
हैं या तो आप 9 अच्छी
तरह से जानते हैं,
8 अच्छी तरह से या
16 कुओं जो भी यह सही
है ताकि फिर से मदद
मिले और फिर आपके
पास उदाहरण के लिए
एक कार्य केंद्र
है जिसमें आप पूरी
तरह से जानते हैं
कि आप हर अंतराल पर
इमेजिंग को जानते
हैं और इसे संसाधित
करते हैं और आपको
इन सभी चीजों को बताते
हैं।
तो यह सब करने योग्य
है और इसके साथ आप
2 दिनों के अंत में
सक्षम होंगे - 3 दिन
आप कॉल कर पाएंगे
कि कितने जीन (gene) संभवत:
माइटोसिस (mitosis) को
प्रभावित करते हैं।
यह एक लैंड मार्क
पेपर है, जो म्यूटोसिस
सेल डिवीजनों में
शामिल जीन के रूप
में पहचानने के लिए
आरएनएआई (RNAi) स्क्रीन
(screen) का उपयोग करते
हुए एक ऐसे दृष्टिकोण
का उपयोग करता है।
तो आप देख सकते हैं
कि यह पेपर 2010 में
प्रकृति में आया
था, यह समय की चूक
माइक्रोस्कोपी द्वारा
मानव जीनोम की एक
फेनोटाइपिक प्रोफाइलिंग
(phenotypic profiling) है जो कोशिका
विभाजन जीन को प्रकट
करता है।

Hindi: 
जिसे प्रत्येक जीन
में मानव जीनोम के
रूप में कहा जाता
है, लगभग और कोशिका
विभाजन में इसका
कार्य, इसलिए अब यह
है कि हमने पहले क्या
चर्चा की है, आप जीनोमिक
(genomic) दृष्टिकोण के
माध्यम से जीन में
जाने वाले फेनोटाइप
(phenotype) को देख रहे हैं,
जिसे आप सभी जीनों
की पहचान करते हैं,
अब आप जीन (gene) को हटाना
चाहते हैं और कार्यों
को देखना चाहते हैं,
अब हम केवल एक जीन
को नहीं देख रहे हैं।
हम प्रत्येक जीन
(gene) को एक उच्च थ्रूपुट
स्क्रीनिंग (throughput
screening) का उपयोग करके
देख रहे हैं जिसे
आप किसी दिए गए फ़ंक्शन
में शामिल जीन (gene)
के सेट की पहचान करने
के लिए स्वचालित
प्रक्रिया जानते
हैं।
इसलिए आपको assays के
साथ आना होगा।
इसलिए उन्होंने 22
हजार मानव जीनों
की जांच की और फिर
उन्होंने पाया कि
1249 जीन (gene) siRNA माइटोटिक
फेनोटाइप (mitotic phenotype)
प्रदर्शित करते हैं
और फिर 500-700 जीन आपके
साथ मिटोटिक फेनोटाइप
प्रदर्शित करते हैं,
जिसका अर्थ है कि
आप दो अलग-अलग siRNA का
उपयोग कर सकते हैं
और इसी तरह।
आइए हम उस पर अमल नहीं
करते हैं, लेकिन ये
सही हैं, एक बार जब
आपको कुछ सकारात्मक
हिट मिल जाते हैं,
तो आप इसे सत्यापित
करने जा रहे हैं और
वास्तव में यह मामला
और इसी तरह आगे बढ़ता
है। 
तो ये कुछ चित्र हैं
जो हमें दिखाए गए
हैं हम देख सकते हैं
कि ये समय व्यतीत
होने का समय 21:48 घंटे
है और आप देख सकते
हैं कि आप 25 मिनट, 46
मिनट, 47, 47, 54 और इसी
तरह से जानते हैं
और वे दिखा रहे हैं
यह कोशिका कितनी
सुंदर रूप से विभाजित
हो रही है, आप देख
सकते हैं कि यदि आप
बहुत ध्यान से देखते
हैं तो आपके पास हिस्टोन
(histone) है जो गुणसूत्र
(chromosome) को चिह्नित
कर रहा है, आपके पास
स्पिंडल है, आपके
पास सेल डिवाइड है,
इसलिए यह सामान्य
प्रक्रिया है, लेकिन
इन स्थितियों में
भिन्नता और दस्तक
है।
कुछ जीन (gene) जो इस प्रकार
हैं जैसे कि OGG या CNEPE
या यहाँ जो कुछ भी
है उसे दिखाया गया
है, इस प्रक्रिया
को बदल दिया गया है।
 
या तो यह समसूत्रण
(mitosis) में प्रवेश नहीं
कर रहा है या कोशिका
विभाजन उचित नहीं
है, आप देख सकते हैं
कि कोशिकाओं को अलग-अलग
विभाजित करने वाले
फेनोटाइप (phenotype) ठीक
तरह से विभाजित नहीं
होते हैं जो एक साथ
आते हैं और यह विभाजित
नहीं होता है जो आपको
बहुत बताता है कि
आप इस जीन परिणामों
के नुकसान को जानते
हैं एक फेनोटाइप
(phenotype) जो माइटोसिस
(mitosis) के लिए आदर्श
नहीं है इसलिए यहां
आप वास्तव में किस
जीन के बारे में परेशान
किए बिना एक दृष्टिकोण
के साथ गए और स्क्रीन
के अंत में आप सैकड़ों
जीनों की पहचान करने
में सक्षम हैं जो
प्रक्रिया में शामिल
हैं।

Hindi: 
ताकि आप उच्च throughput
प्रक्रिया को जानते
हैं।
अब मैं फिर से एक ऐसे
दृष्टिकोण के बारे
में बात करने जा रहा
हूं, जिसे भूमि चिन्ह
की खोज के रूप में
माना जाता है, जिसमें
उन्होंने मानव जीन
या प्रोटीन की पहचान
की जो जीन (gene) द्वारा
कोडित होते हैं जो
इन्फ्लूएंजा वायरस
(influenza virus) को हमारे मानव
कोशिकाओं में प्रवेश
करने में मदद करते
हैं।
तो वायरस केवल अपने
आप ही प्रवेश नहीं
करता है कुछ ऐसे हैं
जो हमारे स्वयं के
कुछ तंत्र का उपयोग
करते हैं जो जीवित
रहते हैं और खुद को
संक्रमित करते हैं।
इसलिए यदि हम उन प्रोटीनों
की पहचान कर सकते
हैं, तो हम बेहतर चिकित्सीय
या निवारक उपायों
के साथ आ सकते हैं,
जो आप यहाँ जानते
हैं।
उन्होंने ऐसे जीन
(gene) की पहचान की जो
इस प्रक्रिया में
मदद करते हैं कि उन्होंने
फिर से स्वचालित
प्रक्रिया का उपयोग
कैसे किया, आइए हम
सभी विवरणों में
शामिल न हों, लेकिन
यहां जो दिखाया गया
है, वह यह है कि एक
प्रक्रिया जो आपके
पास एक वायरल कण (viral
particle) है जिसे आप जानते
हैं कि सेल में और
फिर से यह अपनी खुद
की प्रतियां बनाता
है और फिर से जाता
है और संक्रमित करता
है और इसी तरह।
इसलिए उन्होंने जो
किया है, उन्होंने
फिर से उसी दृष्टिकोण
का उपयोग किया है
जिसका अर्थ है कि
आपके पास एक ऐसी प्रणाली
है जिसमें आप वायरस
का परिचय दे रहे हैं
और यह देख रहे हैं
कि यह कैसे फिर से
कोशिका में प्रवेश
करता है और खुद की
प्रतियां बनाता है
और फिर समय का उपयोग
करके संक्रमण का
एक और दौर करता है
लैप्स वीडियोग्राफी
(lapse videography) और फिर इसके
ऊपर वे जानते हैं
कि आपने इस प्रक्रिया
को प्रभावित करने
वाले जीन (gene) को देखा
है।
अब आप प्रत्येक जीन
(gene) को एक या उच्च थ्रूपुट
स्क्रीन के बाद एक-एक
करके नाक करते हैं
और देखते हैं कि जब
आप किसी दिए गए जीन
(gene) को बाहर निकालते
हैं या जब भी आप नीचे
दस्तक देते हैं, तो
संक्रमण की यह प्रक्रिया
सही बदल जाती है।
तो जीन (gene) की पहचान
करने के लिए छवि प्रसंस्करण
(image processing) के इस बहुत
ही समान दृष्टिकोण
का उपयोग और वे यह
बताने में सक्षम
हैं कि यह एक मशीनरी
का उपयोग करता है
जो आम तौर पर सेल में
सेल में बने असामान्य
प्रोटीन (abnormal proteins)
को साफ करने के लिए
उपयोग करता है।
तो यह उस मशीनरी अपहरण
का उपयोग करता है
जो अपने स्वयं के
लाभों के लिए और यह
गुणा करने में सक्षम
है और इसी तरह से क्या
आप जानते हैं कि वे
जिस तरह से किए गए
हैं।
तो बस फिर से एक फ्लो
चार्ट (flow chart) दिखाने
के लिए कि आपके पास
एक ऐसा सिस्टम है

Hindi: 
जिसमें आपके पास
बड़ी संख्या में
आप जानते हैं कि एक
बहु अच्छी तरह से
प्लेटों के रूप में
क्या कहा जाता है
जिसे आपने कोशिकाओं
को बोया है, आपने वरीयता
प्राप्त की है वायरस
(virus), आपके पास वहां
कुछ घटनाओं की छवि
बनाने के तरीके हैं
और फिर कंप्यूटर
इन छवियों को स्कोर
करता है और आपको बताता
है कि क्या संक्रमण
उचित है कि क्या वायरस
को दोहराने और अधिक
कण बनाने में सक्षम
है या नहीं।
इसके साथ ही आप इस
प्रक्रिया में मदद
करने वाले जीन (gene)
को लक्षित करने में
सक्षम हैं, इस तरह
यह किया जाता है।
तो फिर से ये आरएनएआई
(RNAi) का उपयोग कर रहे
हैं जैसा कि मैंने
कहा कि जीन (gene) की खराबी
डुप्लेक्स द्वारा
की जाती है जो लोग
उपयोग करते हैं और
यह आरएनए (RNA) स्क्रीन
कुछ ऐसा है जो अब नियमित
रूप से किया जाता
है और मैं सिर्फ इस
आरएनए (RNA) स्क्रीन
को देता हूं।
यह एक खोजपूर्ण खोज
है और आप पाएंगे कि
पहले से ही जब मैं
कहता हूं कि यह स्क्रीन
आरएनए (RNA) या व्यक्तिगत
जीन नहीं है।
आप हजारों निर्माणों
का उपयोग करके एक
विशेष प्रक्रिया
के लिए स्क्रीनिंग
जानते हैं जिसके
बारे में आप बात कर
रहे हैं जो कि हजारों
जीनों (genes) को पीटता
है।
इसलिए जब आप देखते
हैं कि पहले से ही
700 पेपर हैं और आप यहां
दाईं ओर देख सकते
हैं तो यह हिस्टोग्राम
(histogram) केवल इस बारे
में बात करता है कि
आप कितने कागजों
को जानते हैं जो हर
साल इन आरएनए (RNA) स्क्रीन
का उपयोग बढ़ाते
हुए करते हैं, फिर
आप देख सकते हैं कि
यह आपको पता है शायद
2017 and अब 16 क्षमा करें
और जब संभवत: यह दृष्टिकोण
आया है।
आप पाते हैं कि कागजों
की संख्या बढ़ जाती
है इसका मतलब है कि
तकनीक को परिष्कृत
किया जा रहा है और
अधिक से अधिक समूह
इसका उपयोग कर रहे
हैं क्योंकि यह स्क्रीन
को सही तरीके से खोजने
के लिए बहुत ही वांछनीय
है।
तो यह वास्तव में
हमें यह पहचानने
में मदद करता है कि
यह आरएनएआई (RNAi) के
बारे में क्या है।
और इसकी सादगी और
शक्ति के कारण आप
उन जीनों की पहचान
करने के लिए जानते
हैं जिनके कार्य
में आप खो गए हैं,
यह जानते हैं कि इस
खोज ने मोफायर और
मेलो को महान पुरस्कार
प्रदान किया था और
यह वास्तव में जबरदस्त
अनुप्रयोग है।
इसलिए हम एक और ऐसे
दृष्टिकोण को देखने
जा रहे हैं जिसे मोर्फोलीनो
(morpholino) कहा जाता है
फिर से यह डीएनए अनुक्रम
(DNA sequence) आधारित नॉकआउट
रणनीति है जिसे आप
मूल रूप से ज़ेबरा-मछली
के लिए वर्णित करते
हैं।
आइए हम देखें कि यह
क्या है, ये मॉर्फोलिनोस
(morpholinos) और कुछ नहीं
हैं, लेकिन ओलिगो
आपको पता है कि ये
सिंथेटिक एकल फंसे

Hindi: 
हुए डीएनए (DNA) हैं,
लेकिन आप जानते हैं
कि डीएनए (DNA) की पिछली
हड्डी जो बनती है,
वे संशोधित हैं जैसे
कि आप जानते हैं यह
एक स्थिर है अन्यथा
इसे नीचा दिखाया
जा सकता है और ये एंटीसेंस
(antisense) हैं जिसका अर्थ
है कि वे आरएनए (RNA)
के लिए प्रशंसा करते
हैं और उनके पास जीन
(gene) अभिव्यक्ति को
नीचे गिराने की उनकी
दक्षता है जिसका
अर्थ है कि यह एक द्वैध
बनाता है जैसे यहां
दिखाया गया है और
यह आपका आरएनए (RNA)
है और यह आपका मॉर्फोलिनो
(morpholino) यह कुछ नहीं
है, लेकिन एक ऑलिगो
(oligo) है जिसमें एक संशोधित
5prime अंत है और फिर आपके
पास यह आधार ठीक है।
इसलिए वे सभी उस सही
की तरह बेस पेयर बनाते
हैं, और उनके पास एक
ही मानक (standard) न्यूक्लियर
बेस (nuclear bases) एडेनिन
(adenine), साइटोसिन (cytosine),
ग्वानिन (guanine) होते
हैं, लेकिन इसमें
जो बदलाव दिखाई देते
हैं, वे यहां गैर-आयनिक
(non-ionic) हैं, यह मूल रूप
से इस न्यूक्लिक
एसिड (nucleic acid) को स्थिति
में जीवित रहने के
लिए बनाता है।
क्योंकि आपकी कोशिका
अन्यथा आप उन्हें
सही तरीके से नीचा
दिखा सकती है और यह
परख प्रणाली है जिसके
साथ लोगों ने इसे
विकसित किया है और
इसे मान्य किया है
क्योंकि ये ज़ेबरा-मछली
हैं।
ये ऐसे जानवर हैं
जो अण्डाकार अंडे
देते हैं और मध्यम
पानी में शुक्राणु
बनाते हैं और निषेचन
बाहर होता है और आप
शून्य अर्थ से देख
सकते हैं कि युवा
से वयस्क तक का निषेचन
केवल बाहर ही होता
है इसलिए आप विकास
का पालन कर सकते हैं,
आप जानते हैं उदाहरण
के माउस के विपरीत
एक माइक्रोस्कोप
(microscope)।
विकास प्रणाली, गर्भाशय
के भीतर होता है, तब
आप इसका पालन नहीं
कर सकते हैं, लेकिन
यहां बाहरी है इसलिए
यदि आप वास्तव में
उन जीनों (genes) का अध्ययन
करना चाहते हैं जो
प्रारंभिक विकास
में शामिल हैं।
यह सबसे अच्छे मॉडल
में से एक है क्योंकि
इसकी कशेरुक और बाहरी
निषेचन, बाहरी विकास
और पूरी प्रक्रिया
पारभासी है।
आपको किसी भी फ्लोरोसेंट
प्रोटीन (fluorescent protein)
की किसी भी रंग की
आवश्यकता नहीं है
और आप सभी देख सकते
हैं कि ये चमकीले
भरे हुए इमेजिंग
हैं बस आप एक माइक्रोस्कोप
(microscope) पर देख रहे हैं
आप सभी प्रक्रिया
को देखने में सक्षम
हैं जो आप देख सकते
हैं कि यह पशु पोल
है और आपके पास कोशिकाएं
हैं विभाजन वगैरह।
तो फिर यह भ्रूण बाहर
आ रहा है और आप इसे
देख सकते हैं।
लोगों ने इसका उपयोग
किया है, इसलिए यदि
आप उन जीनों (genes) को
देख रहे हैं जो विकास
प्रक्रियाओं में
शामिल हैं, तो आपको
केवल इन ओलिगो (oligos)
को लेना होगा और फिर
अंडे में इंजेक्ट
करना होगा और देखना
होगा कि यह प्रक्रिया
हो रही है या बाधा।
यदि जीन (gene) प्रक्रिया
के लिए महत्वपूर्ण
है तो आरएनए (RNA) बल्कि
यह एक डुप्लेक्स

Hindi: 
(duplex) बनाने जा रहा
है जिसका अनुवाद
नहीं किया जाएगा,
इसलिए आपके पास प्रोटीन
नहीं होगा।
तो इस प्रक्रिया
में बाधा उत्पन्न
होगी।
दूसरी ओर यदि प्रक्रिया
में शामिल नहीं किया
है तो प्रक्रिया
जारी रहेगी।
सवाल यह है कि यह ओलिगो
(oligo) या मॉर्फोलिनो
(morpholino) वास्तव में
जीन (gene) या आरएनए (RNA)
को कैसे प्रभावित
करता है।
ऐसे दो तरीके हैं
जो उदाहरण के लिए
कर सकते हैं यह आरएनए
(RNA) के splicing को भी प्रभावित
कर सकता है, इसलिए
यह ज्ञात है कि आपने
पाठ्यपुस्तक में
अध्ययन किया होगा
कि जब आपके पास एक
जीन (gene) होता है जिसमें
कई एक्सॉन (exon) होते
हैं तो इंट्रॉन अनुक्रम
(introns sequence) हटा दिया
जाना चाहिए।
यहाँ क्या दिखाया
गया है कि प्रोटीन
होते हैं जो आते हैं
और बांधते हैं और
फिर आरएनए को क्लीव
करते हैं जैसे कि
इंट्रॉनिक क्षेत्र
को हटा दिया जाता
है, इसलिए जब आपके
पास यह मॉर्फोलिनो
(morpholino) उस तरह के अनुक्रम
को लक्षित करता है
जहां आपके पास इंट्रो-एक्सॉन
(intron-exon) सीमाएं होती
हैं तो क्या होगा?
यह है कि यह इस विभाजन
के गठन को रोक देगा
जो एमआरएनए के splicing
में मदद करता है।
इसलिए जब ऐसा होता
है तो आरएनए (RNA) को
क्लीव नहीं किया
जाएगा और कुछ कारक
अभी भी आरएनए (RNA) के
लिए बाध्य हैं और
आरएनए साइटोप्लाज्म
(RNA cytoplasm) में कभी नहीं
आएगा, जिसके परिणामस्वरूप
आप जानते हैं कि आप
कार्यात्मक (functional)
होने के लिए नहीं
जा रहे हैं क्योंकि
यह कोई भी नहीं होगा
प्रोटीन।
दूसरी प्रक्रिया
यह है कि आप मॉर्फोलिनो
को इस तरह से बना सकते
हैं कि आप जानते हैं
कि आपके पास यह राइबोसोम
आरएनए (ribosome RNA) के लिए
बाध्यकारी है और
फिर पढ़ना है और फिर
आपके पास पेप्टाइड
का अनुवाद प्रक्रिया
होगी ताकि आप मॉर्फोलिनो
(morpholino) बना सकें जैसे
कि बड़े राइबोसोम
(ribosome) की असेंबली बाधा
है।
आप इसे आरएनए (RNA) के
5 मुख्य छोर पर बनाते
हैं और जहां विधानसभा
होती है इसलिए आप
अनुवाद को रोकते
हैं, इसलिए दोनों
दृष्टिकोणों में
मूल रूप से आप हैं
कि अंतिम परिणाम
यह है कि प्रोटीन
नहीं बना है, यह उतना
ही अच्छा है जितना
कि नहीं है जीन ऐसा
है कि आप कैसे करते
हैं।
मैं आपको कुछ उदाहरणों
को फिर से दिखाने
जा रहा हूं कि कैसे
लोगों ने कुछ विकास
संबंधी घटनाओं में
शामिल जीनों की पहचान
करने के लिए इस दृष्टिकोण
का उपयोग किया है।
आपने देखा होगा कि
विकासात्मक घटनाएं
होती हैं जिन्हें
क्रानियोफेशियल
मॉर्फोजेनेसिस (craniofacial
morphogenesis) कहा जाता है
जब आप भ्रूण (embryo) को
विकसित कर रहे होते
हैं तो आपके पास यह
खोपड़ी होती है जो

Hindi: 
आपके मुंह की छत बनाती
है और अन्य भाग ये
बहुत कसकर विनियमित
विकास प्रक्रिया
होती है जो लोगों
में विकृति होती
है इसके परिणामस्वरूप
विकास में उनका दोष
है क्योंकि यह फिर
से कुछ आनुवंशिक
दोष के कारण है जो
उनके पास है।
तो ऐसे जीन (gene) क्या
हैं जो इस तरह की प्रक्रिया
में शामिल हैं, इसलिए
इस अध्ययन को यहां
इस स्क्रीन में दिखाया
गया है कि उन्होंने
बड़ी संख्या में
जीनों को देखा है,
उन्होंने जीन (gene)
के कार्य को प्रभावित
करने के लिए मॉर्फोलिनोस
(morphogenesis) का उपयोग किया
है और देखा है कि कैसे
जीन क्या हैं जो कंकाल
के क्रानियोफेशियल
(craniofacial) विकास को प्रभावित
करते हैं क्योंकि
ये सभी संरक्षित
जीन (gene) हैं क्योंकि
वही जीन (gene) जो मानव
में भी इसी तरह कार्य
करते हैं।
तो आप देख सकते हैं
कि ये अन-इंजेक्टेड
भ्रूण (un-injected embryo) हैं,
ये सामान्य हैं आपकी
आंख है और फिर आपके
पास यह खोपड़ी आ रही
है और यह एक ऐसा जीन
(gene) है जब आप हार जाते
हैं तो आपको पता चलता
है कि खोपड़ी अच्छी
तरह से नहीं बन रही
है।
तो इस तरह से आप जल्दी
से इस प्रक्रिया
में शामिल जीन (gene)
के साथ आने में सक्षम
हैं जो आप जानते हैं।
ताकि वास्तव में
आपको पता चले कि इसके
कई निहितार्थ हैं।
मैं आपको एक और उदाहरण
दिखाऊंगा कि वास्तव
में इस पत्र ने ज़ेबरा-फ़िश
मॉडल का उपयोग किया
है ताकि आप एक जीन
(gene) को जान सकें जो
मानव विकास कार्य
में भी शामिल है।
। उदाहरण के लिए, जीन
में FAN1 उत्परिवर्तन
नामक इस विशेष जीन
(gene) से गुर्दे के कार्य
में कुछ खराबी के
कारण अंतरालीय नेफ्रैटिस
होता है और यह आनुवंशिक
उत्परिवर्तन (genetic
mutation) है, यह मानव को
प्रभावित करने वाली
एक गंभीर स्थिति
है।
और उन्होंने उत्परिवर्तन
(mutation) पाया लेकिन उन्हें
यकीन नहीं था कि वास्तव
में यह जीन या इसके
उत्परिवर्तन गुर्दे
के कार्य को कैसे
प्रभावित करते हैं।
इसलिए वे इस तथ्य
पर गए कि उन्होंने
ज़ेबरा-फिश मॉडल
के साथ प्रतिमा बनाई
है, उन्होंने मॉर्फोलिनोस
(morpholinos) का उपयोग जीन
(gene) को खटखटाने के
लिए किया और देखा
कि कैसे किडनी अपने
कार्य को विकसित
कर रही है और वे यह
सिद्ध करने में सक्षम
हैं कि एक ही जीन मानव
में शामिल है एक ही
कार्य में ज़ेबरा-मछली
के साथ-साथ किडनी
कैसे सही है।
तो यह इन दृष्टिकोणों
की शक्ति है, यहां
आपका दृष्टिकोण निष्पक्ष
है आप किसी भी जीन
को नहीं देख रहे हैं
जिसे आप प्रत्येक
जीन (gene) को देख रहे
हैं।
हर अंतिम उत्पाद
वही है जो कि गुर्दे
के संबंध में आया
है या माइटोसिस (mitosis)
के लिए कंकाल विकास
के संबंध में है।
आप इस प्रक्रिया
को देख रहे हैं और
आप सभी जीन (gene) को देख
रहे हैं जो इस प्रक्रिया

Hindi: 
में शामिल हैं इसलिए
आप उस विशेष प्रक्रिया
में शामिल सभी जीनों
की पहचान करने में
सक्षम हैं।
इसलिए यह कार्यात्मक
(functional) जीनोमिक्स (function
genomics) का अंत है और हम
यहां समाप्त हो जाएंगे
और फिर हम कुछ अन्य
विश्लेषणों पर विशेष
रूप से गौर करेंगे
कि आप जीन की अभिव्यक्ति
को कैसे देख सकते
हैं, क्योंकि अब तक
आप देख रहे हैं कि
आप कैसे हटाते हैं
जीन और आप कैसे जीनोम
(genome) को इंजीनियर करते
हैं या आरएनए (RNA) को
अस्थिर करते हैं
और फ़ंक्शन कैसे
प्रभावित होता है।
अगले व्याख्यान में
हम देखेंगे कि कैसे
हम एक प्रक्रिया
में विभिन्न जीनों
की अभिव्यक्ति पैटर्न,
अभिव्यक्ति प्रोफ़ाइल
को देख सकते हैं
